（四川省成都市第三人民医院＜暨重庆医科大学附属成都第二临床学院＞检验科 四川 成都 610031）
【摘要】目的：回顾性分析医院住院患者呼吸道金黄色葡萄球菌感染分布情况及耐药性的发展趋势，为临床合理使用抗菌药物提供帮助。方法：收集我院2013年1月—2015年12月送检的合格的痰液、咽拭子及鼻拭子标本，去除同一患者重复分离的菌株，分析金黄色葡萄球菌在呼吸道的感染分布情况及耐药性发展趋势。结果：2013年—2015年共分离出654株金黄色葡萄球菌，其中有85株因无明显临床症状及影像学证据证明具有呼吸系统疾病患者，排除在本组统计数据之内。具有明显临床症状及有影像学证据，做出临床诊断的菌株有569株，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌阳性率为37.30%（212/569）。结论：SA感染在呼吸道感染中占重要地位，以老年及婴幼儿为主，且SA耐药性愈发严重，应加强医院卫生管理，并合理使用抗生素。
【关键词】金黄色葡萄球菌；呼吸道感染；MASA；耐药性
【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）20-0241-02
【Abstract】Objective The distribution and drug resistance of Staphylococcus aureus infection in respiratory tract of hospitalized patients were analyzed retrospectively.Provide help for clinical rational use of antimicrobial agents.Method Collected from January 2013 to December 2015 were qualified sputum, swabs, and nasal swab specimens, remove the same patients with repeated separation strains, analysis of staphylococcus aureus in respiratory tract infection distribution and drug resistance of development trend. Conclusion SA infection plays an important role in the respiratory tract infections, mainly in the elderly and infants, and SA drug resistance is becoming more and more serious, should strengthen the hospital health management, and rational use of antibiotics.
金黄色葡萄球菌是人类感染常见的一种病原菌，隶属于葡萄球菌属，可引起许多严重感染。常见于呼吸科、儿科、重症监护室，同时也是医院感染的重要病原菌之一。由于近年来抗生素的广泛使用，金黄色葡萄球菌的耐药性愈发严重，给临床用药带来了极大的困难，因此，回顾性分析医院住院患者呼吸道金黄色葡萄球菌感染分布情况及耐药性的发展趋势，及时了解各地区及医院的金黄色葡萄球菌感染分布及耐药性，积极预防各类基础疾病，同时也为临床合理使用抗菌药物及预防多重耐药性的发展提供参考。
1.资料与方法
1.1 资料
1.1.1研究对象以本院2013年1月—2015年12月住院患者来自痰液、鼻咽拭子金黄色葡萄球菌分离阳性者为研究对象进行回顾性调查。
1.1.2数据库建立进入医院微生物室信息系统，以痰液、鼻拭子、咽拭子为关键词搜索、提取调查年度病原菌分离相关信息建立数据库；以金黄色葡萄球菌为关键词检索研究年度内上述各类标本SA分离阳性全部住院患者基本临床信息与药敏信息，建立金黄色葡萄球菌数据库；同时查阅患者电子病历完善数据库临床资料部分。
1.2 方法
1.2.1标本采集
痰液标本采集为清晨第一口痰，收集前先清洁口腔，尽量排除口腔内杂菌，然后从深部咳出，收集在无菌痰杯内。痰液采样合格标准为：涂片细胞学检查显示中性粒细胞>25个/低倍视野（LP），鳞状上皮细胞<10个/低倍视野（LP），或白细胞/ 鳞状上皮细胞≥ 10[4]。咽拭子采集方法为左手用压舌板压住患者舌头，待患者发“啊-”音时，右手持无菌拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（避免触及舌部），将拭子头浸入采集液中。
1.2.2仪器与试剂
孵育箱：7% CO2培养箱
仪器采用德灵Microscan全自动微生物鉴定药敏系统及其配套微生物复合检测板；血平板、麦康凯等平板购自重庆庞通有限公司。
1.2.3细菌培养与鉴定
金黄色葡萄球菌培养与鉴定按《全国临床检验操作规程》第3版标准进行。标本接种于哥伦比亚血琼脂平板、麦康凯平板、巧克力平板，置7% CO2培养箱中孵育18～24h后，金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上呈2～3mm金黄色、白色等圆形、光滑、大而凸起菌落，菌落周围有透明溶血环（β溶血环）。选择哥伦比亚血琼脂平板上的β溶血环细菌进行革兰染色、触酶试验、凝固酶试验等初步鉴定，用德灵Microscan全自动微生物鉴定系统鉴定。
1.2.4药敏试验
采用德灵全自动微生物鉴定药敏系统，用ATCC 25923 SA标准菌株进行质控，标准菌株购自卫计委临床检验中心，药敏结果判断依据美国临床实验室标准化研究所（CLSI）2014年颁布抗菌药物折点标准，计算细菌敏感与耐药率。
1.2.5耐甲氧西林葡萄球菌的检测
耐甲氧西林葡萄球菌检测以头孢西丁纸片法判定。
选取孵育16～24小时的金黄色葡萄球菌，制备0.5麦氏比浊管浓度的菌液；按照K-B法的要求，每种细菌接种一个MH平板，盖上平板盖子，放置3～10分钟后贴上头孢西丁（30μg）纸片，放置培养箱孵育；35℃大气环境孵育20～24小时，量取抑菌环直径。
1.2.6统计学分析
SA药敏数据采用WHONET5.6统计软件进行统计与分析。统计学分析使用SPSS 21.0软件处理，计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验或Fisher确切概率法，P≤0.05认为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 各类呼吸道标本SA检出率
2.1.2 2013年—2015年12月住院患者共送检痰液、咽拭子、鼻拭子标本共76664份，共分离出SA 569株， SA总阳检率0.74%，MASA检出率逐年降低。见表1。
注：χ2=7.533，P=0.023；
2.1.3 SA阳性569例分布于全院各病区呼吸系统感染住院患者，47.5%（270/569）SA阳性源于肺炎，33.7%（192/569）源于其他肺部感染，其他18.8%（107/569）源于支气管炎或上呼吸道感染患者。
2.2 呼吸道SA感染在各年龄段分布
金黄色葡萄球菌感染在老年人（＞60岁）最多，分别占56.9%（324/569），其次为婴幼儿（0～3岁），占23.4%（133/569），在青少年（11～18岁）最少，占1.6%（9/569）可能与各年龄段的免疫力低下有关。具体见表3。
3.讨论
呼吸道疾病多为慢性疾病，如COPD、慢支炎、哮喘等，大多发生在高龄及免疫力低下者，此类患者多为药物治疗，且用药量大，住院时间长，导致感染金黄色葡萄球菌的几率增大。金黄色葡萄球菌是呼吸道感染的重要病原菌之一，自1961年英国Jevcns首次报道MRSA以来，时至今日，MRSA已在全世界范围内流行，成为院内感染的主要病原菌之一，伴随近年来抗菌药物广泛使用，金黄色葡萄球菌的多重耐药菌株也广泛流行，给临床用药带来了极大的困难。在美国，国家院内感染监视系统报告，在2003年MRSA的感染相比1998-2002年的记录增加了12%，从危重患者收集分离的SA中超过63%为MRSA[2]，2005年在北京医院临床分离到的SA中，MRSA占78.6%[3]，2003—2004年，广州地区除了儿科为16.4%外，其余各科都在75.5%～90.2%间[4]。
本组数据研究显示，2013年—2015年金黄色葡萄球菌的分离率为，其感染率与性别等因素无关，但与年龄有关，感染对象主要为老年人（年龄>60岁），占56.9%（324/569）及婴幼儿（0～3岁），占23.4%（133/569），这可能与严重的基础疾病、免疫力低下及免疫功能发育不全有关，此类患者因自身因素更容易受到金黄色葡萄球菌的侵袭。SA阳性569例分布于全院各病区呼吸系统感染住院患者，47.5%（270/569）SA阳性源于肺炎，33.7%（192/569）源于其他肺部感染，其他18.8%（107/569）源于支气管炎或上呼吸道感染患者。其中有26%（148/569）的患者有侵袭性操作，有35.8%（53/148）有呼吸道的侵袭性操作，此类患者因外界因素及自身因素更容易受到金黄色葡萄球菌的侵袭，但不能完全排除院感可能。因此医院应加强预防医院感染，做好消毒卫生工作。
有学者研究表明，MRS具有耐多药性的特征[5]，近几年，由于临床大量使用各种广谱高效抗生索，使MRSA的检出率较高，造成临床分离出的SA具有较高耐药性。本组研究显示，2013-2015年间SA对苯唑西林、环丙沙星、利福平、青霉素G、庆大霉素、四环素、头孢曲松、左旋氧氟沙星氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸耐药率波动显现出统计学差异。SA对青霉素G、氨苄西林依然高度耐药，耐药率在90%以上，而对庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、四环素、阿莫西林/克拉维酸、苯唑西林、利福平等抗菌药物的耐药率均有不同程度的降低，对复方新诺明、呋喃妥因敏感率依然保持90%以上，目前尚未发现万古霉素及利奈唑胺耐药菌株。近年来，医院加强了抗生素的使用管理，同时重视院感的防控工作，一定程度上延长了耐药菌株的产生，提高了抗感染效果。虽然万古霉素仍是目前治疗MASA的首选用药，但美国曾报道[6]1例从糖尿病肾功能衰竭的患者体内留置导管中分离出耐万古霉素金黄色葡萄球菌，因此应该引起重视。
【参考文献】
[1]尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程(第3版)[M].北京市:人民卫生出版社，2006.
[2]DELow(多伦多，加拿大)．全球MRSA负荷增加和潜在的临床提示[N]．中华医学信息导报，2008，23(I3)：11-12．
[3]胡云建，艾效曼，宣天芝，等．2005年北京医院细菌耐药性监测[J]．中国感染与化疗杂志，2007，7(4)：259-262．
[4]叶惠芬，刘朝晖，杨银梅，等．广州地区金黄色葡萄球菌耐药率比较分析[J]．世界感染杂志，2005，5(4)：302-303．
[5]黄支密，陆亚华，陈榆，等．耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因及B-内酰胺类抗生素耐药相关基因检测[J].中华医院感染学杂志，2005，15(2)：121-123．
[6]曾钊宇，张宇，钟剑文，等.MRSA和MSSA的药敏结果比较和MRSA检出率变化趋势[J].中国当代医药，2012，4(19):66-67.
论文作者:冯小艳,杨莉莉
论文发表刊物:《医药前沿》2017年7月第20期
论文发表时间:2017/8/1
标签：葡萄球菌论文; 金黄色论文; 耐药性论文; 患者论文; 西林论文; 菌株论文; 医院论文; 《医药前沿》2017年7月第20期论文;