青海大学附属医院 810000
基金项目编号：ASRF-2014-23
【摘要】目的:观察青海地区慢性乙型病毒肝炎患者淋巴细胞亚群的变化情况。方法：选取2014年3月-2016年1月医院诊治的青海地区慢性乙型病毒感染患者41例，设为观察组，选取同期入院的健康体检者39例，设为对照组。采用流式细胞仪测定2组血清中淋巴细胞亚群水平，利用实时荧光定量检测HBV DNA水平。结果：观察组淋巴细胞亚群CD3+、CD4+ 、CD4+/CD8+水平，显著低于对照组（P<0.05）；观察组CD8+水平，显著高于对照组（P<0.05）；慢性乙型肝炎与CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+无相关性（P>0.05）；HBV携带者与CD4+、CD8+及CD4+/CD8+无相关性（P>0.05），与CD3+呈正相关（P<0.05）。结论：青海地区慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群均存在不同程度的免疫调节异常和免疫功能障碍。
【关键词】青海地区；慢性乙型病毒肝炎；淋巴细胞亚群；变化情况
【中图分类号】R194【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)09-0425-02
Changes in patients with chronic hepatitis B virus in Qinghai lymphocyte subsets
Abstract Objective: To observe the changes in patients with chronic hepatitis B virus in Qinghai lymphocyte subsets. METHODS: March 2014 - January 2016 in Qinghai hospital for treatment of chronic hepatitis B virus infection in 41 patients, observation group, select the same period of healthy admitted 39 patients to the control group. 2 was measured by flow cytometry in serum levels of lymphocyte subsets, using real-time fluorescence quantitative detection of HBV DNA levels. Results: The lymphocyte subsets CD3 +, CD4 +, CD4 + / CD8 + levels significantly lower than the control group (P <0.05); the observation group CD8 + levels were significantly higher (P <0.05); chronic hepatitis B and CD3 + , CD4 +, CD8 + and CD4 + / CD8 + no correlation (P> 0.05); HBV carriers with CD4 +, CD8 + and CD4 + / CD8 + no correlation (P> 0.05), and CD3 + positive correlation (P <0.05). Conclusion: Patients with chronic hepatitis B in Qinghai T lymphocyte subsets are varying degrees of abnormal immune regulation and immune dysfunction.
Key words Qinghai region; chronic viral hepatitis; lymphocyte subsets; changes
免疫病理反应在慢性乙型肝炎的发病中发挥了重要的作用。当机体感染HBV病毒后并不会直接对肝脏细胞产生损伤，更多的是诱导机体免疫反应间接的引起肝脏细胞的损伤。同时，机体能利用淋巴细胞亚群的变化而导致机体免疫发生明显的变化，从而能清除病毒[1]。对于正常人来说，T淋巴细胞亚群均能发挥自身的作用，通过测定外周血T细胞亚群更能反映乙型肝炎患者免疫状态。为了探讨青海地区慢性乙型病毒肝炎患者淋巴细胞亚群的变化情况。选取2014年3月-2016年1月医院诊治的青海地区慢性乙型病毒感染患者41例，报道如下。
1.资料与方法
1.1临床资料
选取2014年3月-2016年1月医院诊治的青海地区慢性乙型病毒感染患者41例，设为观察组，男23例，女18例，年龄（25-62）岁，平均（43.2±2.5）岁。其中，16例慢性乙型肝炎，25例HBV携带者。入选患者均未接受治疗，患者均符合2010年中华医学会肝病学会和中华医学会感染学会联合制定的慢性乙型肝炎诊治指南中相关标准。选取同期入院的健康体检者39例，设为对照组，男18例，女21例，年龄（23-58）岁，平均（39.4±2.1）岁。本次临床诊断试验均经患者、家属同意，试验通过医院伦理会批准，患者一般资料差异无统计学意义。
1.2 方法
采用流式细胞仪测定2组血清中淋巴细胞亚群水平，利用实时荧光定量检测HBV DNA水平。（1）淋巴细胞亚群水平测定。2组入院后空腹抽取2ml静脉血，抗凝后在样品测定管中加入50uL抗凝血，加入20ul单抗，振荡混合均匀后，避光孵育20min，加入2ml溶血素，振荡后混匀，避免放置15min，5min离心，速度为1500rpm，去除上层清夜，加入2mlPBS，5min离心，速度为1500rpm。最后，加入500ulLPBS，采用流式细胞仪测定CD3+、CD4+ 和CD8+ 细胞百分比，数据采用BD FACSuite软件系统对数据进行获取和分析。（2）HBV DNA水平2组入院后空腹抽取2ml静脉血，放入无菌离心管中，室温下进行2h保存，5min离心，速度为1600rpm，抽取200ul离心管转入另一个1.5ml的无菌离心管中，最后抽取5ul血清，完成DNA的提取，采用ABI-7300荧光定量PCR仪进行扩增，相关操作步骤必须严格遵循试剂和仪器操作说明进行[2]。
1.3 统计分析
采用SPSS18.0软件处理，计数资料行检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（）表示，P<0.05差异有统计学意义。
2结果
2.1 2组外周血淋巴细胞亚群检测结果比较
观察组淋巴细胞亚群CD3+、CD4+ 、CD4+/CD8+水平，显著低于对照组（P<0.05）；观察组CD8+水平，显著高于对照组（P<0.05），见表1.。
3.讨论
特异性T淋巴细胞在慢性HBV感染的发病机制和病毒清除过程中发挥了重要的作用。根据其表面标志物不同，将不同亚群组成的T淋巴细胞分为CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+等若干亚群。机体发挥正常免疫功能的重要基础是T淋巴细胞各个亚群相对稳定，并且T淋巴细胞的数量和比例能反应机体免疫水平，通过相互制约、相互作用，共同参与机体的免疫应答。一旦不同的T淋巴细胞亚群数量和功能发生变化时，将会引起免疫功能紊乱，并伴随着一系列病理变化。当青海地区慢性乙型病毒型肝炎后，将会引起CD3阳性细胞减少，容易引起机体免疫数量不足，尤其是细胞免疫功能低下，使得HBV不能被有效的清除。而CD4+/CD8+比值则能监测人体细胞免疫功能，可以反应机体免疫状态，该比例失衡将会引起免疫系统紊乱和一系列免疫病理变化[3]。
综上所述，青海地区慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群均存在不同程度的免疫调节异常和免疫功能障碍，参与了乙型肝炎的发生、发病。
【参考文献】
[1]De Niet A， De Bruijne J， Plat-Sinnige M， et al. Upregulation of CXCR3 expression on CD8（+） T cells due to the pervasive influence of chronic hepatitis B and C virus infection［J］. Hum Immunol，2013， 74（8）： 899-906.
[2]王辉，高建鹏，游晶．慢性乙型肝炎病毒感染者外周血Ｔ细胞亚群变化与其血清HBV DNA的水平分析［Ｊ］．临床医药实践，2012，21（6）：418-422.
[3]张健珍，曾春燕，张春兰，等. 不同临床类型HBV 感染者外周血T 淋巴细胞亚群的变化. 实用肝脏病杂志，2012，15 （6）：508-510.
论文作者:绽永华,王学红,马臻奇
论文发表刊物:《中国医院药学杂志》2016年9月
论文发表时间:2016/11/4
标签：淋巴细胞论文; 青海论文; 免疫论文; 乙型肝炎论文; 患者论文; 机体论文; 水平论文; 《中国医院药学杂志》2016年9月论文;