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【摘 要】目的：探讨PCR检验法用在细菌检验中的临床效果。方法：选我医院在2013年12月到2015年12月所接收到的阴道炎患者200例，依据统计学方法分成数量相同的两组，即观察组和对照组，对照组患者分泌物细菌样本采用常规革兰氏染色法检验，观察组中用PRC检验方法。结果：PCR用在细菌检验中检出率为88%，常规检验的检出率只有62%，对比明显，有统计学的意义（P＜0.05）。结论：在临床中检验细菌时，使用PRC检验方法效果好，操作相对简单，建议推广使用。
【关键词】PCR检验法；细菌检验；临床
阴道炎的发病比较缓慢，一般很难被患者察觉和重视，此病的主要病因是阴道细菌的感染，一般表现症状为白带异常、瘙痒、异味等，若果不及时治疗，有可能危害到患者的腹部，甚至会引发不孕不育。对于阴道炎患者要及早的诊断和治疗。一般比较常用的检验方法为细菌培养法和PCR检验，本文选取200例阴道炎患者来研究两种检验方法的临床效果，具体内容如下。
1 资料和方法
1.1一般资料
选取200例阴道炎患者，所有患者都在育龄期且对本次研究有所了解。随机把患者分为观察组和对照组，每组100位患者。对照组中患者的年龄在20岁到44岁之间，年龄的平均值为是30.5±5.2岁，观察组的患者年龄在21到46岁之间，年龄的平均值为31.1±4.8岁，所选的患者都有白带异常、异味、瘙痒等临床症状。两组患者在年龄、病程、等方面比较没有统计学意义（P＞0.05），存在可比性。
1.2 方法
对照组的检验方法：使用棉签对患者阴道穹窿处的分泌物进行获取，然后保存在生理盐水当中，患者的阴道的分泌物应用细菌培养法，把患者的阴道分泌物从生理盐水中提取出来，放入培养基中，置入二氧化碳恒温箱中进行培养，培养一定时间后，选择细菌群中灰色半透明雨滴状且光滑的菌落，然后送到检验科进行检验。观察组的检验方法为：用相同的方法取患者阴道分泌物保存于生理盐水中，然后再进行PCR检验。PCR检验：对生理盐水和阴道分泌物的混合物进行15分钟离心操作，转速为1200转每分钟，完成后，取上清液对其添加组织裂解液，水浴15分钟，温度到60摄氏度，随后再次离心10分钟，转速不变，取上清液加入PCR试剂对DNA模板进行扩增同时再设一个空白组，即不含DNA模板，其余的条件一样，然后加入蒸馏水、缓冲液、引物、模板等放置在PCR仪器中。
1.3入选标准
全部患者都符合中华妇女学会所说明的阴道炎诊断标准，通过妇科和病理方面检查，阴道炎被确诊。排除妊娠和哺乳期的、三天之内同房过的、来例假的、心肝肾功能严重不全的、15天内做过抗菌治疗的患者。
1.4观察指准
对两组患者细菌培养结果的菌类数量进行对比记录。
1.5评价指标
符合以下条件的记为阳性，（1）边缘比较整齐，有小于等于1毫米的条带（2）条带有符合期望的碱基（3）没有出现引物二聚体和SMEARS.
1.6统计学处理
统计软件SPSS16.0统计分析，计数资料采取率（%）表示，计量资料采取平均值±标准差（x±s）表示，组间率对比采用x2/T检验，P＜0.05，具有统计差异。
2 结果
两组患者经过细菌检验后，观察组中记为阳性的患者有88位，检出率是88%对照组记为阳性的有62位，检出率为62%。明显观察组的检出率比对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。具体数据见表1。
3讨论
细菌检验是临床医学检验中诊断和治疗的重要根据，准确的检验结果可以把病人的疾病状况具体的显示出来。目前医疗环境下，临床上用的最多的细菌检验方法是革兰氏染色检验法，但是此类检验方法容易受到一些其他因素的影响，检验的准确性方面不太理想[1]。PCR是一种可以对体外核酸进行扩增的技术，PCR这种技术可以对DNA的片段进行扩增，在一个容器内可以把目的基因或者一些DNA片段在几小时之内，进行几十万甚至几百万倍的扩增，使得观察和判断更容易[2]。这种技术的优点包括重复性优良、操作简单快速、敏感性好、可以便于自动换控制、高效率等[3]。PCR特异性是重要因素，是选择靶序列所具有的特异性的指标，目前用的最多的靶序列包括MTBC所特有的一些靶序列，分枝杆菌所共同拥有的一些靶序列，人型结核杆菌中具有特异性的靶序列[4]。在引物的设计过程中，必须注意其相关属性，还需要注意不能让引物之间配对太多，防止出现太多引物聚合体的现象，导致非特异性的扩散[5]。PRC检测对一些细菌的检测效果突出，在临床上表现出了很大的价值。PCR在检测中一些细节值得我们去注意，如果操作过程完成的不够严谨，可能就会出现一些假阳性与假阴性的状况，假阳性的出现原因一般有：来自扩增产物和样品间的污染，最多的还是样品与样品之间的交叉污染，在一些样品处理的操作中容易发生相互污染现象[6]。操作人员共用一些器材和仪器的过程中，我们要注意做好清洁工作，如在进行一些活体标本的操作时，使用剪刀把组织剪碎，使用完毕以后，一般在酒精灯上面烧五分钟，这样做可以把剪刀上的DNA比较彻底的清除掉，避免发生污染。在处理一台标本的时候，最好用同一个管子来进行操作，用具最好用一次性的，在解决扩增性污染的问题上，最实用有效的方法是尽可能的缩短操作时间，把操作手续进行简化，使用离心管和接头的时候用一次性的，由于一般情况下扩增产物的量会比较的大，很容易使实验室的很多地方发生污染现象，因此需要把打开反应管的次数，尽可能的降低，来减少假阳性情况发生的可能性[7]。目前PCR已经运用到了很多病的诊断过程当中，如：对一些单基因疾病的诊断、对骨肿瘤疾病的诊断、对一些患者突变基因的检测、对一些遗传病的相关检测、对苯酶酮尿症的相关诊断、对人体COX病毒进行检测、对梅毒、阴道炎等疾病的诊断等[8]。
在此次的研究中，我们通过阴道炎这种病的相关检测来分析PCR检验法用在细菌检验中的临床效果，为此，我们选了我院已经确诊的200例阴道炎患者为研究对象，分成了观察组和对照组，分别实施PRC检验方法和常规检验方法进行验证，结果发现，PRC检验方法检出率比较高，达到了88%，明显比常规检验方法可靠性好。综上所述，PCR检验法用在细菌检验的过程中的临床效果比常规的方法好，极力推荐使用。
参考文献：
[1]华玲.PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果对比[J].中外医学研究，2015，13（17）：50-51.
[2]夏淑华.PCR检验法用于细菌检验的效果评价[J].当代医学，2015，21（27）：90-91.
[3]黄晶.探讨PCR检验法用于细菌检验的临床效果[J].世界最新医学信息文摘，2015，15（48）：110.
[4]王传海.临床细菌检验中PCR检验法的准确性分析[J].中国卫生标准管理，2016，07（06）：150-152.
[5]成树芳.PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果[J].中国处方药，2016，14（02）：107-108.
[6]许海涛.几种不同检验方法用于阴道细菌检验临床对比分析[J].当代医学，2014，20（34）：51-52.
[7]陈立良，林定忠.比较聚合酶链反应检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果[J].实用医技杂志，2015，22（05）：518-519.
[8]史跃杰.99例阴道细菌的检验方法比较分析[J].现代预防医学，2011，38（14）：2815-2817.
论文作者:邹平阳
论文发表刊物:《航空军医》2016年第15期
论文发表时间:2016/9/7
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