1、江苏省响水县人民医院骨科；2、江苏省盐城市卫生职业技术学院
【摘 要】目的：探讨伴大段股骨游离、污染的开放性骨折动物实验研究。方法：选取健康家兔29只，随机分为试验组、传统组。所有动物造成伴大段股骨游离、污染的开放性骨折动物模型后分组处理。传统组动物采用传统的清创、内固定手术。试验组动物采用自体骨库技术二期回植处理。结果：两组动物经不同处理后所产生不同治疗效果，其中在进食情况、活动度、伤口并发症、死亡率等指标上，试验组均优于传统组，而骨折愈合情况指标显示两组无明显差异。结论：应用自体骨库技术处理家兔伴大段股骨游离、污染的开放性骨折可以明显降降低家兔并发症、病死率，而同时与传统方法相比仍可以达到相同的骨折治愈率，为此技术应用于临床提供了实验相关证明。
【关键词】开放性骨折；骨库；内固定
随着经济、社会的发展，高能量、重污染的开放性骨折已为临床多见。此类骨折的特点是软组织损伤重、皮肤缺损及污染严重多为Gustilo Ⅲ型骨折。此类骨折如果处理不当将产生严重的并发症如感染、皮肤软组织坏死等进而要施行截肢等进一步处理，甚至部分患者因毒素吸收引发高血钾、肾功能衰竭等严重危及生命[1]。软组织损伤修复与骨折的处理是此类患者康复过程中既矛盾又统一的两个问题。本研究采用家兔股骨游离、污染的开放性骨折模型作了自体骨库技术研究，取得了满意效果，报导如下。
1、材料与方法
1.1模型制作
选取健康家兔29只，体质量2.6～3.0 kg，3～4 月龄（盐城市卫生职业技术学院动物房提供）。动物适应性喂养2周后，采用随机数字表法将家兔分为2组：试验组13只、传统手术组16只。动物麻醉后固定于操作台，以250G砝码从3米高处自由落体损伤右侧大腿中外侧，造成损伤。检视伤处，伤口不足3cm的动物以解剖剪作长3cm伤口，并暴露、游离股骨长约2cm。为模拟交通事故伤口，取同一道路同一处路边干泥土50G，均匀撒在伤口部造成污染。污染60分钟后处理伤口。
1.2方法
传统组动物：先彻底清创，游离的股骨块予碘付浸泡后复位，以克氏针内髓内固定、可吸收线捆扎等方法处理骨折，遂层缝合伤口，视情况引流，辅以硬纸板外固定。术后常规应用头孢他啶三天（扬子江药业有限公司，批号2014061250 1G，M，bid）。术后动物常规喂养。
试验组动物：先彻底清创，将游离的股骨块摘除另行处理。牵引恢复动物下肢长度，以克氏针临时先髓内固定，遂层缝合伤口，视情况引流，辅以硬纸板外固定。术后常规应用头孢他啶三天。术后动物常规喂养。游离股骨参照丁国民[]方法建自体骨库。将股骨以流动的清水反复冲洗后置于室温中干燥。干燥后将骨块置入95%酒精中浸泡3小时，取出后在室温下干燥。待酒精挥发后再置入乙醚中浸泡3小时。取出后以1：1000的洗洁净溶液中冲洗，再以生理盐水冲洗。干燥后行第二次酒精、乙醚、洗洁净、生理盐水冲洗干燥。干燥后以离心机脱水。经处理后的骨块以聚乙烯材料及复合材料包装以环氧乙烷消毒、常温下备用。术后10天再次手术，拆除原有缝合线，切开股外侧肌取出内固定克氏针，先将骨折两端清理，并以骨锉锉除骨折端老化骨质，将自体骨库骨块移植于缺损处，必要时视情况取少许髂骨植骨，再次以克氏针髓内固定，冲洗创面后，缝合，外辅以硬纸板固定。术后常规应用头孢他啶三天、常规喂养。
1.3观察方法
观察时间起点均为动物受伤时计算。伤后连续统计动物死亡率，并最后于伤后20周后统计。伤后3周观察动物走路、追逐等活动情况，以及进食量，与伤前比较，结果计为差、可、良三个等级。伤后4周观察伤口并发症情况，根据轻度红肿、渗液、未愈等情况，计为并发症无、轻、中、重四个等级。伤后20周处死存活的动物，观察骨折愈合情况，计为差、可、良、优四个等级。所得数据经SPSS17.0处理，p<0.05为有统计学差异，计量资料行t检验，计数资料行X2检验。
2.结果
伤后观察活动度、进食量、伤口并症等指标，将期间死亡动物归为差、重等不良指标。
表一数据表明，两组动物经不同处理后所产生不同治疗效果，其中在进食情况、活动度、伤口并发症、死亡率等指标上，试验组均优于传统组，而骨折愈合情况指标显示两组无明显差异。
3.讨论
严重开放性骨折常伴有严重的软组织损伤、污染，是骨科较为常见的损伤。此类损伤多见于交通事故、高处坠伤等，致残、致死率高，处理起来较为棘手，是众多骨科医生的高难度挑战。为防止感染、皮肤软组织坏死等并发症产生以往学者总结了较多经验其中以Gustilo等[3-4]的“四项基本原则”影响最为广泛即：①延迟一期闭合。②禁止使用内固定。③急诊处理。④抗生素使用。急诊清创过程中对污染的骨块多采用小块丢弃、大块骨块予以消毒浸泡后再行植回的原则。重度污染的骨折仅予浸泡消毒并不能达到灭菌的效果，不能保证骨深部的消毒、灭菌如芽胞生长等，是骨感染的潜在感染灶。此类骨折软组织损伤严重，血供严重欠佳，加之不能使用内固定物使骨块的稳定性不能保证，大块游离骨块的成活往往不能保证。后期手术多采用移植自体骨及同种异体骨。自体骨因无免疫排斥、取材方便等广泛被应用。自体骨移植存在取骨量有限、给患者造成了新的创伤等不足。同种异体骨近年来发展迅速，临床应用方便，但存在制备工艺复杂、免疫排斥、传染疾病及骨吸引等多种不利因素使得其临床应用有所限制[5-6]。
骨库技术是近年来发展迅速的骨保存技术。其主要优点是可以较长间的保存离体骨块而且可以保存骨块的中骨形态发生蛋白（BMP）。BMP可诱导结缔组织中的间充质细胞、骨髓基质细胞、滑膜细胞、成纤维细胞呈现软骨细胞和骨细胞表型，有利于骨移植面的修复。利用骨库技术行同种异体骨移植为临床解决大段骨缺损已为众多学者认同[6、7-9]。
本次研究中利用清创时所游离的自体骨建成自体骨库用于二期恢复骨连续性是处理高能量、重污染的开放性骨折游离骨块取得良好效果，是处理此类损伤的理想方法。此技术如果能成功应用于临床将有如下几点优点。①可以保证大骨块的有效果消毒、灭菌，从而消灭了植骨时的潜在感染源。②使严重损伤的软组织有足够的“休息、恢复”时间，减少感染、肌肉坏死及组织损伤等风险。③减少患者取自体的创伤。排除植同种异体骨的风险如疾病传染、排斥反应等。④降低患者医疗费用。同种异体骨往往要在大型医院的骨库才能购买、手术要求高。而自体骨库技术因保存时间相对短、消毒及保存条件相对要求低在一般县级医院即可开展，免去了患者前往大医院转诊及陪护人员的生活费用，将大降低患者的医疗费用。
4.结论
本次研究结果表明应用自体骨库技术处理家兔伴大段股骨游离、污染的开放性骨折可以明显降降低家兔并发症、病死率，而同时与传统方法相比仍可以达到相同的骨折治愈率，为此技术应用于临床提供了实验相关证明。
本次研究主要不足在于观察指标较为主观，有误判可能。本次研究样本较小，未能作大样本研究。在以后的研究工作中将力争克服以上不足，进一步研究相关技术。
参考文献：
[1]谢娟，杜亮，夏天，等.四川大学华西医院1861例汶川地震住院和死亡伤员伤情与死因分析.中国循证医学杂志，2008，8（8）：591-596.
[2] 丁国民.脱脂干燥同种异体骨的制备及临床应用.现代康复，2000，（01）：126.
[3]Gustilo RB，Anderson JT.Prevention of infection in the treatment of one thousand and twenty-five open fractures of long bones：retrospective and prospective analyses.J Bone Joint Surg Am，1976，58（4）：453-8.
[4]Anderson JT，Gustilo RB.Immediate internal fixation in open fractures.Orthop Clin North Am，1980，11（3）：569-78.
[5]孙世荃.同种骨的制备方法及其成骨效果.中华外科杂志，1996，34（8）：473-475.
[6]胡蕴玉，孙磊.建立同种异体骨库与骨制备的临床应用.中华外科杂志，1996，34（8）：464-468.
[7]李丹，胡蕴玉，袁志，等.综合骨库各类骨移植材料的制备、消毒及保存.第四军医大学学报，2001，22（22）：2038-2042.
[8]刘晓龙，游伟.大段同种异体骨的制备研究.中国矫形外科杂志，2003，11（16）：1127-1128.
[9]Maruyama S，Hasegawa Y，Sakano S，et al.Experimental evaluation of the usefulness of osteochondral allograft for articular cartilage defect.J Orthop Sci，2003，8（4）：560-6.
论文作者:向青天,王小兵,陈正平,左红光,王春华
论文发表刊物:《航空军医》2016年第10期
论文发表时间:2016/7/23
标签：骨库论文; 股骨论文; 动物论文; 家兔论文; 自体论文; 损伤论文; 软组织论文; 《航空军医》2016年第10期论文;