张裕东[1]2004年在《腺病毒介导的血管内皮生长因子基因靶向性转染心肌细胞的实验研究》文中研究指明目的: 动物实验和临床试验证实了基因治疗在缺血性心脏病中的治疗作用,但基因治疗的现状仍停留于由动物实验向临床应用的过渡阶段,影响临床推广应用的主要原因在于基因治疗在载体的安全性、基因治疗的方法以及基因转染的调控和靶向性等方面还不完善,成为目前基因治疗研究中亟待突破的关键。其中基因治疗的靶向性决定了基因治疗的临床应用价值。 缺血心肌基因治疗的目的是在心肌缺血区产生新生血管,以达到“分子架桥术”的目的。然而促血管生长因子基因在非靶组织、细胞中表达时可能导致一定的毒性和风险。基因治疗的非靶向性一方面使缺血心肌的基因治疗只能通过局部给药的方式进行,以尽可能避免基因的非靶向性表达;另一方面局部给药也明显削弱了基因治疗心肌缺血的疗效,并且在理论上仍存有一定的安全隐患。而到目前为止,尚未有关于促血管生长因子基因靶向性转染心肌细胞研究方面的报道。 为研究促血管生长因子基因对心肌细胞转染的靶向性,本课题构建以 mlc-2v 为启动子、目的基因为 hVEGF165的重组腺病毒(Ad.mlc-hVEGF165),并同步构建以 mlc-2v为启动子、报告基因为 GFP 的重组腺病毒(Ad.mlc-GFP);以 Ad.mlc-GFP 体、内外转染心肌细胞,定性检测在心肌靶向性启动子 mlc-2v 作用下目的基因转染心肌细胞的靶向性;以 Ad.mlc-hVEGF165 体外转染心肌细胞,检测 VEGF 蛋白质的表达及其对血管内皮细胞的生物学效应,研究以 mlc-2v 为启动子的重组腺病毒转染心肌细胞后对目的基因表达的影响,为基因靶向性治疗心肌缺血等心脏疾病提供依据。方法:1.靶向性重组腺病毒载体(Ad.mlc-hVEGF165)的构建 酶切腺病毒穿梭质粒 PDC315 自身启动子 CMV,改造腺病毒穿梭质粒 PDC315 为PDC317,将基因 hVEGF165 和启动子 mlc-2v 酶切鉴定、测序正确后,装入载体 PDC317,置基因 hVEGF165于启动子 mlc-2v 控制之下,将重组质粒 PDC-MLC-VEGF 与 5 型腺病毒右臂的质粒 pBGHloxPΔE1E3 通过 Lipofectamine2000 共转染至 293 细胞,制备重组腺病毒 Ad.mlc-hVEGF165;同步构建腺病毒 Ad.hVEGF165、Ad.mlc-GFP 和 Ad.GFP。2. Ad.mlc-GFP 体外靶向性转染心肌细胞的实验研究 体外原代培养大鼠的心肌细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞及骨骼肌细胞,传代 2
徐晓霞[2]2013年在《AAV9-SERCA2a基因不同方法转染SD大鼠心肌持效性及安全性评价》文中研究指明目的：构建滴度1×10~(12)vg/mL的rAAV9-hSERCA2a-EGFP病毒载体系统，研究不同心脏基因转染方法转染AAV9-SERCA2a基因对SD大鼠心肌的持效性及对机体安全性的影响。方法：根据细菌内同源重组的方法将hSERCA2a基因克隆到腺相关病毒载体中，与其包装质粒pAAV pHelper发生重组，通过脂质体共转染人胚肾293（HEK293）细胞，酶切鉴定和DNA测序鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定。110只雄性SD大鼠随机分为尾静脉注射（Tail vein injection，TVI）组、心肌注射（Intramyocardialinjection，IMI）组、心包腔注射（Intrapericardial injection，IPI）组，叁组采用相应方法在体分别转染滴度1×10~(11)vg/mL AAV9-SERCA2a-EGFP、AAV9-EGFP、NS各200μL，其中，TVI组根据转染病毒滴度不同又分为NS组、低剂量组（1×10~9vg/mL）、高剂量组（1×10~(11)vg/mL），各组分别转染相应滴度AAV9-SERCA2a-EGFP、AAV9-EGFP200μL。转染28d荧光显微镜下观察心肝肾组织绿色荧光表达情况，Western Blot技术检测SERCA2a基因在大鼠各组织的相对表达量，体表12导联心电图检测心律失常发生率，HE染色观察病理学变化，心脏彩色多普勒超声评价心功能，血液生化学指标检测肝肾功能。结果：1）酶切鉴定和DNA测序鉴定证明rAAV9-hSERCA2a-EGFP构建成功，滴度高达1×10~(12)vg/ml。2）叁组左心室可见大量绿色荧光表达，IMI组荧光局限在注射点，叁组肝肾组织均可见微弱荧光；叁组心肌SERCA2a蛋白相对表达量显着高于肝肾（P<0.01），TVI组和IMI组心肌SERCA2a蛋白相对表达量明显高于IPI组（P<0.01）；TVI组和IPI组心电图正常，IMI组2只大鼠发生室性早搏；叁组转染AAV9-EGFP、AAV9-SERCA2a-EGFP与转染NS相比，心功能、组织病理学、血液生化学指标均无显着差异（P>0.05）。3）TVI法高剂量组心肌绿色荧光明显高于低剂量组，高剂量组心肌SERCA2a蛋白相对表达量显着高于低剂量组（P<0.05）；低、高剂量组转染AAV9-EGFP、AAV9-SERCA2a-EGFP与NS对照组相比，心律失常发生率、心功能、组织病理学、血液生化学指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：1）成功构建和包装滴度1×10~(12)vg/mL的rAAV9-hSERCA2a-EGFP。2）叁种方法转染滴度1×10~(11)vg/mL AAV9-SERCA2a基因4周，TVI法的持效性和安全性优于IMI法和IPI法。3）TVI法转染滴度1×10~(11)vg/ml的AAV9-SERCA2a基因200μl的持效性和安全性优于滴度1×10~9vg/ml。
崔广晖[3]2006年在《腺病毒介导TGF-β1转基因联合FTY720对大鼠同种异体心脏移植的影响》文中研究指明第一部分应用Cuff技术建立大鼠同种异体颈部心脏移植动物模型(改良Heron法)目的建立一种操作简单、稳定可靠、经济实用的同种异体异位心脏移植动物模型。方法单人操作。以雄性Wistar大鼠为供体,Sprague-Dawley大鼠为受体。麻醉后迅速摘取供心,备用;受体鼠肝素化,解剖出右侧颈外静脉及其分支,结扎并剪断其分支。用微血管夹钳夹近心端主干,近颅侧结扎,距该线结约1mm缝一6-0 Prolene线作牵引线,剪断血管主干,牵引线引导颈外静脉穿过Cuff管,用两把显微镊将血管壁外翻在Cuff管外,5-0丝线环扎固定。类似方法处理右侧颈总动脉。供心于无名动脉跟部前壁作一小切口,将颈总动脉Cuff管插入其内,环扎固定;同样方法将颈外静脉Cuff管插入肺动脉内并环扎固定。移去微血管夹先开放颈外静脉,再分次开放颈总动脉。结果全部移植成功,无吻合口漏血或回流受阻,2例右心耳出血,1例集束结扎处出血,均予结扎止血,全组无手术死亡,移植物复跳率100%。总手术时间45~60 min,其中吻合时间仅3~8 min。结论该模型是一种实用、理想、易于复制的器官移植研究动物模型。第二部分重组腺病毒介导TGF-β1转基因联合FTY720对大鼠同种异体异位心脏移植物缺血-再灌注损伤的影响目的转化生长因子-β1(TGF-β1)是一种普遍存在、具有抗炎和免疫抑制活性的重要免疫调节因子,实验研究表明经冠脉灌注TGF-β1转基因治疗可以减轻供心缺血-再灌注损伤、明显延长同种心脏移植物的存活时间;FTY720是一种新型强效的抗移植物排斥反应药物,研究表明可显着延长大鼠同种异体心脏移植的存活时间。本实验在成功建立心脏移植模型的基础上,通过冠脉TGF-β1转基因联合应用FTY720,观察对大鼠移
易甫[4]2006年在《纳米粒子介导血管内皮生长因子基因治疗兔心肌缺血的疗效》文中认为实验背景 应用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)基因转染治疗缺血性心脏病，在国内外已研究多年，并取得初步有效的临床试验结果。在相关的大多数临床试验中采用的基因载体是裸质粒或病毒载体，裸质粒介导基因转染效率低，易被体内核酸酶降解，外源基因表达时效短；病毒载体如腺病毒转染效率高，但存在着免疫反应的危险。因此继续寻求安全、有效的基因传递系统是其研究领域的一个重要方面。 近年来，纳米级聚合物粒子开始用于基因的传递，实验已证实纳米粒子包裹寡聚核苷酸后，可增加寡核苷酸进入细胞内的量；同时增加寡核苷酸对抗核酸酶的能力，防止寡核苷酸的降解，增强其在细胞内的稳定性。同时纳米粒子因其良好的组织穿透能力，极易被细胞吸收以及所具有的控释效应，使之在血管疾病的治疗中有着潜在的不可比拟的优越性。
佚名[5]2004年在《作者索引》文中指出Vamla B抗BACP1抗体的制备及鉴定(1):30-33 Wernig A人源性成肌细胞和肌管细胞中β-Tubulin Ⅲ的表达(13):1157-1161 A 阿明长春瑞宾+顺铂治疗非小细胞肺癌48例(8):743 结肠镜诊断大肠癌632例(11):1024 沙培林+顺铂治疗恶性胸腔积液43例(12):1133 艾国平植入贫铀片大鼠血液和肝肾功能的变化(2):182-185 吸入贫铀粉尘和/或嵌入贫铀片大鼠体内铀的分布(6):503- 506
张友荣[6]2002年在《腺病毒介导肝细胞生长因子基因转染急性缺血心肌的实验研究》文中研究表明冠状动脉搭桥术、经皮冠状动脉成形术和药物治疗使许多由于冠脉粥样硬化而引发心肌缺血患者的临床症状和预后明显改善。然而对于严重而弥漫的血管病变、血管手术后的阻塞、手术后的血管病变目前尚无其他的有效治疗措施。运用基因转移方法将具有促血管生成作用的生长因子导入心肌可以有效地促进新生血管的发生和生长，改善心肌的供血，为冠心病的治疗开辟了一条新的途径。 肝细胞生长因子(HGF)是一种特异性的血管内皮生长因子，具有促进多种细胞的有丝分裂、细胞运动、组织发育及促进血管新生等多种生物学作用。复制缺陷型腺病毒载体是有效的载体之一，已用于转染各种组织和细胞，为探讨腺病毒介导的人类HGF基因对缺血心肌血管新生的作用，我们构建了含人类HGF基因的复制缺陷的重组腺病毒载体(Ad-HGF)，体外研究腺病毒载体的转染率和表达效率，在证实了Ad-HGF培养上清对内皮细胞有促增殖作用的基础上，我们通过两种途径将重组腺病毒载体导入大鼠缺血的心肌组织，探讨合适的基因转导途径，以及两种不同途径外源性基因的表达范围和表达持续时间，Ad-HGF是否可以促进血管的生成，以评价在体内应用的效果。在得出阳性结果后，我们采用直接心肌注射的方法将外源性基因导入犬急性缺血的心肌，观察腺病毒载体对犬急性心肌缺血模型在形态、功能和药效学方面的效果，为人体临床实验奠定基础。 本课题的主要方法： 1．复制缺陷型重组腺病毒Ad-HGF的构建 一 采用分子克隆手段获得携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的重组质粒， 和携带人肝细胞生长因子（HGF）的重组质粒pXCHGF，以细胞内同源 重组法构建重组腺病毒Ad－GFP、Ad－HGF。在293细胞内分别扩增应 用氯化艳密度梯度离心法纯化病毒，斑蚀分析法测定病毒感染滴度。 2 AdHGF r＃漱JC。M瓣…ff椭…淑 分离培养胚胎鼠心肌细胞，荧光显微镜观察心肌细胞转染后1、2、3。 5、7、14、21、28天绿色荧光蛋白的表达情况，应用酶联免疫吸附分析 （ELISA）方法和免疫组化方法检测转染后细胞培养上清 HGF的表达。 MTT法测定 Ad－HGF转染后 7、14大的培养上清对内皮细胞系 ECV304 的增殖作用。 3 AdHGF禽舆大厨怠牲心珊舢一…酿 体重250刁 的Wistar大鼠90只，全麻下开胸，结扎左冠状动脉主 干，建立大鼠急性心肌缺血模型。动物随机分为5组：组I：Ad－HGF 心肌内用药组；组H一心室腔注射AdHGF组；组111卜心肌内注射Ad－GFP 组；组IV：心室腔注射Ad－GFP组；组V：空白对照组，即心肌内注射 生理盐水组。动物模型建立成功后，在冠状动脉左前降支供血区域的左 心室变色区作心肌单点注射，注射量为 100 ul，病毒量为 10下fu，每组 分别于3、7、14、ZI天各处死3只，取心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾 脏、脑组织、眼球和睾丸作冰冻切片观察＊P的表达情况：同时取血检 测HGF的表达情况；组织病理学观察心肌的缺血、炎症程度，200倍视 野下进行血管计数。 4 AdHGF庄犬龄血牲心咽臼奉动匆模型中勿应屏 健康杂种犬30只，体重20－25kg，全麻下左第五肋间切口，于左前降 支第一对角支以下结扎冠状动脉。模型建立成功后，动物随机分为5组： I组：AdGFP组（ 8 X 10＊pm／body ），11组：大剂量 AdHGF组（8 X 10＊ 3 一 pm／body），！IIfll：。1－。等剂 Ad－HGF fit（IXI（）’pfu／body），IVfll：。J。）＼IJ IX Ad－HGF全（ZXI＊‘pfu／body），V乏：士l”I对JZ附n（心J＊内注O叫｛Jql 盐水扔）。， 分别／h人心V变色区的边缘、／hi订阶训ti（I卜．队O）讥 8。IJ、1：加＋；，1“Z；‘i 扎冠状动脉前，手术）干 7人、14人、ZI人用128人分别）1h圳泳、人｛心）力 取血，微球法测昆心肌局部血流量：在手术后1、3、7、14、引、二8无 抽血进行血常规、肝功酶和心肌酶的检测以探讨使用安全性的问题；实 验终点每组随机取2只进行冠状动脉造影检查侧枝血管的存在和分布； 心肌TTC染色作病理图像分析，以确定心肌梗死面积。 主要结果： 1．我们使用的细胞内同源重组腺病毒的构建方法稳定、有效，在293 细胞内扩增后的 AdHGF、Ad－（iFP 经氯化艳纯化滴度分别为 8刀 X 1010pm／ml气 11X 1011 pm／mlo 2．AdGFP 体外转染培养的心肌细胞显示，随着病毒感染复数 （multiplicity of infection MOI）的增大，腺病毒对乳鼠心肌细胞的转染 率相应提高，当 MOI大于 50pfu／细胞时，转染率几乎达到 100％，AdGFP 转染体外培养心肌细胞后GFP的表达在第一天即可看到，随着时间的推 移，阳性细胞比例逐渐增加，7天后达到高峰，此后，GFP的表达呈现 下
向媛媛[7]2013年在《rAAV9载体介导Tβ4基因靶向治疗心肌缺血的体外研究》文中指出目的构建含有心肌特异性启动子心脏肌钙蛋白T启动子(cTnT启动子)和胸腺肽β4(Thymosinβ4, Tβ4)基因并引入Myc标签的重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体质粒pAAV-cTnT-Tβ4-Myc, CMV启动子介导的pAAV-CMV-Tβ4-Myc重组质粒,并包装6型和9型重组腺相关病毒,体外感染原代心肌细胞(Primary cardiomyocytes),观察rAAV6病毒介导T(34-Myc基因在原代心肌细胞中的表达。方法1. pAAV-cTnT-Tβ4-Myc、pAAV-CMV-Tβ4-Myc重组质粒构建以pAAV-cTnT-Tβ4为模板,PCR特异性扩增并插入BamHI、NotI双酶切位点和引入Myc标签的Tβ4-Myc片段,再分别BamHI、NotI双酶切Tβ4-Myc片段和现有质粒pAAV-cTnT-Tβ4、pAAV-CMV-GFP,连接构建成重组质粒pAAV-cTnT-Tβ4-Myc和pAAV-CMV-Tβ4-Myc。2.r AAV9-cTnT-Tβ4-Myc、rAAV6-CMV-Tβ4-Myc等重组病毒的包装、检测用pAAV-cTnT-Tβ34-Myc、pAAV-CMV-Tβ4-Myc等载体质粒,含rep基因、cap基因的包装质粒pAAV6或pAAV9,辅助质粒pHelper,通过叁质粒共转染法转染293细胞,即可得到重组6型和9型腺相关病毒载体,纯化后的病毒采用Dot Blot法检测病毒滴度,SDS-PAGE检测病毒纯度。3.rAAV6-CMV-Tp4-Myc病毒表达功能的验证用rAAV6-CMV-Tp4-Myc丙毒感染原代心肌细胞,48h后进行DAB染色、DAPI染色及两者混合染色。4.rAAV6-CMV-Tβ4-Myc病毒表达的检测用rAAV6-CMV-Tβ4-Myc病毒感染原代心肌细胞,提取蛋白后行Western Blot检测Tβ4-Myc基因的表达。结果1.成功构建了pAAV-cTnT-Tβ4-Myc、pAAV-CMV-Tβ4-Myc载体质粒2.成功包装了rAAV9-cTnT-Tβ4-Myc、rAAV6-CMV-Tβ4-Myc、rAAV6-CMV-GFP、rAAV9-CMV-GFP、rAAV6-CMV-GFP-Myc五种病毒。3.rAAV6-CMV-Tβ4-Myc病毒能在原代心肌细胞内表达。4.rAAV6-CMV-Tβp4-Myc病毒感染原代心肌细胞后能介导Tβ4-Myc基因表达。结论成功构建了重组腺相关病毒的载体质粒pAAV-cTnT-Tβ4-Myc、 pAAV-CMV-Tp4-Myc。并包装rAAV9-cTnT-Tβ4-Myc、rAAV6-CMV。 Tβ4-Myc、rAAV6-CMV-GFP、rAAV9-CMV-GFP、rAAV6-CMV-GFP-Myc五种病毒。rAAV6病毒在体外感染原代心肌细胞能介导Tβ4-Myc基因表达,为进一步rAAV9病毒载体体内基因治疗心肌缺血打下了坚实的基础。
周忠江[8]2002年在《超声介导微泡空化靶向传输系统促血管新生作用的初探》文中指出一．前言 1．研究背景 冠心病是世界范围内公认的威胁人类身心健康及引起死亡的第一杀手，冠心病的实质是缺血和缺氧。近二十年来，人们不断努力，取得了许多成就，循证医学指导下的新的更为合理的心血管药物以及以冠状动脉旁路搭桥术(CABG)和血管成形术(PTCA)为代表的血运重建心肌再灌注疗法，使冠心病尤其是急性心肌梗死的治疗和预后取得了长足的进步。然而，仍有诸多重要问题未予解决。例如，对于一些由于自身冠状动脉病变复杂、严重、弥散、终末小分枝病变、以及合并其它不适合介入治疗的全身性疾病如糖尿病、肿瘤等，则不能进行PTCA和CABG冠脉重建；有些病人虽可进行冠脉重建，但重建后血供仍不充分，缺血心肌濒临坏死、凋亡、纤维化；另外PTCA和CABG术后再狭窄问题，使心肌再灌注疗法面临挑战。因此，寻求其它血运重建策略迫在眉睫，人们寄厚望于称为“分子搭桥”的治疗性血管新生(Therapeutic angiogensis)以及心肌干细胞移植。 缺氧心肌微循环的代偿包括微血管扩张、征募储备血管、微血管新生及动、静脉侧支形成，严重冠心病患者即使在合并使用硝酸酯和钙拮抗剂等药物治疗基础上，内源性的促血管生长调节下的微循环代偿已达极限。因此，在药物治疗、血运重建基础上，通过输入外源性的促血管生长因子，促进心肌血管新生(Therapeutic Angiogenesis)、改善心肌缺血即心肌血管分子搭桥，是人们正在努力探索的研究热点。研究证实，Angiogenesis是由多种有丝分裂原相互作用、调控的瀑布式生物反应，一系列血管生长的促进和拮抗因子，如VEGF(血管内皮生因子)、FGF(纤维生长因子)、Angiopoietin(血管生长素)、Ephrins、Thrombospondin-1(凝血栓蛋白)等，通过血管内皮高亲合力受体及信号传导途径参与血管生成。分子生物学在心血管领域的应用及心肌分子搭桥基因治疗的飞速发展，使分子搭桥已进入临床进行初步实践；如开胸心肌注射VEGF_(121)重组腺病毒、经心内膜和心包注射重组VEGF_(165)和VEGF_(121)真核表达质粒、冠脉内注射bFGF、VEGF16。进行血运重建的临床试验等。这些研究虽然取得了一些令人振奋的效果，但有创、高风险的基因传输方式明显限制了分子搭桥疗法的深入开展。 超声在基因和活性药物靶向传输中的应用是正在兴起的研究热点，。其核心是应用超声波及声学造影剂微气泡发展基因和药物定向释放技术，即超声介导微泡空化靶向传输系统。该系统的原理是将声学造影剂微气泡耦连或包载靶向药物或基因，使载药微泡在显影心肌的同时，利用声学造影剂微气泡在超声场内发生的空化效应，将基因和药物运载和释放到特定的组织和器官，使局部组织达到有效的治疗浓度。己有充分研究证实该系统的可行性和应用前景，其全身给药少、局部浓度高、无创、简便、并可在床边进行等优点，赋予当前靶向性差、正处于低迷状态的基因疗法以新的希望。2．目的和意义 本研究拟以上述理论、研究背景为依据，利用分子生物学、细胞生物学及声学造影技术，以蛋白质靶向微泡在组织水平探索超声介导微泡空化靶向传输放射性核素标记的大分子物质BSA的可行性，以蛋白质微泡。脂质体微泡在细胞水平初步探索超声介导微泡空化效应促内皮细胞报告基因转染、表达的可能性；以自制脂质体靶向微泡向大鼠梗塞心肌靶向传输自行构建、克隆的血管内皮生长因子基因VEGF165，并在心肌梗塞动物模型评价VEGF16；分子搭桥血管新生的效果：为超声介导微泡空化靶向传输系统的深入研究以及冠心病分子搭桥基因治疗服务于临床，奠定理论基础和提供实践经验。 第一军医大学南方医院率先研制的第一。二代造影剂填补了国内心肌声学造影的一项空白，如果研制成功能进行心肌靶向传输的第叁代造影剂，则能紧跟国际前沿，进一步丰富超声介导微泡空化靶向传输系统这一涉及多个学科的复杂理论体系。未来超声介导微泡空化靶向传输系统的成功实践，不但会给心肌血管新生的分子搭桥基因治疗提供有效的基因靶向投送手段，而且还有助于攻克目前基因治疗靶向性差的世界难题。同时，靶向微泡的成功研制还将用于诸如肿瘤、外用血栓病的治疗，因此本研究具有重要的经济和社会意义。3．研究内容 一6－ 本课题主要进行以下几个方面的的研究： ＊）在国内应用超声介导微泡空化靶向传输的动物及细胞模型，首次进行 靶向传输研究； 。c）向大鼠心肌传输放射性核素标记的牛血清白蛋白，取得预期心肌靶向 一传输效果； m 向培养的人血管内皮细胞传输LacZ报告基因，证明脂质体靶向微泡 有良好的靶向传输及促基因转染、表达效果； O） 向大鼠梗塞心肌传输自行构建的血管内皮生长因子基因VEGF165；取 得一定的促血管生成效应： 门在血管内皮生长因于基因表达载体的构建过程中，发现一新的血管内 皮生长因子基因的剪接形式
参考文献：
[1]. 腺病毒介导的血管内皮生长因子基因靶向性转染心肌细胞的实验研究[D]. 张裕东. 第二军医大学. 2004
[2]. AAV9-SERCA2a基因不同方法转染SD大鼠心肌持效性及安全性评价[D]. 徐晓霞. 新疆医科大学. 2013
[3]. 腺病毒介导TGF-β1转基因联合FTY720对大鼠同种异体心脏移植的影响[D]. 崔广晖. 福建医科大学. 2006
[4]. 纳米粒子介导血管内皮生长因子基因治疗兔心肌缺血的疗效[D]. 易甫. 第四军医大学. 2006
[5]. 作者索引[J]. 佚名. 第四军医大学学报. 2004
[6]. 腺病毒介导肝细胞生长因子基因转染急性缺血心肌的实验研究[D]. 张友荣. 中国人民解放军军医进修学院. 2002
[7]. rAAV9载体介导Tβ4基因靶向治疗心肌缺血的体外研究[D]. 向媛媛. 湖南师范大学. 2013
[8]. 超声介导微泡空化靶向传输系统促血管新生作用的初探[D]. 周忠江. 第一军医大学. 2002
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