化学发光免疫分析测定甲功五项的基质效应评价论文_奂秀芳

(剑阁县中医院检验科 广元 四川 628300)

【摘要】目的:评价化学发光免疫分析测定甲状腺功能五项指标的基质效应。方法:选取甲状腺功能五项高值血清,用正常人血清、甲减人血清、甲亢人血清、小牛血清、马血清、水解明胶、BSA、PBS、生理盐水9种基质分别对 T3、T4、FT3、FT4、TSH 的高值血清进行对倍稀释,测定其稀释后甲功五项结果,评价其基质效应。结果:T3 项目中小牛血清有明显的负基质效应;水解明胶、BSA有明显的正基质效应;正常人血清、甲减人血清、马血清无基质效应。T4和FT3项目中小牛血清、PBS、生理盐水有明显的负基质效应;水解明胶、BSA有明显的正基质效应;正常人血清、甲减人血清无基质效应。FT4项目中小牛血清、马血清、PBS、生理盐水有一些负基质效应;水解明胶、BSA有一些正基质效应;正常人血清、甲减人血清无基质效应。TSH 项目均无明显基质效应影响。结论:临床测定甲功五项时,如需稀释病人血清标本,可利用新鲜正常混合血清作为稀释液,可以得到较为准确的结果。

【关键词】化学发光免疫分析;甲功五项;基质效应

【中图分类号】R581 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2017)17-0229-02

美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件定义,“基质效应”(matrix effect)是指标本中除分析物以外的其他成分对分析物测定值的影响,以及基质对分析方法测定分析物的准确度的干扰[1]。作者发现,化学发光免疫分析法(CLIA)测定甲状腺功能五项时也出现一定的基质效应。为此,本文通过实验设计和数据分析,评价不同基质对CLIA测定甲功五项的影响,以求寻找符合临床检验准确度要求的去除基质效应的方法。

1.材料和方法

1.1 基质选取

选取9种基质:正常人血清、甲亢人血清、甲减人血清、小牛血清、马血清、水解明胶、BSA、PBS、生理盐水。配置好后,将9种基质液56℃30分钟灭活。

1.2 样本制备

找一新鲜血清标本,T3、T4测定值分别高于正常参考范围2倍,FT3、FT4测定值分别高于正常参考范围2倍,用上述8种基质液(除去甲亢人血清)将其分别进行2倍、4倍、8倍稀释,平衡一小时后,进行同时测定。

1.3 统计方法

采用微软Excel2007软件进行统计分析。按照国家卫生行业标准WS/T356-2011进行基质效应评价。

2.结果

结果显示,T3项目中小牛血清有明显的负基质效应;水解明胶、BSA有明显的正基质效应;正常人血清、甲减人血清、马血清无基质效应。T4和FT3项目中小牛血清、PBS、生理盐水有明显的负基质效应;水解明胶、BSA有明显的正基质效应;正常人血清、甲减人血清无基质效应。FT4项目中小牛血清、马血清、PBS、生理盐水有一些负基质效应;水解明胶、BSA有一些正基质效应;正常人血清、甲减人血清无基质效应。TSH 项目均无明显基质效应影响。见表1。

3.讨论

实际工作中,基质效应往往对化学发光免疫分析测定结果有很大的影响。本次研究数据表明,小牛血清、马血清、PBS、生理盐水对T3、T4、FT3、FT4测定具有负基质效应,水解明胶基质、BSA 基质有明显的正基质效应,该结果与郭立民等结果相似[2]。分析原因可能与T3、T4、FT3、FT4的测定原理有关。这4项均采用竞争法,血清中的T3、T4、FT3、FT4将与酶标记的已知抗原竞争包被的抗体。用9种基质对样本进行稀释时,由于小牛血清、马血清、PBS、生理盐水与T3、T4、FT3、FT4这4种小分子物质的抗原决定簇明显不同,标本被稀释后竞争性减小,故表现为负基质效应。水解明胶和BSA基质可分子基团能与T3、T4、FT3、FT4较相似,加入标本后与包被抗体结合,故表现为正基质效应。本次结果中TSH不受基质效应的影响,主要原因是TSH测定原理为双抗体夹心法,牛血清、马血清等动物血清的 TSH 结构与人类不同,所以两株单克隆抗体夹心结构可以最大限度降低交叉干扰,使得基质效应不明显[3-4],而PBS、BSA、生理盐水等,在洗涤过程中直接被清洗掉,对测定结果干扰较小。本次实验结果最终明确,人血清作为基质液对稀释后测定结果的影响最小。故建议在临床测定甲功五项时,如需稀释病人血清,可利用新鲜正常混合血清作为稀释液,可得到较为准确的结果。

【参考文献】

[1]王泰瑞,黄成垠,陈妍,周静宇。基质效应对血浆游离血红蛋白测定的影响[J].临床输血与检验,2011,13(14):328-329.

[2]邸满喜.MAIA法测定甲亢患者甲功五项结果分析[J].基层医学论坛,2008,12(35):1118-1118.

[3]郭立民。化学发光免疫分析甲功五项的基质效应及临床意义[J].世界最新医学信息文摘,2015,15(1):130-135.

[4]赵敏,笪宏华,杨贤芳,徐天祥,吴在荣.甲功五项化学发光免疫分析的基质效应对临床测值的影响[J].现代生物医学进展,2012,12(19):3714-3718.

论文作者:奂秀芳

论文发表刊物:《医药前沿》2017年6月第17期

论文发表时间:2017/6/26

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