赵子浩
（临沂市罗庄区食品药品监督管理局 山东 临沂 276017）
【摘要】 本研究利用微波、加压和加热回流三种方法提取甘草中的皂苷并比较三种提取方法对皂苷提取率和抗氧化活性的影响。结果表明：加热回流提取的提取率和抗氧化活性最高；微波提取的提取速率最高，但提取率较低，会造成原料的浪费。因此采用加热回流能得到较高的提取率，产物具有较好的抗氧化活性，容易操作，节约原料，节省溶剂，具有实际的工艺参考价值。
【关键词】 甘草皂苷；微波；加压；加热回流；提取
【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）16-0385-02
甘草是我国常用的中草药品种之一，用于脾胃虚弱,中气不足,咳嗽气喘,腹中挛急作痛,缓和药物烈性和解药毒等，有抗炎、抗变态、抗溃疡、防治病毒性肝炎及高血脂症、抗癌、抗利尿、抗干扰素诱生剂及增强细胞免疫调节之功效[1]。
甘草中甘草皂苷的提取方法有多种，传统的方法操作简单，成本低廉，但提取率低，溶剂消耗量大，杂质多，无法满足高速发展的中药现代化的要求。目前，国内外涌现出了许多先进的提取技术，如连续提取法、微波辅助提取法、加压提取法、加热回流提取法等。与传统方法相比，微波、加压和加热回流三种提取方法具有提取时间短、产品提取率高、溶剂消耗少等优点。本研究利用微波、加压和加热回流三种方法提取甘草中的皂苷并测定其含量，并对这几种方法的流程、利弊和提取效率进行比较，对甘草中皂苷提取工艺进行探讨，以期达到提高甘草中甘草皂苷的提取率、节约原料、减少污染的目的，并找到最佳工艺参数，为工业生产提供理论依据，适应工业化生产的需要[2]。
1.实验部分
1.1 实验药材与试剂
1.2实验方法
1.2.1 实验工艺流程
将甘草粉碎，过20目筛，称取过筛后的甘草20g，加入300ml蒸馏水，分别用三种方法进行提取，分别于规定时间点取样10 ml置于试管中，得粗提取液，将粗提取液过滤，浓缩，加入规定量的甲醇，静置12h，过滤，将滤液于水浴锅上蒸干，得甘草皂苷的提取物。精密称取甘草皂苷提取物10mg置于10ml容量瓶中，加甲醇并定容至刻度线，配成1mg/ml的溶液，精密量取此溶液1.0ml至带塞的试管中，水浴蒸干溶剂，加入5%香草醛-冰醋酸溶液（新配制）0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀密封，置70℃水浴反应15min,冷却2min，加入5.0ml冰醋酸后摇匀，放置20min，用紫外分光光度计于483nm处测定吸光度值A。
1.2.2含量测定
1.2.2.1测定波长的选择
根据预实验，甘草素标准品溶液在400～650nm波长范围内用T6新世纪分光光度计扫描，结果5个标准品的最大吸收波长都是483 nm，故以483 nm作为甘草皂苷的检测波长。
1.2.2.2微波提取法
称取20 g甘草，加入300 ml蒸馏水， 火力为中低火，提取时间10 min，分别于3 min、5 min、10min取样10 ml，按照前述方法测定吸光度A值，并计算甘草皂苷提取率。
1.2.2.3加压提取法
称取20g甘草药材，加入300ml蒸馏水，压力为0.5MPa，温度为110℃，提取时间90min，分别于15min、30min、45min、60min、90min取样10ml，按照前述方法测定吸光度A值，并计算甘草皂苷提取率。
1.2.2.4加热回流提取法
称取20g甘草药材，加入300ml蒸馏水，温度为100℃，提取时间120min，分别于20min、40min、60min、90min、120min取样10ml，按照前述方法测定吸光度A值，并计算甘草皂苷提取率。
1.2.2.5抗氧化活性测试
将上述三种方法所得的提取物进行干燥，再用甲醇配成0.01mg/ml的溶液，摇匀待测。取2.0mgDPPH?置于容量瓶中，加入100ml甲醇配成DPPH?溶液。按表2加样，总体积4.0mL，在室温下静置30min。利用DPPH?溶液的特征紫红色团的吸收，在最大波长处（517nm）测定各吸光度（A），每一吸光度平行测3次，取其平均值。
1.3实验结果与讨论
1.3.1三种方法的实验结果对比
从上表可知，加热回流提取甘草皂苷的提取率最高，微波提取甘草皂苷的提取速率最高。采用加热回流法提取120 min时的提取率为0.99%，提取速率为8.25×10-3mg/(g?min-1)；采用微波法提取10min时提取率为0.64%，提取速率为63.60×10-3 mg/(g?min-1)。两种方法相比较，虽然微波提取的提取速率比加热回流的高，但微波提取的提取率低于后者，会造成原料的浪费，且微波提取产物的抗氧化活性低于后者，而加热回流提取能得到较高的提取率，产物具有较好的抗氧化活性，还具有操作简单易行，节约原料和节省溶剂等优点。
1.3.2 抗氧化活性研究
从上表可以看出加压提取的清除率较低，即加压提取所得提取物的抗氧化活性最低；加热回流提取的清除率最高，即加热回流提取所得提取物的抗氧化活性最高。
2.结论
（1）三种方法各有优缺点。从提取率来看，微波提取和加压提取的提取率相当，加热回流提取的提取率（0.99%）高于其它三者。
（2）从提取速率来看，加压提取和加热回流提取的提取速率相当，微波提取的提取速率(63.60×10-3mg/(g?min-1))高于其它两者，提取时间也少于其它两者。
（3）抗氧化活性的实验表明，甘草皂苷具有抗氧化活性，不同提取方法的抗氧化活性不同，其中加压提取的清除率（1.62%）最低，抗氧化活性最低；加热回流提取的清除率（16.30%）最高，抗氧化活性最高。
（4）三种方法比较之下，采用加热回流提取法能得到较高的提取率，产物具有较好的抗氧化活性，能最大限度地保证提取物的质量，容易操作，节约原料，节省溶剂，具有实际的工艺参考价值。
【参考文献】
[1] 国家药典委员会．中国药典2000年版一部[M]．北京：中国医药科技出版社，2000.
[2] 潘学军，刘会洲，贾光和等．从甘草中提取甘草酸不同方法的比较[J]．过程工程学报，2001(1)：102-105.
论文作者:赵子浩
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第16期供稿
论文发表时间:2015/8/12
标签：甘草论文; 活性论文; 抗氧化论文; 方法论文; 微波论文; 皂苷论文; 三种论文; 《医药前沿》2015年第16期供稿论文;