食品检测中胶体金免疫层析技术的运用论文_张猛

食品检测中胶体金免疫层析技术的运用论文_张猛

哈尔滨市香坊区卫生监督所 黑龙江哈尔滨 150000

摘要:免疫层析法是一红新型的快速免疫分析技术,其中融合了色谱层析技术与免疫技术,近年来随着胶体金免疫层析技术的发展,其在食品检测当中取得了广泛的应用,本文就主要结合胶体金免疫层析技术的特点,对免疫层析技术在食品检测中的应用予以分析。

关键词:食品检测;胶体金;免疫层析技术

相对于其他类型的食品检测技术,胶体金免疫层析技术具有操作简便、快速、检测效果好等诸多的优点,这使得其在食品检测领域的应用越来越广泛,不仅仅能够提升检测准确率,还能够有效的提升检测特异性与敏感度。

一、免疫层析类型

按照免疫层析中抗原与抗体结合方式的不同,可将免疫层析分为两类:非竞争性免疫层析和竞争性免疫层析。非竞争性免疫层析即双抗体夹心法。将着色标记物(一般采用胶体金)与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,并将其沉积在结合区上。当样品(尿、血浆、饮料等)加到样品区后,由于毛细管作用,样品迅速浸透结合区,带有标记物的Ab1被溶解,并在上部材料吸水涨力的牵引下随着样品溶液沿膜条向前移动。若样品中存在待测抗原,它就会和带有标记物的Ab1结合形成Ag-Ab1[1]。随后,样品通过固相化有捕获抗体(一般是待测抗原的另一表位特异性抗体Ab2)的检测线(testline)区域时,Ag-Ab1复合物被捕获,形成Ab1-Ag-Ab2复合物。一部分未与Ab1结合的样品继续前移,通过固相化有抗Ab1抗体(Ab3)的质控线(controlline)区域,形成Ab3-Ab1复合物。这种方式通常用于检测带有多个抗原位点的分析,常用于致病细菌、大分子蛋白质等的检测等。竞争性免疫层析:将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。而检测区处固相化的是待测抗原或待测抗原的类似物。若样品中含有待测抗原,则样品中的抗原和带有标记物的Ab1形成Ag-Ab1复合物。随后在通过固相化有待测抗原或其类似物的检测区时,由于竞争抑制,不再发生反应,检测线处不显色;样品继续前移,Ag-Ab1复合物被固相化在质控线处的抗Ab1抗体(Ab2)所结合,形成Ab1-Ag-Ab2复合物,使质控线显色。这种方式适用于检测带有单一抗原表位的小分子抗原,常用于农兽药残留、违禁药物的检测等。

二、胶体金免疫层析分析

胶体金是在还原剂的作用之下,由氯金酸聚合成为特定大小的颗粒,同时在静电的作用之下生成稳定的金颗粒,同时在静电的作用之下生成稳定的胶体溶液,由于这些金颗粒是具备较高的电子密度的,所以其在聚集一定密度之后就会形成粉红色斑点,这些斑点是肉眼可见的,这些即为免疫层析试验的指示物。在实际的开展操作的过程中,若是应用到胶体金免疫层析技术,需要在膜上将特异性的抗体或者是抗原进行固定,借助于毛细作用,促使样品在层析条上游动,以便于其能够与受体之间产生免疫反应,在这整个过程当中,在检测带当中会将免疫复合物予以截留,以此来获取直观的试验结果。可以将该技术应用于病菌、毒素、药物及蛋白质等多种物质的检测当中,与其他检测方式相比,胶体金免疫层析检测技术具有低交叉反应性、反应快、成本低等诸多的优点。

三、胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用

食品安全是关乎民生的重大问题,一旦出现食品安全事件,会造成非常严重的后果,影响到经济效益与社会效益,因此,近年来关于食品检测技术的研究不断深入,因为胶体金免疫层析技术在食品检测当中具有良好的应用效果,开展与胶体金免疫层析技术在食品检测中应用有关的研究具有非常重要的意义。从组成成分来看,食品中含有蛋白质、水分、糖类、维生素和脂肪等物质。其中,大部分都属于有机高分子物质,可以使用胶体金免疫层析技术进行检测。

期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆在检测过程中,一般会进行食品的半定量分析,从而实现对食品成分的快速检测。例如,奶牛分娩后最初几天分泌的乳汁为牛初乳,含有大量非营养性功能组分,保健价值提高。而在牛初乳中,IgG含量与生物活性物质含量呈正相关关系,所以可以使用胶体金进行标准牛 Ig G的标记,然后将其当成竞争抗原。通过将市面上牛乳样品中的IgG和标记的标准牛IgG相比,就可以反映样品质量。下文就主要探究几点胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用:

1、在致病菌检测中的应用

在开展食品检测工作的过程中,一项非常重要的检测内容就是致病菌的检测,这是因为食品中的致病菌含量超标就有可能会导致使用者生病,当前常用的食源性致病菌检测方法还是按照细菌分离、细菌培养、生化鉴定等方法开展检测,这种方法不仅操作繁琐、耗费时间长,而且开展操作过程中操作者的主观因素及环境等因素对于检测结果的影响比较大,这会在一定程度上影响到检测结果准确性及检测效率。将胶体金免疫层析技术应用于致病菌检测中,能够很好的提升检测效率、特异性及灵敏度,举一个简单的例子,将胶体金免疫层析技术应用于大肠杆菌的检测当中,只需要开展两次离心操作就可以借助于胶体金结合垫将标记过程中多余的抗体予以消除,该种检测方法能够明显促进结合垫检验灵敏度及性能的提升。

2、在霉菌毒素检测中的应用

食品当中若是包含有霉菌素等物质,将会导致动物或者是人体产生病理变化,威胁到其健康,将胶体金免疫层析技术应用于食品检测丧钟,能够对食品当中的葡萄球菌肠毒素、赭曲霉毒素、黄曲霉毒素等进行鉴定,从而大大提升检测效果,保证食品安全。举一个简单的例子,在开展黄曲霉毒素B1检测的过程中,借助于胶体金免疫层析试纸法实施检测,可以与高效液相色谱法达到90.5%的相符率。同时,使用该方法能够实现现场快速检测,并且可以用于粮食中的黄曲霉毒素B1的初筛。此外,使用该技术还能鉴定巧克力奶、婴儿奶粉和鲜牛奶等物质中的葡萄球菌肠毒素,毒素最低检出限为10mg/L。

3、在非食品添加成分检测中的应用

在非食品添加成分检测方面,胶体金免疫层析技术也得到运用。例如,在三聚氰胺这种化工物质的检测上,使用胶体免疫层析技术可以对乳制品中的三聚氰胺进行定性和定量检测,而使用的试纸条具有较好的稳定性、重复性和灵敏度。在苏丹红I的检测上,可以使用利用胶体金免疫层析技术制作成的苏丹红I测试纸条,然后使用金标抗原方法将抗体固定在 NC 膜上,就可以对食品中的苏丹红I进行定量检测。

4、在农兽药残留检测中的应用

使用胶体金免疫层析技术,可以对食品中的农药、兽药和其他生物毒素残留进行检测。例如,使用胶体金标记的抗氟喹诺酮类抗体进行胶体金制备,就可以对牛奶中的11种氟喹诺酮类药物残留进行检测。而使用胶体金免疫层析技术将水样品和植物样品的实际检出限相比,也能够完成一些农药物质的检测。相较于其他检测方法,使用该技术不仅不需要使用大型仪器设备,同时还具有简单、快速和方便的特点,所以在食品农兽药检测方面得到了广泛使用。

结束语

随着各项技术的进步与发展,胶体金免疫层析检测技术因为具备检测快速、操作方便、检测效果好等诸多的优点,将其应用于食品检测工作中,不仅能够有效提升检测特异性与灵敏度,还能够促使检测效率与检测准确率的切实提升,随着与胶体金免疫层析检测技术相关研究的进一步深入,为了胶体金免疫检测技术在食品检测中的应用将会越来越广泛,这对于提升食品安全具有非常好的促进作用。

参考文献:

[1]周丽岩,吕宝新,任勃儒.胶体金免疫层析技术在食品安全检测中的应用研究[J].中国调味品,2015,40(2):128-131.

论文作者:张猛

论文发表刊物:《基层建设》2018年第33期

论文发表时间:2018/12/19

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

食品检测中胶体金免疫层析技术的运用论文_张猛
下载Doc文档

猜你喜欢