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【摘要】 细菌人工染色体标记一微珠分离（bacterial artificial chromosome on beads，BoBs）是一种新的用于检测染色体非整倍体和基因微缺失的产前诊断技术。本文将详细介绍BoBs技术的原理及流程，深度分析其优势和局限性，并探讨其在临床产前诊断中的应用价值。
【关键词】BoBs；产前诊断
【中图分类号】R714.53 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）18-0136-02
引言
胎儿染色体核型分析技术可准确诊断出胎儿染色体数目异常，以及染色体倒位、易位、大于5Mb的缺失等结构异常。近年来，随着高龄产妇的增加、产前诊断技术的发展，需要进行产前诊断的孕妇越来越多，核型分析检测周期长、操作繁琐，已无法满足临床的实际需求。针对这些问题，研究人员发明了多种胎儿染色体快速非整倍体筛查的新技术：定量荧光聚合酶链反应技术、荧光原位杂交技术和多重连接探针扩增技术等。但这些技术仅限于染色体的非整倍体检测，BoBs是新近发展起来的基于基因芯片技术平台开发的快速产前诊断技术[1]。
1.BoBs的技术简介
1.1 BoBs的原理和流程
BoBs技术是DNA样本序列和代表靶区域的细菌人工染色体探针序列的杂交过程[2]。样本通过酶法标记生物素，杂交后，荧光标记的抗生物素蛋白链菌素-藻红蛋白报告基因结合到标记的生物素上。男性和女性参考DNA也同时杂交。每个样本和参考的荧光比值显示探针所在位置样本中是否有重复和缺失。
1.2 BoBs的检测范围
BoBs技术具有更大的疾病覆盖范围，能够检测13、18、21号以及性染色体的拷贝数变化，以及9种微缺失综合征（DiGeorge、Williams-Beuren、Prader-Willi、Angelman、Smith-Magenis、Wolf-Hirschhorn、Cri du Chat、Langer-Giedion和Miller-Dieker）[3]。
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2.BoBs的特点
2.1 BoBs的优势
BoBs技术不需要细胞培养，降低了操作要求；BoBs技术检测96个样本仅需6小时，时间和成本都降低；BoBs技术更灵敏，能检测到微小的染色体微缺失；BoBs技术可以使用5～6个探针，提高了异常染色体检出的准确度[4]。总的来说，BoBs技术是一种快速、精确、高性价比的靶标型分子核型分析技术。
2.2 BoBs的局限性
BoBs技术只能检测染色体的目标区域的基因变异；不能测出染色体的平衡易位、倒位、点突变、倍性变化、单亲二倍体以及甲基化改变；对于嵌合体的敏感性低，无法检出低比例的嵌合体。
3.BoBs在临床上的应用
2011年，Gross[2]等人对BoBs技术进行了临床验证，他们首先对BoBs实验方法进行回顾性研究，证实了该技术的准确性，然后收集了104例羊水标本进行前瞻性试验，成功率为97%，敏感性及特异性100%。同年，Vialard[3]等用BoBs技术检测了616份样本，检测结果与核型分析比较，该技术具有较高的敏感性和特异性。2016年余宏盛[5]等采用BoBs技术对581名高危孕妇进行产前诊断，并与G显带分析结果进行比较，结果BoBs对于非整倍体的检出与核型分析一致，另还检出l例7号染色体的微重复、l例X染色体微缺失，但未能检出2例嵌合体、9例染色体结构异常以及2例数目异常。
4.结语
BoBs技术是近年才发展起来的染色体快速非整倍体筛查新技术，目前还未被广泛使用。该技术对比传统的核型分析以及其他平台，其快速、精确、通量高、操作简单等优势能满足临床的需求，值得推广。有研究表明[1]，微缺失综合征的发病概率与孕妇年龄不相关，而BoBs技术较其他检测方法更能检测出常见的染色体微缺失，有助于降低微缺失的发病率。当然BoBs技术本身存在一些局限性，无法完全取代核型分析，但其能与核型分析联合应用于快速产前诊断，充分发挥了细胞遗传学和分子遗传学产前诊断技术的互补优势，提高产前诊断的准确性，降低出生缺陷率。
【参考文献】
[1] Choy RK，Chen Y，Sun XF，et al. BACs-on-beads: a new robust and rapid detection method for prenatal diagnosis[J]. Expert Rev Mol Diagn.2014 Apr；14(3)：273-80.
[2] Gross SJ，Bajaj K，Garry D，et al.Rapid and novel prenatal molecular assay for detecting aneuploidies and microdeletion syndromes[J].Prenat Diagn.2011 Mar；31(3)：259-66.
[3] Vialard F,Simoni G,Aboura A,et a1.Prenatal BACs-on-Beads:a new technology for rapid detection of aneuploidies and microdeletions in prenatal diagnosis [J].Prenat Diagn，2011，31(5)：500-508.
[4] Cheng YK，Wong C，Wong HK，et al.The detection of mosaicism by prenatal BoBs? [J].Prenat Diagn，2013，33：42-49.
[5]余宏盛，吴远桥，金克勤等. BACs-On-Beads检测在581名高危孕妇产前诊断中的应用[J].中华医学遗传学杂志2016年6月第33卷第3期.
论文作者:李文娴,游敏,杨本艳姿,陈强
论文发表刊物:《医药前沿》2017年6月第18期
论文发表时间:2017/7/21
标签：染色体论文; 技术论文; 产前诊断论文; 核型论文; 缺失论文; 检出论文; 样本论文; 《医药前沿》2017年6月第18期论文;