氧化剂对血痕的金标快速检测法影响的研究
陈天渝，朱 斌
(浙江警察学院，浙江 杭州 310053)
摘 要： 金标快速检测法是一种能够对血痕中血液是否为人血进行快速种属认定的检测方法，但血痕中氧化剂的存在会使人血中的血红蛋白(Hb)氧化成高铁血红蛋白(MetHb)，失去载氧活性，从而导致胶体金检测试纸条(FOB)种属检测不能检测出人血的存在。本文探究氧化剂的反应机理和血红蛋白被氧化的机理，并通过实验，获得导致胶体金检测试纸条失效的氧化剂最低剂量。
关键词： 氧化剂；血痕金标试纸；作用机制
血痕是血液在体外干燥后形成的斑记。根据罗卡尔物质交换定律，犯罪的过程实际上是一个物质交换的过程，作案人作为一个物质实体在实施犯罪行为的过程中总是跟各种各样的物质实体发生接触、碰撞、摩擦从而产生物质交换关系[1]，而血痕就是现场勘查中最常见的证据之一。血痕是凶杀、伤害等案件中最常见和最重要的物证，血痕预试验和血痕种属鉴定对于确定犯罪嫌疑人、分析案件性质、重建作案过程等都有着非常重要的意义及证据价值。检验血痕目的主要有：(1)检验是否为血;(2)血痕种属鉴定;(3)血痕的个人认定;(4)寻找与案情有关的线索。而血痕的金标快速检测试剂条就能够达到血痕检验的第二个目的。
免疫层析技术是近年兴起的一种快速诊断技术，该技术将胶体金作为示踪物应用于抗原抗体反应，最常用的是免疫胶体金层析试纸条[2]。金标抗人血红蛋白(FOB)试剂条是通过把胶体金的显色作用和免疫层析原理相结合而研制的血液检测工具，灵敏度较高[3]，法医领域常用于血液种属检验。血痕(血斑)金标快速检测试剂条就是以此方法为工作原理设计一类试纸。基于当前“把实验室搬到现场”的公安现场勘查思路大改革的背景下，类似人血痕金标快速检测法这类简便快捷的检测方法必定有更大的发展前景。但在实际工作中发现当待测血液中存在氧化剂时，氧化剂使人血中的血红蛋白(Hb)氧化成高铁血红蛋白(MetHb)，失去载氧活性[4]，会导致该检测法失效，这就极易导致公安现场勘查工作发生重大失误。
本文首先根据胶体金技术的作用原理、氧化剂的化学特性、胶体金和对人血红蛋白的作用机制、人血痕金标快速检测试剂条检测人血血红蛋白的工作原理，研究导致血痕金标快速检测试剂条检测结果失效所需氧化剂的剂量，初步探索氧化剂使血痕金标快速检测试剂条失效的机理。
改革开放40年来,我国可持续城市建设已经取得了与社会经济发展水平相当的建设成果,也积累了丰富的建设经验。但在发展过程中尚存在缺乏主管机构和保障实施的政策法体系等问题。
1 实 验
1.1 材料与仪器
血痕(血斑)金标快速检测试剂条；新鲜人血液；高锰酸钾(AR)，去离子水。
由此可得，每克高锰酸钾可以把15 mg血红蛋白(折合成新鲜血液约为0.1 mL)氧化成高铁血红蛋白(MetHb)，从而导致胶体金检测试剂条失效。
(5)矿井直接充水水源。为龙潭组的裂隙水和茅口组碳酸盐岩溶洞水,龙潭组富水性弱，茅口组富水性强，具承压性，25号煤层与茅口组揭露最短距离为55.60 m，岩性为泥岩泥质粉砂岩，起了一定的隔水作用，正常情况下对矿井充水影响不大。但区内断层切割使茅口组强含水层与含煤地层连通,因此对于断层一带的开采有直接影响。在开采深部煤层时尤其要注意。
1.2 实验方法
(3)将从铝箔袋中取出的血痕(血斑)金标快速检测试剂条，插入混合溶液中(液面不超过试纸条上的标志线Max线)，5 min 内观察结果。
(2)进行对照实验。利用精密移液器量移取5 μL的0.1%血溶液，加入不同体积的高锰酸钾溶液，并将两种液体进行混合。
船舶设备安装中涉及的安装组件较多，因此涉及了减振措施应用也较多。其中在发电机，电气控制箱，空压机设备的安装中，均应用到了减振措施。具体在设备安装中可通过结合金属减振器以及橡胶减振器，进行各设备组件的安装。具体分析如发电机组设备在安装中，主要通过在底座增加减震垫，以及安装橡胶减振器的方式进行安装应用。空压机在安装中则主要通过安装橡胶软垫，以及膨胀接头的方式进行减振应用，确保设备在运行应用中的稳定性。电气控制箱在安装中由于涉及电力装置，以及较多的电力控制元件，其在安装应用中考虑安全性和稳定性，主要结合固定装置以及橡胶减振器进行安装应用，确保船舶运行应用中电气控制质量的安全稳定性。
(1)配制0.1%(体积比浓度)的血溶液和为10 μg/mL的高锰酸钾溶液。
(4)根据检测结果，调整高锰酸钾溶液的剂量，反复试验，记录实验数据。
2 结果与讨论
2.1 实验结果
根据医院血液化验结果，我们所取的血样血红蛋白为150 g/L，因此，5 μL 0.1%血溶液中约含血红蛋白7.5×10-4g。
精密移液器；电子天平。
表 1高锰酸钾对金标快速检测法影响
Table 1 The effects of potassium permanganateon colloidal gold-labeled rapid detection
2.2 实验结果讨论
资料显示，人血中血红蛋白浓度的参考值是：男性：120～160 g/L，最高不超过175 g/L。女性：110～150 g/L，最高不超过165 g/L。新生儿：170～200 g/L。不超过或低于以上范围，都属于正常范围。儿童的血红蛋白量随着年龄的增加逐渐降低而接近于成年人。
根据实验结果，我们计算可得使每毫升的血液失效(检测结果为阴性，即检测试纸无法检测出人血的存在)所需的高锰酸钾最少量为10 g。
高锰酸钾对血痕(血斑)金标快速检测试剂条检测结果，实验数据如表1所示。
5000 μL的10 μg/mL高锰酸钾溶液中含高锰酸钾5×10-5g。
1.尊重并维护个体的需求、确保谋利行为的合法与正当以平衡个体心态。第一，不去主动满足个体的具体需求，但竭力尊重并维护个体追求满足的权利。党的十六届三中全会《决定》强调，政府职能要从“全能型”转向“服务型”，过去那种从出生到老死都由政府大包大揽的年代已经一去不复返，但这种国民心态仍然没有消失无踪。一些碰到困难问题的人总也摆脱不掉政府有责任、向政府伸手的念头，比如要救济、要财物、要保障房等等。而一些不困难的人甚至如公务员等也存在要工资、要名利、要享受等心理。这是计划经济时代的产物，无法在短时期彻底消弭无形。
2.3 氧化剂(高锰酸钾)作用机理讨论
胶体金又被称作金溶胶，是在还原剂如柠檬酸三钠的作用下将金盐还原成金后形成的大小均匀的金颗粒悬液，且通过静电作用形成稳定的胶体状态[5]。由于胶体金颗粒本身呈红色，所以当免疫胶体金颗粒遇到对应的抗原(或抗体)时，免疫胶体金颗粒便被滞留而富集，如设计适宜的反应及检测条件，可在某一区域(如存在浓度适宜的对应抗原或抗体的地方)出现肉眼可见的红色，据此便可做出阳性或阴性的判断[6]。目前国内外的免疫胶体金诊断试剂条就是依此原理设计而成。检测试剂条工作原理是：应用胶体金免疫检测技术，用免疫方法检测样品中的人血红蛋白。检测试剂条测试区包被有抗人红血蛋白特异性抗体，控制区包被有羊抗鼠IgG。在试剂条的加样端固定有抗人血红蛋白标记的胶体金颗粒，当样品稀释液进入加样端与抗人血红蛋白标记的胶体金颗粒混合，在毛细原理作用下样品和金标混合物向检测方向层析。当样品中存在人血红蛋白时，人血红蛋白与胶体金颗粒上的特异性抗体结合，当层析至测试区时结合物与检测区的抗体形成抗体-抗原-抗体-胶体金复合物，并产生颜色，结果为阳性。如果样品中没有人血红蛋白时，检测区不出现色带，结果为阴性。控制线用来指示试剂条系统工作是否正常，出现红色色带表示试剂条工作系统正常，反之表示系统存在问题。
血红蛋白是有4个亚基和4个卟啉环的复杂蛋白质，在脱离红细胞后容易解聚成为αβ二聚体，同时卟啉环中的二价铁容易氧化成三价铁，氧化剂使人血中的血红蛋白(Hb)氧化成高铁血红蛋白(MetHb)，失去载氧活性，最终导致其失去人血红蛋白原本的特异性。
综上所述，笔者推测，使血红蛋白变为无载氧活性的高铁血红蛋白(MetHb)，并同时失去与抗人红血蛋白特异性抗体结合的特异性，导致其不能在检测区形成抗体-抗原-抗体-胶体金复合物，最终使得胶体金检测试剂条不能检测到待测溶液中人血成分的存在。
3 结 论
当待测血痕(血斑)中含有氧化剂，且氧化剂含量达到一定剂量时，会导致血痕(血斑)金标快速检测试剂条失效，不能检测出人血的存在。
以高锰酸钾为例，每克高锰酸钾可以把15 mg血红蛋白(折合成新鲜血液约为0.1 mL)氧化成高铁血红蛋白(MetHb)，从而导致胶体金检测试剂条失效。
对比两组患儿治疗的临床疗效，评判标准[2] ：显效，患儿经过相关治疗后，临床症状呼吸困难、咳嗽、喉鸣等显著改善；有效，患儿经过相关治疗后，临床症状呼吸困难、咳嗽、喉鸣等有一定改善，但未完全改善；无效，患儿经过相关治疗后，临床症状呼吸困难、咳嗽、喉鸣等没有任何好转迹象，甚至加重；总有效率=显效率+有效率。
其使试剂条失效的作用机理是氧化剂使人血中的血红蛋白(Hb)被氧化成高铁血红蛋白(MetHb)，失去载氧活性，同时失去与抗人红血蛋白特异性抗体结合的特异性。最终导致该试剂条检测失效。
操作型学习疑难是在信息的辨识中产生的疑难．操作型学习疑难主要表现在问题解决的指向与思维引导的差异，即短期记忆中产生的思维形成的“存于记忆的数学模式[31]”对当前解决的问题没有产生真实对接或产生错乱对应的模糊情况，使得出现思维与操作的迟缓状态.外显行为就是“迟疑”、“欲言欲止”、“呆滞”等，出现“懂而不会”的现象，内心似乎想明白了，但问题解决中又发现相抵触的状况．操作型学习疑难既与之前的信息处理过程有关，又与学习者的经验、能力等因素有关，有时学习者产生的疑难并不是智力水平原因，而是受到经验的束缚[32]，甚至与习惯、毅力、情绪等因素有关．
参考文献
[1] 李栋,李波阳.物质交换原理在犯罪现场勘查中的运用[J].湖北警官学院学报,2010(4):72-75.
[2] 张来宾,张珊珊,杨文,等.胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用[J].吉林农业,2018(8):88.
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Study on Effect of Oxidant on the Blood Stains in Colloidal Gold-labeled Rapid Detection
CHEN Tian -yu ,ZHU Bin
(Zhejiang Police College,Zhejiang Hangzhou 310053,China)
Abstract :Colloidal gold-labeled rapid detection is a detect method that fast decides whether the blood stain belongs to human species.However,oxidants oxidize hemoglobin (Hb)in human blood into high iron-blooded red protein (MetHb)and reduce its oxygen-carrying activity,which leads to the failure of colloidal gold test strip (FOB)species detection to detect the presence of human blood.The reaction mechanism of oxidants and the oxidation mechanism of hemoglobin were studied.Through experiments,the lowest dose of oxidants that failed the colloidal gold test was got.
Key words :oxidant;strip of gold-labeledanti-human-hemoglobin SGI-antiHb;reaction mechanism
中图分类号: N34
文献标志码: A
文章编号: 1001-9677(2019)17-0130-02
第一作者： 陈天渝(1997-)，男，2016级刑事科学技术专业学生。