广西桂林市阳朔县人民医院检验科 广西阳朔 541999
摘要：血清尿酸是诊断和监测高尿酸血症的指标。目前，尿酸检测的常规方法主要是酶法。校准品的制备及互通性仍然是值得关注的问题，校准品在应用于某一测量系统前需要用参考测量程序通过连续无间断的溯源链赋值。由于校准品是制备物，其基质效应可能在未经验证的检测系统中产生校准偏差。此时，校准品就不能直接应用在当前使用的常规方法中，需要通过参考测量程序重新确定、校正和转移量值。因而，以参考测量程序为比对方法，使用覆盖生理和病理浓度的新鲜血清修正校准品赋值是必要的步骤。
关键词：血清尿酸；检验；基质效应；临床分析
探究二十一类样本本身的尿酸层次，评测其对十三类尿酸常规监测体系的基质效应。评测血清同配备物本身的基质效应。结果全部评测样本内五类基质即新鲜或是冰冻类血清本身的样本于全部常规监测体系内都没有发现基质效应。部分校验品于非配备体系内很可能有基质效应而出现校验误差，所以于运用这类校验品以前要通过基质效应评测或是方式证明。
1.材料和方法
1.1血清样本
2019年1月至6月在我院检验科收集40份新鲜人血清样本，尿酸浓度范围为81.8～940.6 μmol/L。新鲜人血清收集后分装，置-80 ℃保存，保存时间不超过1周。
1.2评价样本
21种血清及制备物包括：4种校准品，均为冻干血清校准品，所有校准品均为4 ℃保存；5种室间质量评价样本，EQA1～EQA3为常规化学EQA样本，基质是冻干血清；EQA4和EQA5为正确度验证样本，EQA5为添加纯度标准物质的高值血清；6种质控血清，为低值和高值多项冻干质控血清；3种其他基质材料的制备物，制备物1为猪血清基质，制备物2和3为水基质单项溶液，制备物2溶剂为含甘油水溶液，制备物3溶剂为含2-苯乙醇水溶液.
1.3.比对方法和评价方法
1.3.1比对方法（参考方法）
参考方法为同位素稀释液相色谱串联质谱法。仪器系统包括高效液相色谱仪、API 4000串联三重四极杆质谱仪和Analyst 1.4.2数据处理软件。样本制备使用的主要仪器包括涡旋振荡器及氮气吹干装置。用于配制标准溶液的尿酸标准物质为NIST SRM 913a，认定纯度为99%。有机溶剂乙腈、三氯甲烷均为色谱级。采用IDLC/MS/MS检测血清尿酸作为比对方法，在样本二次净化的过程中，2 mmol/L氨水复溶残渣后混匀静置1 h以上，充分溶解，加入氯仿后轻轻摇晃安瓿瓶，混匀净化，部分仍然显示碱性的样本用同浓度甲酸中和。
1.3.2评价方法（常规检测系统）
选取13种尿酸试剂盒（酶法），在全自动生化分析仪上按照试剂厂家提供的参数设置和测定。
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1.4评价过程
1.4.1样本准备过程
校准品、EQA和RELA冻干血清按照说明书要求加入适量纯水复溶，新鲜血清和溶液制备物检测前从-80 ℃取出，所有样本置于摇床上平衡至室温。
1.4.2评价方法测定
将21种评价样本随机插入40份血清样本中，用13种常规系统分别测定所有样本。重复测定3批，每批每份样本测定1次，每次测定前用配套校准品校准。
1.4.3 ID-LC/MS/MS分析
使用ID-LC/MS/MS定量测定血清尿酸。测定样本包括所有新鲜冰冻人血清和21种评价样本，重复测定3批，每批每份样本测定1次，将新鲜冰冻人血清和评价样本按随机原则穿插测定。
2.统计学方法
采用微软Excel 2007软件进行统计分析。按照国家卫生行业标准进行基质效应评价。将新鲜冰冻血清比对方法测定结果与待评方法结果进行分析，将21种评价血清及制备物的值与预测值比较以计算基质偏差，与可信区间比较以评价基质效应。
3.结果
21种血清及制备物在13种尿酸常规检测方法上的基质效应表现不同。未做添加或其他处理的冻干或新鲜血清在大部分常规检测系统中无基质效应，为了实现预定目标而做处理的样本基质效应比较明显。
4种冻干血清多项校准品表现不同，校准品只在1种常规检测系统中存在基质效应，其它校准品种常规检测系统中无基质效应。
EQA冻干血清在大多数常规检测系统中基质效应明显。EQA1对9种常规检测系统表现为正基质效应。EQA2和3分别在部分常规检测系统中存在负基质效应，平均基质偏差为-6.2%；EQA4为正确度验证新鲜血清，仅在1种常规检测系统中显示负基质效应，基质偏差为-0.9%；EQA5为正确度验证新鲜血清添加纯度物质高值血清，在5种常规检测系统中显示为负基质效应。
6种质控品中有4种在所有常规检测系统中无基质效应。质控品4在3种常规检测系统中存在负基质效应，平均基质偏差为-2.5%；质控品6在10种常规检测系统中有负基质效应，平均基质偏差为-7.7%。
制备物1仅在1种常规检测系统中有正基质效应。制备物3在11种常规检测系统中有正基质效应，平均基质偏差为8.7%。制备物在所有常规检测系统中均无基质效应。
4.讨 论
在临床实验室的质量管理中，正确校准测量系统、选择适当的质控品及EQA样本是质量保证的重要手段。常规方法可以通过与参考测量程序比对验证该方法的正确度。在实施上述过程时，要求传递数据信息的材料在不同的测量系统中不存在不同的基质效应，或者基质效应被量化而得到修正。这些材料包括常用校准品、质控品、EQA样本和参考物质等。它们在常规测量程序中产生的基质效应已被广泛关注。
因此，在保证尿酸检测质量方面，校准对于测量结果的影响较大。在使用校准品时最好了解其适用性或基质影响方面的信息。用于EQA的冻干材料可能在常规测量程序上出现测量偏差，虽然其偏差一般在质量指标允许范围内，但在发放EQA样本前也应评价其基质效应。
参考文献：
[1]张才成；回收试验与基质效应评价[J]；实验与检验医学；2011年03期
[2]吕赛平；基质效应的评价[J]；现代检验医学杂志；2008年05期
[3]刘敏；血清尿酸测定在临床中的应用[J]；临床合理用药杂志；2009年04期
论文作者:唐荔枝
论文发表刊物:《健康世界》2019年19期
论文发表时间:2020/1/10
标签：基质论文; 血清论文; 效应论文; 样本论文; 常规论文; 尿酸论文; 检测系统论文; 《健康世界》2019年19期论文;