樊一笋[1]2001年在《两株抗人CD40配体单克隆抗体的制备及其生物学功能研究》文中研究说明CD40配体（CD40L、CD154、gp39）是一种分子量为33KDa的Ⅱ型跨膜糖蛋白，其基因定位于Xq26.3-Xq27.1，属于肿瘤坏死因子（TNF）超家族，主要表达在活化的CD4~+T细胞和肥大细胞表面。人们最初是通过高IgM综合征（HIGM）认识CD40L在体液免疫应答中的作用。HIGM免疫缺陷病发病机制为编码CD40L的基因发生突变，使CD40L不能功能性表达、或致使CD40L不能与CD40结合，主要表现为血清IgM的水平升高，IgG、IgA、IgE水平下降或完全缺失。越来越多的研究表明，CD40/CD40L在特异性免疫应答中发挥重要作用，通过CD40/CD40L的信号途径：（1）促使抗原递呈细胞的有效活化，进而介导其分化、成熟，启动免疫应答的产生；（2）活化T淋巴细胞，介导细胞免疫应答，参与记忆性T淋巴细胞的形成；（3）促使B细胞的活化、增殖、分化、分泌Ig及类型转换，对生发中心和记忆性B细胞的形成及维持起重要作用；（4）促进免疫活性细胞分泌多种细胞因子（IL-1、IL-8、IL-12、TNF-α等），参于 摘 要 免疫应答的调节。 业己报道，运用抗CD40L单克隆抗体阻断CD40CD40L，能有 效地抑制特异性免疫应答，减少特异性抗体和CTL的产生，在自身 免疫、移植排斥、炎症等病理免疫反应中发挥重要作用。有报道， 抗 CD40L单克隆抗体在小鼠自发性肾炎 SW、小鼠糖尿病 NOD、 实验诱导的胶原性关节炎、实验性自身免疫性脑脊髓炎EAE等自身 免疫病模型中，均能不同程度地减少自身抗体或自身反应性T细胞 的产生，缓解症状，延迟病程发展。同时，在皮肤、心脏、肾等小 鼠移植模型中，运用抗CD40L单克隆抗体能明显延长移植物的存活， 为移植排斥的防止和移植耐受的诱导提供了新方法。该单抗在基础 及临床免疫学中的应用前景己受到广泛关注。目前，世界上报道的 阻断型抗CD40L单抗仅叁株，国内尚未见有关报道。鉴此，阻断型 抗CD40L单抗的研制不仅具有重要理论研究意义，而且还有潜在的 开发价值。 本研究以高表达人CD40L分子的小鼠成纤维转基因细胞为抗原， 采用B淋巴细胞杂交瘤技术将免疫的小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细 胞SP2／0融合，通过荧光标记、竞争抑制、细胞核型分析和免疫印迹 等方发获得并建立两株识别不同抗原位点的鼠抗人CD40L单克隆抗 体的杂交瘤细胞株，分别命名为 IBI、4F。经体外长期传代培养， 液氮冻存半年以上反复复苏良好，分泌特异性抗体性能稳定。 CD40分子表达在一些非免疫细胞如血管内皮细胞、胸腺内皮细 胞，以及一些淋巴细胞性肿瘤病：卵巢癌、鼻咽癌、膀耽癌、慢性 淋巴细胞白血病（CLL入 非何杰金氏淋巴瘤（N’HL人 幼淋巴性白 血病0LL）及多发性骨髓瘤（MM）等。文献报道，这些肿瘤细胞 与正常的免疫细胞不同，用抗CD40激发型单抗激发或CD40L转基 因细胞与表达CD40分子的肿瘤细胞相互作用，可导致其生长抑制甚
樊一笋, 邱玉华, 朱华亭, 于葛华[2]2002年在《两株抗人CD40配体单克隆抗体的制备及生物学特性的研究》文中认为目的 :研制功能性抗CD4 0L单克隆抗体 ,探讨其生物学特性及其运用价值。方法 :采用B淋巴细胞融合、免疫荧光、免疫印迹和竞争抑制等方法获得鼠抗人CD4 0LmAb ,通过Daudi细胞生长抑制试验、混合淋巴细胞反应观察抗CD4 0LmAb的生物学功能。结果 :经表型分析、Westernblot和竞争抑制试验 ,证实mAbB1、mAb4F1是识别人CD4 0L分子的特异性单抗 ,且识别的位点不同 ;mAbB1、mAb4F1均能不同程度地拮抗CD4 0L TC介导的Daudi细胞生长抑制和抑制混合淋巴细胞反应。结论 :成功地获得两株能稳定分泌特异性抗人CD4 0L单克隆抗体的杂交瘤 (1B1、4F1) ,这两株单抗对CD4 0L的生物学功能具有明显的阻断作用 ,为阻断型单抗
参考文献：
[1]. 两株抗人CD40配体单克隆抗体的制备及其生物学功能研究[D]. 樊一笋. 苏州大学. 2001
[2]. 两株抗人CD40配体单克隆抗体的制备及生物学特性的研究[J]. 樊一笋, 邱玉华, 朱华亭, 于葛华. 中国免疫学杂志. 2002