（安徽理工大学；232000）
【摘要 】膀胱粘膜损伤一直是泌尿外科领域的难点,目前已有的损伤造模方法较且在改进，不同研究目的决定了不同的造模方法。本综述主要通过生物法、物理法、化学法三种方法对膀胱粘膜损伤造模进行归纳和总结。
【关键词】 膀胱损伤模型； 细菌感染；硫酸鱼精蛋白；
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2018）21-0556-01
生物损伤
Shin K 等人将尿路致病性大肠杆菌菌株UTI89在静态培养中生长16小时，并通过经尿道灌注麻醉的6-10周雌性Gli1LacZ/LacZ小鼠以107菌落形成单位（CFU）浓度接种50ul菌液，夹闭尿道外口维持1小时。在感染后6小时收集尿液，制备切片并用细胞质蛋白和HEMA3染色试剂盒进行染色分析。肾和膀胱从野生型同窝幼鼠对照或感染24小时后的小鼠解剖得到，组织匀浆后用微量滴定板稀释法测定细菌滴度[1]。
Colopy 团队从患有严重尿路感染的患者中分离出UPEC 1677细菌并储存在液氮中。该菌株的毒力特征包括1型和P菌毛，溶血素，aerobactin和O6血清型[2]。细菌在溶原性肉汤培养基中培养过夜。通过尿道灌注麻醉的C57Bl/6J雌性小鼠。将50ul 108 CFU 菌液缓慢灌注到膀胱。其中未进行未尿道灌注的同窝幼鼠作为阴性对照以解决滴注过程中的机械损伤问题。在灌注1小时后，按照1-2mL/100g 体重灌注BrdU，在灌注后1、2、3、5、7和14天处死动物。体内评估标记滞留细胞（LRC）对损伤的反应，进行免疫组化染色以确定细菌接种后LRC在膀胱尿道上皮的位置和增殖反应[3]。
物理损伤
Schäfer 等人使用外科术式将膀胱粘膜切除。将两根聚丙烯缝合线放入暴露的膀胱中以标定损伤位置，并进行正中切口。然后从膀胱表面区域的三分之二处切除尿道上皮和下层粘膜下层，使三角形和输尿管口完好。使用8-0聚乳酸连续缝线实现膀胱闭合。进行伤口和皮肤闭合，并将布比卡因局部注射到直肌和皮下组织中。在术后12小时、3天、1周、3周，对已进行膀胱粘膜切除术的动物实施安乐死。然后将组织标本进行组织学、免疫组化和组织形态学等分析[4]。
化学损伤
将24只Wistar雌性大鼠分为对照组(C)、间质性膀胱炎组(IC)、硫酸软骨素组(CS)和秋水仙碱组(Col)。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆分别用硫酸鱼精蛋白（PS）或脂多糖(LPS)灌注IC\CS\Col组。在灌注后第一天对给药CS和Col，C组给予生理盐水。CS组和Col组分别接受1ml CS(0.2%)和1ml Col (0.05 mg/mL)。治疗药物在膀胱内停留一小时。灌注5天后处死动物，对膀胱组织进行组织学检查，评价白细胞外溢量、肥大细胞浓度以及每个膀胱间质水肿程度[5]。
对于H2O2诱导的膀胱炎，将24g聚丙烯导管置入膀胱，通过导管观察尿液，轻轻推下小腹，直至尿液排出。然后，50ul H2O2溶液溶解于0.5% - 5%生理盐水后导入膀胱。30分钟后将H2O2溶液再次注入膀胱，以确保H2O2与膀胱尿路上皮充分接触。对于环磷酰胺CP诱导的膀胱炎，腹腔给予CP (300 mg/kg)或生理盐水，以上述同样的方式进行操作[6]。
总结 膀胱粘膜损伤或膀胱炎是泌尿外科的一大挑战。膀胱内灌注治疗在过去几年基本无改进，有望通过进一步研究探索产生更有效的治疗方法。
参考文献
[1]Shin K, Lee J, Guo N, et al. Hedgehog/Wnt feedback supports regenerative proliferation of epithelial stem cells in bladder. Nature, 2011,472(7341):110-4.
[2]Hopkins WJ, Gendron-Fitzpatrick A, Balish E, et al. Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains. Infect Immun, 1998,66(6):2798-802.
[3]Colopy SA, Bjorling DE, Mulligan WA, et al. A population of progenitor cells in the basal and intermediate layers of the murine bladder urothelium contributes to urothelial development and regeneration. Dev Dyn, 2014,243(8):988-98.
[4]Schäfer FM, Algarrahi K, Savarino A, et al. Mode of Surgical Injury Influences the Source of Urothelial Progenitors during Bladder Defect Repair. Stem Cell Reports, 2017,9(6):2005-2017.
[5]Sinanoglu O, Dogan EI, Ekici S. Comparison of intravesical application of chondroitin sulphate and colchicine in rat protamine/lipopolysaccharide induced cystitis model. Urol J, 2014,11(1):1296-300.
[6]Homan T, Tsuzuki T, Dogishi K, et al. Novel mouse model of chronic inflammatory and overactive bladder by a single intravesical injection of hydrogen peroxide. J Pharmacol Sci, 2013,121(4):327-37.
论文作者:郑睿
论文发表刊物:《医师在线》2018年11月21期
论文发表时间:2019/3/27
标签：膀胱论文; 损伤论文; 粘膜论文; 尿道论文; 膀胱炎论文; 细菌论文; 生理盐水论文; 《医师在线》2018年11月21期论文;