翟宝进[1]2004年在《超声波逆转人肿瘤多药耐药的体内实验研究》文中认为研究背景肿瘤多药耐药现象是肿瘤化学治疗的主要障碍。P-gp的过表达是其主要机制之一。另外，多药耐药相关蛋白（MRP）和肺耐药蛋白（LRP）也是与多药耐药形成相关的质膜蛋白。MRP和P-gp同属于ABC结合盒超家族转运蛋白，依靠ATPase水解供能将许多结构和功能不同的化合物排出细胞而产生多药耐药。与凋亡和抗凋亡有关的基因和蛋白表达的改变，是产生肿瘤多药耐药的另一主要机制。目前, 降低或逆转肿瘤多药耐药的方法和策略很多，由于其毒、副作用和缺乏组织特异性，使其应用受到很大限制。我们的前期研究发现超声波在体外能降低耐药肿瘤细胞质膜上耐药蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达, 诱导HepG2/ADM细胞株凋亡，逆转肿瘤细胞多药耐药。然而，体内肿瘤的多药耐药受到多种因素的影响，超声波能否在体内逆转肿瘤的多药耐药目前尚不十分清楚。目的⑴ 建立裸鼠HepG2/ADM移植瘤模型及生物学特性评价。⑵ 探讨超声波对裸鼠移植瘤生物学特性的影响和逆转裸鼠多药耐药移植瘤的效应。⑶ 研究超声波对多药耐药蛋白及其基因表达和Bcl-2和Bax蛋白及其基因表达的影响, 细胞膜上ATPase活性的变化, 探讨超声波逆转肿瘤多药耐药的机制。⑷ 探讨超声波逆转多药耐药肿瘤的安全性, 有效性和可行性。方法⑴ 20只裸鼠建立阿霉素耐药株HepG2/ADM动物模型，它们被随机分成两组：HepG2组：10只裸鼠接受皮下注射5×106/ml阿霉素敏感的HepG2细胞；HepG2/ADM组：另外10只皮下注射同样数量的HepG2阿霉素耐药株。观察两组
张战民[2]2006年在《低频率超声治疗实体肿瘤的临床研究及低频率超声和敏药碱逆转肿瘤多药耐药的体外研究》文中研究指明低水平超声对恶性肿瘤的生物学效应的研究和应用仍处于研究阶段。一系列的研究显示恶性肿瘤细胞对低强度超声反应不同于正常细胞,因为肿瘤细胞更易被杀死。低强度超声可以抑制细胞的增殖和克隆形成,改善抗癌药物的作用,经过间接机制灭活肿瘤细胞。动物实验发现经低频超声辐射后的微泡剂能够引起肿瘤区域内的血管血栓形成及其周边的肿瘤组织坏死,甚至出血性坏死。这些发现显示低强度超声用于肿瘤的治疗有很大的潜力。由此,我们开展了以下工作:1、观察维生素C注射液+5%碳酸氢钠+706代血浆混合后产生的CO2微气泡的生物动力学特征。2、观察了低水平超声联合CO2微泡剂治疗晚期实体瘤的近期疗效和不良反应。3、用MTT法,免疫组化,PCR和流式细胞仪研究了低频率超声空化效应对多药耐药细胞株K562/ADM和MCF-7/ADM细胞耐药性的逆转作用。4、用MTT法,PCR和流式细胞仪研究了敏药碱对多药耐药细胞株K562/ADM和MCF-7/ADM细胞耐药性的逆转作用。结果证实:1、维生素C+碳酸氢钠+706代血浆混合后产生CO2微气泡直径大小与红细胞接近,稳定性较好,对人体安全无害,可以通过肺循环到达肝内静脉,增强了超声空化治疗肿瘤的作用。2、低频率超声空化治疗在临床治疗难治性实体瘤方面的疗效不低于全身化疗,与化疗联合可以提高疗效。3、单纯超声空化治疗在改善病人生活质量方面优于全身化疗,对于那些不能耐受全身化疗的患者,建议行低频超声空化治疗。4、超声空化效应毁损肿瘤微血管,减少肿瘤血液供应是其治疗肿瘤的主要机制。5、超声血管造影在监测肿瘤血管方面具有明显优势,值得临床应用和推广。6、低水平超声体外具有逆转MDR的活性,其逆转机制考虑为通过空化效应增加细胞膜的通透性,增加肿瘤细胞内抗肿瘤药物的浓度,促进肿瘤细胞凋亡;而并不是抑制MDR1基因和蛋白的表达。7、敏药碱可部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性,其逆转机制可能与抑制P-gp功能有关。
邵泽勇[3]2004年在《超声波逆转肿瘤细胞多药耐药的体外实验研究》文中研究表明肿瘤细胞多药耐药(multidrug resistance, MDR)是导致肿瘤化疗失败的主要原因, 有资料表明，90%以上肿瘤患者的死因与MDR有关, 因此如何逆转MDR是一个亟待解决的问题。理想的逆转措施应用具备以下特点：高效、无毒、能特异性地作用于肿瘤组织而对正常组织无害。目前常用的逆转剂与此标准尚有一定差距。如化学逆转剂， 虽体外试验显示其具有良好的逆转效果, 但较强的毒副作用限制了它的临床应用；基因治疗仅适用于机制较为单一的MDR，而多数MDR是由多种机制共同参与的。超声波是一种高频振荡的机械波，因其频率高、波长短而具有如下特点：（1）方向性好；（2）可聚焦；（3）有一定的组织穿透性；（4）具有广泛的生物学效应；（5）作用方式及剂量可精确调控，因而是逆转肿瘤细胞MDR的理想手段。虽已有文献报道低强超声对肿瘤细胞MDR的逆转，但其资料多来自单一的超声参数（频率、声强、脉冲、照射时间固定），且不同研究者选用的超声参数差别很大。为此，我们系统地研究了超声波逆转效应对超声参数的依赖性，从中筛选出最佳参数组合，并将这种最佳组合用于逆转MDR，同时初步探讨其作用机制。
林久茂[4]2016年在《白花蛇舌草逆转大肠癌多药耐药的作用及其机制研究》文中研究表明大肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,据报道每年全球新增发病例数高达120多万,每年逾60万人死于大肠癌。近年来我国大肠癌的发病率和死亡率逐年递增,且有年轻化趋势,严重威胁患者的生命和健康。虽然手术切除是目前治疗大肠癌的首选方式,但对于术后复发及失去手术机会或转移性大肠癌患者,化疗仍是其主要治疗手段。而大肠癌多药耐药(MDR)的产生是目前临床大肠癌化疗失败的主要原因之一,进而导致肿瘤的复发、转移。虽然随着各学科的飞速发展,为逆转耐药带来了新的思路；但无论是传统的化学逆转剂还是基因逆转、免疫逆转等新策略,或因为机制单一、毒副作用大、或因为使用难度高等原因,限制了临床的使用。因此,寻求安全、有效的耐药逆转剂以提高大肠癌对化疗的敏感性和逆转其MDR,成为临床医生和科研工作者共同关注的目标,并对提高临床疗效和改善患者的生活质量具有重要的科学价值和现实意义。肿瘤MDR是指化学治疗过程中肿瘤细胞对某一化疗药物产生耐药性的同时,对其它作用机制不同、结构不同的药物也产生耐药性的现象。MDR产生的机制是一个复杂的过程,是多基因、多途径共同参与的结果,多药耐药的产生取决于肿瘤细胞内药物浓度、药物作用靶点,以及靶点和药物间相互作用等；其机制包括药物外排增加、损伤修复增强、细胞凋亡抵抗、相关信号通路调控异常以及miRNA表观遗传学调控异常等。因此,围绕这些研究能够较系统地阐明药物逆转大肠癌MDR的作用及其分子机制。前期研究表明白花蛇舌草(HDW)治疗大肠癌疗效明确,可诱导大肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖和肿瘤血管新生及逆转肿瘤耐药的作用,但其逆转大肠癌MDR的作用研究尚不系统,且其具体作用机制也未阐明。因此,研究白花蛇舌草逆转大肠癌MDR的作用及其作用机制,将进一步为该药用于临床治疗大肠癌提供合理、准确的理论依据。第一部分 白花蛇舌草提取物的制备目的：制备质量稳定、可靠的白花蛇舌草提取物。方法：采用乙醇回流提取的方法制备白花蛇舌草乙醇提取物(EEHDW),分别以芦丁和没食子酸作为标准检测EEHDW的黄酮类和酚类化合物含量；采用HPLC分析法检测EEHDW的指纹图谱；采用酸度计检测EEHDW的pH值。结果：乙醇水溶液可以将白花蛇舌草中总黄酮及总酚成分有效的提取出来；EEHDW的总黄酮含量为71.534 mg/g、RSD为1.146%,总酚含量为111.272 mg/g、RSD为0.683%,建立了HPLC指纹图谱,其pH值为7.0,且该方法精密度,稳定性,重复性良好。结论：本研究可用于白花蛇舌草提取物的质量控制,并获得了质量稳定、可控、标准的EEHDW,可为后续的细胞实验和动物实验研究提供药物保障。第二部分 白花蛇舌草对大肠癌细胞耐药的逆转作用及其机制研究目的：探讨白花蛇舌草乙醇提取物(EEHDW)对大肠癌HCT-8/5-FU细胞MDR的逆转作用及其对HCT-8/5-FU细胞药物外排、细胞增殖凋亡、相关信号通路活化和miRNAs表达的影响。方法：采用MTT法检测细胞活力验证大肠癌HCT-8/5-FU细胞的多药耐药性及EEHDW的逆转作用；分别采用HPLC分析、倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪(FCM)检测5-FU、阿霉素(ADM)和罗丹明(Rh123)在细胞内的蓄积探讨EEHDW对HCT-8/5-FU细胞药物外排功能的影响；采用MTT检测细胞活力、显微镜观察细胞形态、集落形成检测细胞存活、FCM检测细胞周期等研究EEHDW对HCT-8/5-FU细胞增殖的影响；采用DAPI染色、AnnexinV/PI染色FCM分析研究EEHDW对HCT-8/5-FU细胞凋亡的影响；采用Transwell和细胞粘附实验观察EEHDW对HCT-8/5-FU细胞迁移、侵袭和粘附的影响;采用RT-PCR和Western Blot检测EEHDW对HCT-8/5-FU细胞药物外排相关因子(ABCC1/MRP1、ABCB1/P-gp、ABCG2/BCRP)、细胞增殖调控因子(Cyclin D1)、CDK4、p21)、细胞凋亡调控因子(Bcl-2、Bax)的mRNA和蛋白表达的影响；采用Western Blot检测EEHDW对HCT-8/5-FU细胞ERK、JNK、p38、PI3K/AKT信号通路活化的影响；采用miRNA表达谱芯片检测分析和QPCR验证检测EEHDW对HCT-8/5-FU细胞miRNAs表达的影响。结果：HCT-8/5-FU细胞株具有多药耐药性,可作为大肠癌MDR的细胞模型;EEHDW可增加HCT-8/5-FU细胞对5-FU的敏感性：EEHDW能增加5-FU、ADM、Rh123的细胞内蓄积,抑制细胞的药物外排功能；EEHDW可抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,抑制细胞的迁移、侵袭和粘附；EEHDW能显着下调细胞中ABCC1/MRP1、 ABCB1/P-gp、 ABCG2/BCRP、Cyclin D1、CDK4、Bcl-2的mRNA和蛋白表达,上调p21、Bax的mRNA和蛋白表达,并具有一定的剂量依赖作用；EEHDW对HCT-8/5-FU细胞ERK1/2、JNK、p38、PI3K/Akt等信号转导通路活化有显着的抑制作用；EEHDW对HCT-8/5-FU细胞的miRNA表达具有广泛的调控作用,能上调HCT-8/5-FU细胞中miR-92b、miR-1247、miR-4800-5p、miR-1224、miR-1260、miR-4669、miR-4298的表达,抑制miR-582-5p、miR-4454、miR-222、miR-483-5p、miR-4443的表达。结论：大肠癌HCT-8/5-FU细胞具有多药耐药性；EEHDW具有逆转大肠癌MDR的作用；通过调控多药耐药相关因子和细胞增殖凋亡相关因子表达、多条信号转导通路活化和多个miRNAs表达是EEHDW逆转大肠癌MDR的重要作用机制。第叁部分 白花蛇舌草对裸鼠大肠癌耐药移植瘤生长的抑制作用及其机制研究目的：探讨白花蛇舌草乙醇提取物(EEHDW)在体情况下对大肠癌耐药移植瘤生长的抑制作用及其分子作用机制。方法：采用雄性BALB/c裸鼠接种大肠癌HCT-8/5-FU细胞及HCT-8细胞构建皮下移植瘤动物模型,通过5-FU干预给药验证大肠癌HCT-8/5-FU移植瘤的耐药性；大肠癌HCT-8/5-FU移植瘤耐药模型裸鼠分为对照组(生理盐水)、EEHDW、5-FU及EEHDW联合5-FU干预等4组,分别给予相应药物干预处理6周,通过检测移植瘤体积和重量研究EEHDW对大肠癌耐药移植瘤生长的影响；通过PCNA和TUNEL检测研究EEHDW对HCT-8/5-FU移植瘤细胞增殖和凋亡的影响；采用RT-PCR和IHC检测EEHDW对移植瘤组织药物外排相关因子(ABCC1/MRP1、ABCB1/P-gp、ABCG2/BCRP)、细胞增殖周期调控因子(Cyclin D1、CDK4、p21)、细胞凋亡调控因子(Bcl-2、Bax)的mRNA和蛋白表达的影响；采用Western Blot检测EEHDW对移植瘤细胞ERK、JNK、p38、PI3K/AKT信号通路活化的影响；采用QPCR检测EEHDW对移植瘤细胞miRNAs表达的影响。结果：构建的裸鼠大肠癌HCT-8/5-FU细胞移植瘤对5-FU具有耐药性,可作为大肠癌耐药研究的动物模型；EEHDW及联合组能显着抑制移植瘤的生长,且联合治疗疗效更佳；EEHDW及联合组可抑制大肠癌耐药移植瘤细胞的增殖和诱导细胞凋亡；EEHDW及联合组可显着抑制HCT-8/5-FU移植瘤细胞中ABCC1/MRP1、ABCB1/P-gp、ABCG2/BCRP、Bcl-2、Cyclin D1、CDK4的mRNA和蛋白表达,促进p21、Bax的mRNA和蛋白表达；EEHDW及联合组能抑制HCT-8/5-FU移植瘤细胞ERKl/2、JNK、p38和PI3K/Akt等信号通路的活化；EEHDW及联合组可上调HCT-8/5-FU移植瘤细胞miR-92b、miR-1247、miR-4800-5p、miR-1224、miR-1260、miR-4669、miR-4298的表达,下调miR-582-5p、miR-4454、miR-222、miR-483-5p、miR-4443的表达。结论：成功构建了大肠癌耐药移植瘤动物模型；EEHDW在体具有抑制大肠癌耐药移植瘤生长的作用,可增加移植瘤细胞对5-FU的敏感性；EEHDW在体对大肠癌耐药移植瘤耐药相关因子和细胞增殖凋亡相关因子表达、相关信号转导通路活化和miRNAs表达有显着调控作用。
陈杰[5]2012年在《莪术油含药血清逆转胃癌SGC7901/CDDP多药耐药的实验研究》文中进行了进一步梳理目的：研究莪术油含药血清对胃癌耐药细胞株SGC7901/CDDP的耐药逆转作用,并初步探索其逆转机制,为进一步将莪术开发为胃癌多药耐药逆转剂提供实验依据。方法：1.血清药理法制备莪术油含药血清。2.MTT法检测莪术油含药血清对胃癌SGC7901/CDDP细胞的生长抑制作用：以酶标仪所测490nm处光密度值(OD值)、细胞生长抑制率来表示莪术油对细胞的生长抑制作用。3.MTT法检测莪术油含药血清作用下化疗药对胃癌SGC7901/CDDP细胞生长抑制作用的变化,计算莪术油含药血清的耐药逆转倍数：以酶标仪所测490nm处光密度值(OD值)求出生长抑制率；以化疗药浓度为横轴,生长抑制率为纵轴,求出浓度与抑制率之间的直线回归方程,计算出半数抑制浓度(IC50),以阴性对照组IC50/实验组IC50求出逆转倍数。4. RT-PCR法检测莪术油含药血清对胃癌SGC7901/CDDP细胞多药耐药基因mdrl表达的影响：以基因扩增产物琼脂糖凝胶电泳的光密度半定量值来表示耐药基因表达的高低。5. Western bLot法检测莪术油含药血清对胃癌SGC7901/CDDP细胞内多药耐药蛋白P-gp表达的影响：以蛋白印迹在胶片上的曝光程度来表示耐药蛋白表达的高低。结果：莪术油20%高剂量含药血清、10%高剂量含药血清、20%中剂量含药血清、10%中剂量含药血清均可逆转胃癌SGC7901/CDDP细胞的耐药性(P<0.05),逆转倍数分别为6.06、4.27、1.45、1.3；未显示莪术油含药血清能下调胃癌SGC7901/CDDP细胞多药耐药基因mdrl及多药耐药蛋白P-gp的表达。结论：莪术油含药血清可部分逆转胃癌耐药细胞株SGC7901/CDDP的耐药性,高剂量组莪术油含药血清的逆转效果明显高于中、低剂量组,说明制备动物含药血清时,加大动物给药剂量可以增加逆转效果,但同时发生消化道出血等不良反应,最佳给药剂量还有待进一步探讨。莪术油含药血清对多药耐药基因mdrl及其编码的多药耐药蛋白P-gp的表达均无明显作用,提示了除下调多药耐药基因mdr1及其编码的多药耐药蛋白P-gp的过高表达这一典型的肿瘤多药耐药机制外,其逆转胃癌多药耐药的机制可能存在其他途径。
唐晓勇[6]2012年在《浙贝母碱逆转肺癌A549/DDP细胞株多药耐药及其机理研究》文中研究指明目的：1.探讨“痰邪致病”与肺癌多药耐药相关性的中医理论。2.探讨肺癌中医证候与化疗疗效的相关性。3.探讨浙贝母碱逆转A549/DDP肺癌细胞株耐药的作用及可能的机理。方法：1.梳理中医学关于肺癌的古今文献资料，采用“取象比类”的方法将“痰邪致病”与肺癌耐药特点进行类比。2.回顾性分析282例肺癌患者中医证候类型与化疗疗效的相关性，作为本论文的临床工作基础研究。3.以理论和临床研究为基础，展开实验研究，以A549/DDP耐药肺癌细胞株为研究对象，以川芎嗪做对照药物，采用MTT法检测细胞耐药倍数、浙贝母碱的最佳逆转耐药浓度及逆转耐药倍数；用流式细胞仪检测耐药细胞凋亡率，细胞免疫荧光法检测L-RP蛋白表达，RT-PCR检测细胞ERCC1-mRNA表达。结果：1.通过文献整理及“取象比类”的方法，论文提出“痰邪是肺癌多药耐药的重要病因，化痰散结法是治疗肺癌多药耐药的基本治法”的假说。2.临床研究显示：正气亏虚证型组较气虚痰湿型组、气血瘀滞型组和阴虚热毒型组肺癌对化疗有效率高（64.1%），治疗期间患者更少的出现疾病进展（19.6%）。正气亏虚型与气虚痰湿型两组相比，气虚痰湿型肺癌化疗有效率低，更多的患者出现进展。中位肿瘤进展时间和总生存时间单纯正气亏虚证型组优于其他各组。3.实验研究显示：A549/DDP耐药倍数为13.08倍，细胞高度耐药。空白对照组、DDP组、川芎嗪实验组、浙贝母碱实验组各组随DDP浓度的增加，药物对A549/DDP细胞的抑制率不断增加。川芎嗪实验组逆转倍数3.62，浙贝母碱实验组逆转倍数3.73。流式细胞仪检测凋亡发生率各组分别为2.56±0.44、13.5±1.42、33.82±4.56、38.16±2.25，川芎嗪实验组和浙贝母碱实验组与空白对照组和DDP组比较差异有统计学意义（p <0.05）。细胞免疫荧光测定的结果显示，川芎嗪实验组和浙贝母碱实验组较空白对照组和DDP组的L-RP表达明显降低（p <0.05）。各组ERCC1mRNA表达分别为0.62±0.04、0.56±0.03、0.36±0.07、0.32±0.08，川芎嗪实验组和浙贝母碱实验组与空白对照组和DDP组比较显着降低了ERCC1mRNA的表达，差异有统计学意义（p <0.05）。结论：1.本论文理论研究部分提出假说，通过文献整理及“取象比类”为假说提供了理论依据。理论研究的内容丰富了中医学对肺癌多药耐药的认识。2.临床研究提示正气亏虚型是晚期肺癌中预后较好的分型，气虚痰湿型、气血瘀滞型和阴虚热毒型是晚期肺癌中预后较差的分型，推测肺癌的发生、发展可能遵从先出现正气亏虚，而后合并出现痰阻、瘀血、热毒致虚实夹杂，最后出现邪盛正衰的病机演变规律，而合并出现痰浊、瘀血、热毒等实邪时化疗有效率降低、生存期缩短、疾病进展迅速可能与对化疗药物的多药耐药有关。这为假说提供了临床方面的证据支持。3.实验研究提示浙贝母碱可逆转肺癌A549/DDP细胞株的多药耐药，其机理与促进细胞凋亡、下调L-RP蛋白表达、抑制ERCC1mRNA表达，从而降低DNA的修复能力有关。这为假说提供了实验方面的证据支持。
陈月江[7]2007年在《蛇床子素对耐阿霉素人乳腺癌细胞多药耐药性的逆转》文中认为目的:通过观察蛇床子素(Osthol , Ost)对人乳腺癌细胞株(MCF-7)及其阿霉素耐药株(MCF-7/ADR)生长的抑制作用,考察Ost的抑瘤活性;通过观察Ost对阿霉素(Adriamycin,ADR)作用于MCF-7细胞毒性的影响,研究Ost对MCF-7细胞的体外抑瘤增效作用;通过观察Ost对阿霉素作用于MCF-7/ADR细胞的毒性及在肿瘤细胞内积累的影响、探讨Ost对人乳腺癌细胞多药耐药(Multidrug resistance , MDR)的逆转作用及其机制。方法:1、以MCF-7、MCF-7/ADR细胞为研究对象,采用MTT比色法测定Ost对MCF-7、MCF-7/ADR细胞生长抑制率、对ADR细胞毒性的影响及对MDR的逆转作用。2、建立ADR高效液相紫外检测分析方法,检测细胞内ADR浓度,观察Ost对肿瘤细胞内ADR积累的影响,探讨Ost对人乳腺癌细胞MDR的逆转机制。结果:1、Ost对MCF-7及MCF-7/ADR细胞均有增殖抑制作用,IC50值分别为58.14±2.33和59.20±4.54μmo l·L~(-1),两者间差异无统计学意义(P>0.05);Ost在5-20μmo l·L~(-1)浓度范围内对MCF-7及MCF-7/ADR细胞生长抑制率小于10%。2、在5~(-1)5μmol·L~(-1)浓度范围内,Ost可以不同程度地增强ADR对MCF-7细胞杀伤作用,且其杀伤作用随浓度的增加而增强。3、在5~(-1)5μmol·L~(-1)浓度范围内,5、10、15μmol·L~(-1)Ost与ADR联合用药均可使ADR对MCF-7/ADR的IC50值明显下降,与单用ADR组比较差异有显着性(P<0.01),逆转倍数分别为8.79、11.85、18.17倍;逆转作用随浓度的增加而增强。4、5~(-1)5μmol·L~(-1)浓度范围内的Ost可显着性地增加MCF-7/ADR细胞内ADR的积累,与单用ADR组比较差异有显着性(P<0.01)。结论:Ost对人乳腺癌细胞株MCF-7及其阿霉素耐药株MCF-7/ADR细胞均有增殖抑制作用,无明显细胞毒性的Ost对MCF-7细胞还具有体外抑瘤增效作用并且能够明显增加MCF-7/ADR细胞内ADR的浓度,逆转MCF-7/ADR细胞的阿霉素耐药性。
杨臻[8]2016年在《浙贝黄芩汤对急性髓系白血病化疗敏感性的影响》文中提出目的1.观察比较浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对急性髓系白血病HL60、HL60/ADR细胞增殖及化疗药物敏感性的影响。2.探讨野生型p53诱导的磷酸酶1(Wipl)在难治性急性髓系白血病患者外周血中性粒细胞及单个核细胞中的表达情况。3.观察浙贝黄芩汤醇提取物对急性髓系白血病HL60、HL60/ADR细胞凋亡的影响及其与Wipl表达的相关性。4.探讨浙贝黄芩汤醇提取物增加急性髓系白血病HL60、HL60/ADR细胞对阿霉素敏感性与Wipl表达的相关性。方法1.采用MTS法检测比较浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对急性髓系白血病敏感细胞HL60、耐药细胞HL60/ADR的增殖抑制作用,计算各提取物的IC5。值。测定非毒剂量( 徐珊[9]2006年在《马鞭草抗绒癌有效部位（EPVO）体外逆转人绒毛膜癌多药耐药性及相关机制研究》文中研究指明本课题系统观察了马鞭草有效部位(effective part of Verbenaofficinalis L., EPVO)对人绒毛膜癌细胞的抑制作用及促凋亡作用；构建JAR／VP16耐药细胞株，探讨EPVO的耐药逆转作用以及逆转机制，将中药抗肿瘤作用及相关机制研究深入到分子水平。研究共分4个部分： 一、马鞭草药材质量控制及其抗人绒毛膜癌有效部位的提取与筛选 采用反相高效液相色谱法，以齐墩果酸和熊果酸含量为检测指标，测定马鞭草药材中上述两种物质的含量，建立马鞭草药材质量控制方法。马鞭草醇提取液采用系统溶剂法依次萃取，得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等4个不同部位，应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和氚-胸腺嘧啶脱氧核苷(~3H-TdR)掺入法，筛选出氯仿部位对人绒毛膜癌JAR细胞具有显着增殖抑制作用，称其为马鞭草有效部位(EPVO)。 二、EPVO对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及凋亡促进作用 应用MTT法和~3H-TdR掺入法测得EPVO对JAR细胞有显着增殖抑制作用，并呈药物浓度和作用时间依赖。流式细胞术分析表明药物作用后使细胞周期阻滞于S期并出现典型凋亡峰；DNA琼脂糖凝胶电泳可见“阶梯状DNA条带”；荧光染色观察药物作用后凋亡细胞百分比随药物浓度增加而升高；电镜观察可见染色质浓缩边集及凋亡 孙秀玲, 盖晓东[10]2008年在《肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展》文中提出多药耐药(multidrug resistance,MDR)现象指肿瘤细胞如果对一种化疗药物产生耐药性,那么对其它结构和功能不同的化疗药物也产生交叉耐受的现象。肿瘤细胞的MDR现象是肿瘤治疗中最常见、棘 [1]. 超声波逆转人肿瘤多药耐药的体内实验研究[D]. 翟宝进. 重庆医科大学. 2004 [2]. 低频率超声治疗实体肿瘤的临床研究及低频率超声和敏药碱逆转肿瘤多药耐药的体外研究[D]. 张战民. 吉林大学. 2006 [3]. 超声波逆转肿瘤细胞多药耐药的体外实验研究[D]. 邵泽勇. 重庆医科大学. 2004 [4]. 白花蛇舌草逆转大肠癌多药耐药的作用及其机制研究[D]. 林久茂. 福建中医药大学. 2016 [5]. 莪术油含药血清逆转胃癌SGC7901/CDDP多药耐药的实验研究[D]. 陈杰. 贵阳中医学院. 2012 [6]. 浙贝母碱逆转肺癌A549/DDP细胞株多药耐药及其机理研究[D]. 唐晓勇. 山东中医药大学. 2012 [7]. 蛇床子素对耐阿霉素人乳腺癌细胞多药耐药性的逆转[D]. 陈月江. 南昌大学. 2007 [8]. 浙贝黄芩汤对急性髓系白血病化疗敏感性的影响[D]. 杨臻. 北京中医药大学. 2016 [9]. 马鞭草抗绒癌有效部位（EPVO）体外逆转人绒毛膜癌多药耐药性及相关机制研究[D]. 徐珊. 南京医科大学. 2006 [10]. 肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展[J]. 孙秀玲, 盖晓东. 广州医学院学报. 2008参考文献：