（黑龙江省黑河市爱辉区农村疾病预防控制中心 黑龙江黑河 164300）
【摘要】目的：探讨抗酸染色联合金胺O荧光染色在结核病中的诊断价值。方法：选取286例确诊治疗的结核病患者，收集其痰液制作标本，采用痰涂片抗酸染色法和金胺O荧光染色法检测所有标本中结核杆菌的阳性检出情况，统计分析两种诊断方法对结核病的诊断价值。结果：金胺O荧光染色联合抗酸染色法检测结核杆菌的敏感度为69.59%，特异度为80.77%，准确度为72.50%，单独痰涂片抗酸染色法检测结核杆菌的敏感度为58.11%，特异度为61.54%，准确度为59.00%，前者明显优于后者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：金胺O荧光染色联合抗酸染色可有效提高结核杆菌的阳性检出率，具有较高的敏感度、特异度和准确度，可作为诊断结核病的有效手段。
【关键词】金胺O荧光染色；抗酸染色；结核
【中图分类号】R52 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）11-0076-02
结核病是严重危害人类健康的慢性传染病，近10余年来，由于艾滋病的流行、移民和流动人口的增加、耐多药结核分枝杆菌(MTB)的增多，以及不少国家和地区对结核病控制的忽视等因素，全球结核病形势急剧恶化。目前，全球已有20亿人感染MTB，活动性肺结核患者达2000万，每年新发患者达800万-1000万，新发患者中多耐药患者占3.2%，每年有300万人死于结核病。2009年WHO再次报告我国是全球22个结核病高负担国家之一，结核病年发患者数约为130万，占全球发患者数的14%，位居全球第2位，耐多药肺结核每年新发患者人数约12万。结核病是由MTB感染引起的慢性传染病，快速诊断和治疗是结核病控制的关键。临床上结核病的诊断主要依靠病理组织学结果及抗酸染色法(Ziehl-Neelsen染色法)加以确诊。抗酸染色法是一种特异性高且长期用于结核病病原学诊断的经典方法，但其镜检时间较长，敏感性低，无法满足目前临床诊断的需求[1]。为了提高结核杆菌的检测率，本研究采用金胺O荧光染色法联合抗酸染色应用于结核病的诊断，效果满意，现报告如下。
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取2015年1月-2016年9月期间确诊治疗的结核病患者286例为研究对象。其中男175例，女111例，年龄21～70岁，平均年龄（37.3±1.2）岁。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆病程1～23年，平均病程（14.3±0.2）年。
1.2 方法
所有研究对象均进行常规痰液收集，即用竹签挑取标本的脓血样或干酪样部分0.05～0.1mL在玻片右2/3处均匀涂10mm×20mm的椭圆形痰膜，玻片经火焰固定后，制作成常规验痰标本一式两份，全部操作流程和评定标准按照中国结核病防治规划中《痰涂片镜检质量保证手册》进行，采用痰涂片抗酸染色法和金胺O荧光染色法检测所有标本中结核杆菌的阳性检出率，统计分析两种诊断方法对结核病的诊断效果。
1.3.1痰涂片抗酸染色法 所有待检标本在痰膜上盖满石炭酸复红染液，火焰加热至出现蒸汽后，脱离火焰，染色5min后洗去染色液，沥干剩余的水加5%的盐酸酒精脱色至无色，沥干后加亚甲蓝复染30s，冲去复染液，自然干燥后镜检，操作均严格按照说明书标准进行操作。
1.3.2金胺O荧光染色法 所有待检标本滴加染色剂（金胺O）盖满玻片，染色15min，流水自玻片一端轻缓冲洗，洗去染色液后沥去玻片上剩余的水，并在痰膜上端滴加5%盐酸酒精，脱色1～2min或至无色，冲去脱色剂后加复染剂（0.5%高锰酸钾）复染2～4min，冲去复染液，自然干燥后镜检，所有试剂均由珠海贝索生产，操作均严格按照说明书标准进行操作。
1.4 观察指标[2]
应用普通光学显微镜、10倍目镜、100倍油镜对抗酸染色进行观察，抗酸杆菌显示红色，其余细菌、细胞则显示蓝色。采用紫外光源荧光显微镜、10倍目镜、20倍物镜对金胺“0”荧光染色进行观察，背景色为黑色，残留物为淡黄色，抗酸杆菌显示橘黄色，应用40倍物镜再次观察显示形态为杆状或者短棒状，即可确定为结核分枝杆菌。两组检验方法检验结果均以“-”、“±”、“1+”、“2+”、“3+”、“4+”表示，其中“±”、“1+”、“2+”、“3+”、“4+”均表示检验结果呈阳性，“-”表示检验结果呈阴性。
2.结果
金胺O荧光染色联合抗酸染色法检测结核杆菌的敏感度为69.59%，特异度为80.77%，准确度为72.50%，单独痰涂片抗酸染色法检测结核杆菌的敏感度为58.11%，特异度为61.54%，准确度为59.00%，前者明显优于后者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
3.讨论
目前对结核病的诊断仍然缺乏快速有效的方法，抗酸染色和细菌培养是临床确诊结核病的可靠方法。抗酸染色法为沿用了70余年的常规方法，但是其灵敏度低，漏诊率高。而培养法耗时较长，临床医生拿不到实验室依据确定耐药结核病，无法制定个体化抗结核治疗方案，以往的经验性抗结核方案并不能完全有效控制结核病。加强结核病实验诊断新技术的临床应用研究，如何尽快获得病原体，建立快速敏感的结核分枝杆菌药敏试验方法已成为有效控制结核病的首要条件[3]。金胺O荧光染色法较传统染色法灵敏度高，对那些病变活动性轻排菌量少的肺结核诊断具有重要意义。金胺O荧光染色法镜检时，结核分枝杆菌在暗视野下发出闪亮的橘黄色荧光，呈杆状或短棒状，非常明显容易发现；其读片放大倍数为400倍（40倍物镜，10倍目镜），所观察视野面积大，观察相同面积视野所需时间短；报告阴性结果只需观察50个视野，适合于工作量大、样本量多的检测。
本研究结果显示，金胺O荧光染色联合抗酸染色法检测结核杆菌的敏感度、特异度、准确度均高于单独痰涂片抗酸染色法检测，差异具有统计学意义（P＜0.05）。综上所述，金胺 O 荧光染色联合抗酸染色可有效提高结核杆菌的阳性检出率，具有较高的敏感度、特异度和准确度，可作为诊断结核病的有效手段。
【参考文献】
[1]陈顺平，陈伟德，吴文乔，等.金胺O荧光染色在结核病病理诊断中的应用价值[J].临床与实验病理学杂志，2016，32(2)：229-230.
[2]孙艳杰.金胺“0”荧光染色法对结核病细菌学检验的价值分析[J].世界最新医学信息文摘，2016，16(81)：110.
[3]张正勋，邱光艳.两种方法检测结核分枝杆菌阳性率的比较[J].基层医学论坛，2017，21(4)：463-464.
论文作者:白建华
论文发表刊物:《心理医生》2017年11期
论文发表时间:2017/5/27
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