祁东县中医医院 湖南祁东 421600
【摘 要】目的 对天麻素和天麻多糖与天麻商品级别的关系评价方法的分析和探讨。方法：将九份不同商品级别的天麻分别使用HPLC 法和苯酚-硫酸法测定其中天麻素和天麻多糖的含量，比较天麻素和天麻多糖与天麻商品级别的关系。结果：不同商品级别的天麻素的含量相接近，一、二、三等天麻中天麻素的量分别为 0.47%、0.41%和 0.45%；而天麻多糖含量不同，一等（31.56%）>二等天麻（24.03%）>三等（19.89%）。结论：天麻素在不同等级的天麻中几乎无差异，而天麻天麻多糖可用于鉴别天麻质量优劣。
【关键词】天麻素；天麻多糖；天麻商品级别
天麻是兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎，为常用的中药材，其功效为平肝熄风、通络止痛等[1]。从大量的前期工作发现[2]，天麻素不能很恰当的评价天麻药材的等级。所以本研究通过9份不同等级样品中天麻素和天麻多糖的含量，分析天麻不同商品等级与天麻多糖和天麻素的含量的关系，以下是详细报道。
1 仪器与试药
1.1 仪器
优普超纯水制造系统-------------------------四川优普超纯科技有限公司Agilent 1200 型HPLC------------------------------------------------------------美国UV-1100 型紫外可见分光光度计-------------------上海天美科学仪器有限公司DKZ 型电热恒温振荡水浴槽-----------------------成都鑫益仪器有限公司SF-TDL-5C 型离心机-------------------------上海菲恰尔分析仪器有限公司BSA224S 型电子天平---------------------------------北京赛多利斯科学仪器有限公司
1.2 药品及试剂[3]
天麻素对照品和D-无水葡萄糖对照品购买于中国食品药品检定研究院；乙腈为色谱纯。
2 方法
2.1 HPLC法测定天麻素的含量
2.1.1 对照品溶液的制备
精密称取天麻素对照品10.05 mg于25 mL量瓶中；加乙腈-水（3∶97）溶解并定容至刻度，摇匀，得到对照品溶液备用。
2.1.2 供试品溶液的制备
精密称取2.0g天麻粉末（过三号筛），用50%乙醇回流提取三次，每次1.0小时，冷却，过滤，浓缩得浸膏。取10mg，用乙腈-水（3∶97）溶解，定容与25 mL量瓶中，摇匀。用0.22μm 微孔滤膜过滤得供试品溶液备用。
2.1.3 色谱条件
色谱柱：Alltima C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈：0.05%磷酸溶液=3∶97；柱温 35 ℃；体积流量 1.0mL/min；检测波长 220 nm；进样量10μL。
2.1.4 线性关系的考察
精密取天麻素对照品溶液 0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL 于10 mL量瓶中，加乙腈-水（3∶97）定容至刻度，摇匀；用0.22 μm 微孔滤膜过滤得不同浓度对照品溶液。分别以Y轴的峰面积对X轴的进样量进行线性回归，得回归方程为Y＝1766.1 X－5.828，（r＝0.9999）。线性范围：0.040～3.22 μg/ml。
2.1.5天麻素的测定
按“2.1.2”方法配成供试品溶液，和在“2.1.3”项色谱条件测定天麻素含量
2.2 苯酚-硫酸法测定天麻多糖的含量
2.2.1 葡萄糖对照品溶液的制备
精密称取 25.12 mgD-无水葡萄糖对照品与25 mL 量瓶中，加蒸馏水溶解，定容至刻度，摇匀，得葡萄糖对照品溶液。分别量取该溶液 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL 于10 mL量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀。再分别取1.0 mL葡萄糖溶液于具塞试管中，加1.0 mL5%苯酚溶液，摇匀；再加入4.5 mL浓硫酸 与恒温水浴进行显色反应10分钟，于冰水浴冷却5分钟，得葡萄糖对照品溶液。
2.2.2 空白溶液的制备
精密取蒸馏水1.0 mL于具塞试管中，按照“2.2.1”项下的方法，制得空白溶液。
2.2.3 葡萄糖对照品溶液的线性范围
以空白溶液为背景，在 488 nm波长分别测定上述葡萄糖对照品溶液的吸光度值。以A（吸光度）对C（浓度）进行线性回归，得回归方程：A＝11.471 C＋0.0142，r＝0.998，线性范围：0～0.080 mg/mL。
2.2.4 供试品溶液的制备
精密称取 0.3 g天麻粉末（过三号筛），利用水提醇沉的方法进行提取得天麻多糖溶液。取1.0 mL天麻多糖溶液于具塞试管中，加入 1.0 mL5%苯酚溶液，摇匀；再加入浓硫酸 4.5mL，摇匀；置恒温水浴中20 分钟；取出，置冰水浴冷却5分钟，得天麻多糖的供试品溶液。
2.2.5 样品测定
对样品进行测定，计算天麻多糖含量＝（供试液中葡萄糖的质量浓度×稀释倍数×0.9）/（1000×样品粉末的取样量）。
3结果
3.1不同等级的天麻的天麻素和多糖的含量的比较
一、二、三等天麻中天麻素的量分别为 0.47%、0.41%和 0.45%；而天麻多糖含量分别为31.56%、24.03%、19.89%。
4讨论
4.1 检测波长的选择[4]
在400-800 nm范围内进行波长扫描，结果在488 nm处有最大吸收，所以在此条件下进行测定。
4.2天麻素和天麻商品级别的关系
不同商品级别的天麻素的含量相接近，一、二、三等天麻中天麻素的量分别为 0.47%、0.41%和 0.45%，因此天麻素的含量不能作为天麻商品级别的判断标准。
4.3天麻多糖和天麻商品级别的关系
不同商品级别的天麻多糖含量不同，一等（31.56%）>二等天麻（24.03%）>三等（19.89%），所以天麻多糖可作为天麻商品级别的判断标准。
综上所述，天麻素与天麻商品级别无关，而作为鉴别天麻质量优劣的指标可选用天麻多糖。
参考文献：
[1] 国家药典委员会．中华人民共和国药典：一部［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，2010：95-96.
[2] 王亚威，李志峰，何明珍，等.天麻化学成分研究[J].中草药，2013，44（21）：2974-2976.
[3] 肖永庆，李丽，游小琳.天麻有效部位化学成分研究（I）[J].中国中药杂志，2012，27（1）：35-36.
[4] 雷有成，李建蕊，肖佳佳，等.天麻商品等级与天麻素和天麻多糖的相关性研究[J].中草药，2015，46（3）：418-423.
论文作者:匡勇
论文发表刊物:《中国蒙医药》2016年3月第3期
论文发表时间:2016/8/12
标签：天麻论文; 多糖论文; 溶液论文; 含量论文; 商品论文; 葡萄糖论文; 级别论文; 《中国蒙医药》2016年3月第3期论文;