王端 巫志宇 张志成（通讯作者）
（第三军医大学第三附属医院野战外科研究所检验科 重庆 400042）
【摘要】 目的:探讨检测血清透明质酸（HA）、III型前胶原N端肽（P IIIP N-P）、IV型胶原（C IV）、层粘连蛋白（LN）水平在评估肝纤维化程度及预后评估中的临床意义。方法:分别检测正常健康人群（A组 50例）、急性肝炎患者（B组 28例）、慢性病毒性肝炎患者（C组 67例）、肝硬化患者（D组 42例）、肝癌患者（E组 13例）血清HA、P IIIP N-P、C IV、LN水平，比较各组间各指标差异及其变化趋势。结果:B组与A组比较各指标均无统计学差异（P＞0.05），C、D、E组与A组比较，各指标均明显升高（P＜0.05），且C组＜D组＜E组。结论:血清HA、PC-III、C IV、LN水平可客观反映肝纤维化程度，动态观察其变化可用于评估慢性肝病治疗效果。
【关键词】 透明质酸;III型前胶原N端肽; IV型胶原; 层黏连蛋白; 肝纤维化
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）23-0098-02
Clinical significances of HA, P IIIP N-P, C IV and LN in the estimation of severity and prognosis of liver fibrosis
Wang Duan, Wu Zhiyu, Zhang Zhicheng. Department of Clinical Laboratory, the Third Affiliated Hospital, Research Institute of Surgery of Third Military Medical University, Chongqing, 400042, China
【Abstract】Objective To detection the level of hyaluronic acid(HA), type III procollagen amino peptide(P IIIP N-P), collagen IV(C IV), laminin(LN) in serum, and to estimate severity and prognosis of liver fibrosis. Methods 50 health controls(Group A), 28 patients with acute hepatitis(Group B), 67 patients with chronic viral hepatitis(Group C), 42 patients with hepatic cirrhosis(Group D), 13 patients with liver cancer(Group E) were detected the level of HA, P IIIP N-P, C IV and LN in serum respectively, and to compare the variation between each groups. Results The level of HA, P IIIP N-P, C IV and LN between group A and group B have no statistic significance(P＞0.05). However, the level of above indexes in group C, D and E were increased significantly than those in group A(P＜0.05). Simultaneously, the levels were increased progressively from group C to group E. Conclusions The level of HA, P IIIP N-P, C IV and LN may reflect the severity of liver fibrosis objectively. Moreover, monitor the levels may be helpful to the evaluation of treatment effect of patients with chronic liver disease.
【Key words】Hyaluronic acid;Type III procollagen amino peptide;Collagen IV; Laminin; Liver fibrosis
肝纤维化是指由各种致病因子所致肝内结缔组织异常增生，导致肝内弥漫性细胞外基质过度沉淀的病理过程。许多慢性肝脏疾病均可引起肝纤维化，进而发展为肝硬化甚至肝癌[1]。若能早期发现并诊断，一旦炎症坏死消失，过多的细胞外基质被降解，肝纤维化甚至肝硬化有逆转可能[2]。
肝纤维化及肝硬化的诊断以肝穿刺组织病理学检查为金标准，但因其为有创检查，不宜作为常规检查及随访指标[3]。因此简便易行的血清学指标在肝纤维化的诊断及其程度评估中具有较高的临床应用价值[4]。本文分别检测50例健康人群及150例各类肝病患者血清HA、P IIIP N-P、C IV、LN水平，并比较其差异及其变化趋势，探讨其对评估肝纤维化程度及慢性肝病预后的价值，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象
2012年1月至2014年12月就诊于第三军医大学第三附属医院野战外科研究所的临床确诊的各类肝病患者150例为实验组，其中急性肝炎患者28例（B组）、慢性病毒性肝炎患者67例（C组）、肝硬化患者42例（D组）、肝癌患者13例（E组），男86例、女64例，年龄23～70岁，平均年龄47.8±10.6岁。同期于我院体检中心体检的健康人群50例为正常对照组（A组），男28例、女22例，年龄33～62岁，平均年龄44.3±12.1岁，无明确肝病史，此次体检肝功能正常。
1.2 研究仪器及试剂
离心机（购自北京北洋医疗器械有限公司），化学发光分析仪（购自深圳新产业生物工程股份有限公司），HA、P IIIP N-P、IV-C、LN试剂盒（购自深圳新产业生物工程股份有限公司）。
1.3 研究方法
各组均于实验当日抽取空腹静脉血4 ml，3000rpm离心5min后获取血清，采用化学发光法，参照试剂盒说明书分别检测HA、P IIIP N-P、C IV、LN等指标，同时用试剂盒提供的质控物进行质量控制，其结果均在质控范围内，血标本无溶血、脂血。
1.4 正常参考值
HA 0.1～100 ng/ml，P IIIP N-P 0～30 ng/ml，C IV 0.02～30 ng/ml，LN 0.5～50 ng/ml。
1.5 统计学处理
采用SPSS 13.0统计学软件分析，计量资料用x-±s表示，各组间均数比较采用单因素方差分析(ANOVA)，P＜0.05认为差异具有统计学意义，实验组与对照组性别构成比差异比较采用卡方（χ2）检验，P＜0.05认为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 实验组平均年龄47.8±10.6岁，对照组平均年龄44.3±12.1岁，两组无统计学差异（P＞0.05）（图1）。
2.2 实验组男86例、女64例，对照组男28例、女22例，两组性别构成比无统计学差异（P＞0.05）（表1）。
表1 实验组与对照组性别构成比（χ2=0.027）
3.讨论
肝纤维化是以细胞外基质（extracellular matrixc，ECM）异常过度沉积为基础的病理改变，是各种急慢性肝损伤进展为肝炎、肝硬化甚至肝癌的病理基础。各种肝损伤导致肝星细胞（hepatic stellate cell，HSC）激活，转化为肌成纤维细胞，成为基质蛋白的主要来源[5]。因而研究ECM及其代谢产物HA、P IIIP N-P、IV-C、LN在急慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者血清中的水平，并分析其变化趋势，在肝纤维化的诊断及程度评估中有重要价值。
透明质酸（HA）是肝细胞外间质中的蛋白质多糖，主要由肝间质成纤维细胞合成并分泌，其大部分由内皮细胞摄取和降解。当肝实质细胞受到损害时，肝内间质细胞增生，肝血流受阻使肝窦内皮细胞摄取和分解HA减少，进而导致HA水平明显升高[6]。大量研究表明，HA水平与肝纤维化程度呈正相关，而与肝脏炎症无明显关系[7]，是反映肝纤维化最具价值的血清学指标[8]，可取代肝组织活检。P IIIP N-P是III型胶原的前体，主要在活化的HSC内合成并释放，在肝纤维化早期即可升高，晚期合成减慢，是作为活动性肝纤维化的指标[9-10]，同时其水平降低亦可预示肝纤维化程度的减轻[11]。CIV是基底膜构成的主要成分，肝纤维化发生时最先有所升高，且随病情进展而逐渐升高，因此也可在一定程度上反映肝纤维化程度[12]。LN于肝纤维化发生时大量沉积于肝窦内皮细胞间隙，降低内皮细胞的通透性，使其毛细血管化，并导致门脉高压，故可反映肝窦毛细血管化及汇管区纤维化[5，13]。
本研究显示，急性肝炎组与正常对照组比较，血清HA、P IIIP N-P、IV-C、LN等指标均无统计学差异，说明急性肝炎患者尚未发生肝纤维化，若能积极治疗，防止其慢性变，则预后良好。慢性病毒性肝炎、肝硬化及肝癌患者血清HA、P IIIP N-P、IV-C、LN水平较正常对照组均明显升高（P＜0.05），且各指标均随肝纤维化程度加重而升高，这与国内外报道基本一致，因此可作为判断各种肝病患者肝纤维化程度的指标。若其水平随ALT、AST、血清胆红素等反映肝细胞炎症病变的指标下降，则预后良好；反之，若其持续升高，则说明肝纤维化增生活跃，向慢性化进展。
对于轻、中、重度慢性肝炎患者血清HA、P IIIP N-P、IV-C、LN水平与其病情严重程度及预后的关系有待进一步研究，动态观察其变化可用于评估慢性病毒性肝炎治疗效果，并协助临床医生评估何时进行抗肝纤维化治疗，以延缓病情发展，提高患者生活质量。
综上所述，血清HA、P IIIP N-P、IV-C、LN在急性肝炎患者中基本正常，而在慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者中均显著升高，故联合检测此血清学肝纤维化指标可客观反映肝纤维化程度，动态观察其变化可用于评估慢性肝病治疗效果。
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论文作者:王端,巫志宇,张志成（通讯作者）
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第23期供稿
论文发表时间:2015/10/14
标签：肝纤维化论文; 血清论文; 患者论文; 指标论文; 肝硬化论文; 肝炎论文; 细胞论文; 《医药前沿》2015年第23期供稿论文;