徐世东1 努尔夏西·夏合曼2
1福海县疾病预防控制中心检验科 836499；2福海县疾病预防控制中心检验科 836499
【摘 要】目的：探讨分析微生物实验室检验质量控制结果，探讨实验室检验技术能力提升方法及对策。方法：制备质量控制盲样菌种，将其接种在多种平板上，同时做细菌生化鉴定生长。分别取W0320a号TSⅠ斜面菌苔和W0320b号TSⅠ斜面菌苔进行沙门血清凝集试验及志贺菌和致泻大肠埃希菌凝集试验。结果：质控考核的致病菌包括4种，分别为致病大肠埃希菌、宋内氏志贺菌、鸭沙门菌和奇异变形杆菌，将检测结果上报至上级疾病预防控制中心微生物室，显示结果均全部正确。结果：微生物实验室质量控制的建立和工作的运行时确保微生物检验工作准确、科学、公正的关键，而质量控制考核的进行不仅能够全面了解和检验微生物实验室内质控情况，还可有效提升检验人员的检验技术能力，保证检验数据满足检验质量标准的要求。
【关键词】微生物；实验室；质量控制；检验技术能力
微生物实验室是预防和控制疾病工作开展极为重要的技术支撑，也是卫生行政执法非常重要的手段和方法，因此其检验结果的准确性非常重要[1]。微生物实验室检验结果的准确行会受到环境条件、检验人员技术水平、检验设备、操作方法、试剂质量等众多因素的影响，任一方面的误差都有可能导致结果出现很大偏差，因此质量控制的开展就十分关键[2]。本实验则主要是对微生物实验室质量控制的结构进行分析，以进一步探讨实验室检验技术能力提升的方法和措施。
1材料和方法
1.1材料和试剂
质量控制样品为盲样菌种W0320a和W0320b干粉，均来自于上级疾病预防控制中心微生物室。细菌生化鉴定的试剂盒培养菌则均来自于杭州天和微生物试剂有限公司。所选择的诊断血清分别为15种肠道致病性大肠埃希菌血清、30种沙门菌诊断血清和50种志贺菌诊断血清，均来自于宁波天润药业有限公司。选用的所有材料和试剂均处于有效期内。以《食品卫生微生物检验》GB/T4789.1-4789.31-2003作为检验依据。
1.2检验方法
首先进行增菌。将盲样在无菌环境和操作下打开，将其接种至无菌的营养肉汤管中，在37℃下培养6h后将其转种至增菌液中，之后在37℃下培养18-24h，然后进行分离培养，对各增菌液的生长情况进行观察。之后进行转种。当在营养肉汤、肠道增菌液、GN、SG中可见W0320a和W0320b呈浑浊生长后进行转种。分别在BS、SS、麦康凯中直接接种W0320a和W0320b的一环增菌液，分别置于营养琼脂、HE平板上，在37℃下培养24h。分别在W0320a号的SS、BS平板和W0320b号的SS、HE平板上挑取待测菌落转种至三糖铁琼脂（TSⅠ），并同时分别进行15种细菌生化鉴定，在37℃下培养24h后对结果进行观察。最后进行血清学鉴定。分别取W0320a号TSⅠ斜面菌苔和W0320b号TSⅠ斜面菌苔进行沙门血清凝集试验及志贺菌和致泻大肠埃希菌凝集试验。
2结果
2.1分离培养
在SS平板上W0320a号形成的菌落形态呈半透明、圆形、中心黑点，W0320b号形成的菌落呈乳黄色的凸起、半透明、光滑湿润、边缘整齐、中等大小形态及无色的粗糙、扁平形态；在BS平板上W0320a号形成的菌落呈有金属光泽的黑色形态；在营养琼脂平板上W0320a号形成的菌落呈现蔓延扩散生长形态；在HE平板上W0320b形成的菌落呈现黄色不透明形态及蓝绿色、中等大小形态，其在麦康凯平板上形成的菌落形态与SS平板上相同。
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2.2生化检验
W0320a在TSⅠ中的生长情况：底层为A，斜面为K，动力（+）、硫化氢（+），并且产气，氧化酶试验结果呈阴性。在15种细菌生化鉴定中的生长情况为：在枸橼酸盐（+）、甲基红（+）、鸟氨酸（+）、木胶糖（+）、赖氨酸（-）、靛基质（-）、侧金花（-）、山梨醇（-）中出现的结果相同。在尿素（+++/-）、葡萄酸盐（+/-）、苯丙氨酸（+/-）中出现的结果不同。该质控样品中存在2种致病菌，对其观察和鉴定可见其在营养琼脂中的生长呈蔓延扩散状态，会迅速分解为尿素，观察其在15种细菌和TSⅠ的生化鉴定生长情况，可确定致病菌分别为沙门菌和奇异变形杆菌。
W0320b在TSⅠ中的生长情况：底层（A/A）、斜面（A/K）、动力（+/-）、硫化氢（A/A）、产气（+/-）。在15种细菌生化鉴定中，W0320b的结果基本与W0320a相同，除在木胶糖（+/-）、山梨醇（+/-）上的结果不同。。该质控样品中存在2种致病菌，观察其在TSⅠ中的生长和生化情况可初步确定致病菌分别为志贺菌属和大肠埃希菌属。
W0320a号TSⅠ斜面菌苔的沙门血清凝集试验结果显示，H抗原鉴定，生理盐水对照（-），第Ⅰ相e、h（+++），第Ⅱ相1/6（+++）；O抗原鉴定，O10因子血清（+++），A-F多价）血清（+++）。以沙门菌抗原表为判定标准可确定为鸭沙门菌。
W0320b号TSⅠ斜面菌苔的志贺菌凝集结果为，生理盐水（-），D群Ⅰ相（+++），志贺菌多价（+++）。根据志贺菌生化反应和血清学鉴定结果可确定为宋氏志贺菌。W0320b号TSⅠ斜面菌苔的致泻大肠埃希菌结果为，将其和大肠埃希菌多价血清和含单价O111：K58（B4）凝集。生理盐水对照（-）进行定量凝集试验：O111：K58效价为：1270凝集。生理盐水对照（-）。将其与大肠杆菌多价血清和含单价O111：K58（B4）凝集。生理盐水对照（-）进行定量凝集试验：O111：K58效价为1：1270凝集。生理盐水对照（-）。依据大肠埃希菌生化反应和血清学鉴定结果，可确定为含单价O111：K58（B4）的致病大肠埃希菌（EPEC）。
将上述盲样检测的质控考核结果上报至上级疾病预防控制中心微生物检验所，结果均正确。
3讨论
微生物实验室的质量控制主要可分为室间和室内质量控制两大类，前者的目的在于及时发现日常实验室工作的问题，保证不同实验室的检验质量水平达到一致，并提升实验室的监测能力；后者则主要在于保证微生物检验结果的准确和真实。实验室检测结果的准确性会受到众多因素的影响，因此制定和健全实验室操纵规范，重视和加强各个环节的质量监督和控制，加强质量评价，并及时针对发现的问题采取有效的改正措施，对于控制和保证实验室检测结果的科学、有效、准确和公正至关重要[2-3]。
笔者总结应该重点做好以下几个方面的工作：（1）接收样品时应根据相关的实施方案谨慎进行，及时提出疑问；（2）质控活动的开展需要有相关人员作为保障，强化对检测人员的技术要求和责任意识，不断提升其平板分离、高疑似菌落识别等技术；（3）做好对常用设备的质量管理，保证其性能和运行状态良好；（4）严格遵循相关标准进行培养及质量控制，注意避光保存和有效灭菌，保证其适用性良好；（5）密切观察细菌鉴定的生化反应过程，逐步将其他相似菌排除，并且可通过多次反复试验来保证多株细菌的分析结果明确、清晰[4]。本研究结果显示，本微生物实验室的检验结果准确、真实且客观，提示上述质量控制得到了有效落实。
综上所述，微生物实验室质量控制的建立和工作的运行时确保微生物检验工作准确、科学、公正的关键，而质量控制考核的进行不仅能够全面了解和检验微生物实验室内质控情况，还可有效提升检验人员的检验技术能力，保证检验数据满足检验质量标准的要求。
参考文献：
[1]吴正铜.微生物实验室内部质量控制分析[J]. 检验医学与临床，2014，11（2）：287-288.
[2]张维娜.微生物检验标本不合格原因分析及质量控制对策探讨[J].世界最新医学信息文摘，2015，11（74）：199-200．
[3]陈晓能，邓育芳.疾控中心微生物实验室质量控制影响因素及解决对策[J]. 齐齐哈尔医学院学报，2016，37（29）：3683-3684.
[4]张利，高彩莲.疾控中心微生物实验室质量控制影响因素及解决对策[J]. 世界最新医学信息文摘：电子版，2016，16（78）：214-215.
论文作者:徐世东1,努尔夏西·夏合曼2
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2018年1月第1期
论文发表时间:2018/5/19
标签：微生物论文; 质量控制论文; 实验室论文; 血清论文; 斜面论文; 菌落论文; 沙门论文; 《中国医学人文》(学术版)2018年1月第1期论文;