陈晓婷
苏州市吴江区第一人民医院 预防保健科 215200
中华人民共和国卫生部于2003年5月1日颁布了《产前诊断技术管理办法》，该管理办法明确指出合理产前筛查是预防出生缺陷的第二道防线，能够预防先天缺陷儿的出生。唐氏综合征是1866年由英国外科医生John Langdon Down首先发现并报道。1959年法国儿科医生Jerome Lejeune发现该综合征主要由21号染色体三体所导致，故又称21-三体综合征。其是人类最常见、最重要的先天性遗传病之―，发病率均为1：600~1：800，主要特征为先天智力障碍，表现为特殊面容，常伴有先天性畸形。
1 唐氏综合征的危害性
1.1 唐氏综合征的经济负担
唐氏综合征患者不仅本人终身痛苦，而且还给家庭及社会带来巨大的经济负担。王斌[1]等对河北省、陕西省和上海市三地唐氏综合征患者的直接照料人进行了入户卫生服务调查，发现从社会及家庭的角度来看2003年我国每1例新发唐氏综合征病例的经济负担是45万元，由此推断我国1年所有新发病例的经济负担达81亿元。令人遗憾的是到目前为止此病尚无有效的治疗方法，而惟一有效的防治措施就是进行DS的产前筛查，尽早发现、避免此类患儿的出生。
1.2 唐氏综合征患者平均期望寿命和各年龄组生存率
目前国内尚无关于唐氏综合征患者生存寿命的研究，但是Richard等基于在美国加利福尼亚州监测数据的研究结果，并用人类发展指数（HD）进行调整模拟得到我国2003年唐氏综合征患者的期望寿命和各年龄段生存率（见图1）。
图1 我国和美国唐氏综合征患者期望寿命
2 唐氏综合征的产前筛查及诊断
唐氏综合征产前筛查主要是在孕早期（7周~12周）和孕中期（15周~20周）通过抽取孕妇血清，检测母体血清中甲型胎儿蛋白、绒毛膜促性腺激素和游离雌三醇的浓度，并结合孕妇的预产期、年龄、体重和采血时的孕周等初步筛查计算生出先天缺陷胎儿的危险系数。检出率在70%左右，假阳性率约5%。
2.1 孕妇绒毛、羊水、脐血等介入性产前诊断
部分DS患者得到产前诊断，降低了患儿的出生率但侵入性手术操作给孕妇造成了巨大的伤害，并可能引起流产。因此，分离孕妇外周血中胎儿有核红细胞、孕妇血浆中胎儿游离DNA、宫颈管内滋养细胞并且运用荧光定量PCR，荧光原位杂交技术（FISH），引物原位标记技术（PRINS），微阵列-比较基因组杂交（array CGH）。光谱核型分析（SKY）等分子生物学技术成功地开辟了唐氏综合征产前诊断的新途径。
2.1.1 聚合酶链反应（PCR）
根据碱基互补配对原则，通过合成的引物与特定模板特异性地结合，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行。扩增出大量的特异性DNA序列，包括普通PCR和荧光定量PCR（QF-PCR）。Lee[2]等将4个位于21号染色体上的STR作为遗传标记，并对221例新鲜穿刺的羊水细胞进行唐氏综合征的诊断，结果发现其敏感性、特异性和有效诊断率分别为95.5%，99%和99.4%。
2.1.2 荧光原位杂交技术（FISH）
用包括荧光酶、地高辛、生物素等荧光物质，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体这种技术在保持细胞形态完整性的条件下，可以检测出细胞内特定的核酸序列，不必对细胞进行培养和对染色体的核型进行分析，一般情况下可以在36h内出结果但是由于受到特异性探针的制约，1次只能检测出少量几个的染色体异常，不适合临床大规模开展。
2.1.3 引物原位标记技术（PRINS）
染色体上引物原位标记技术（PRINS）是Zufferdio[3]等建立的DNA分析方法，在染色体水平上利用寡核苷酸作为引物，在间期细胞或染色体上原位合成DNA的同时惨入生物素标记的核苷酸，利用抗生物素连接信号将特异的荧光染色体信号显示在相应的DNA扩增部位，反映出该部位的特殊改变，进而诊断染色体的异常与传统的FISH技术相比较，它具有简便、快速、经济的特点。
2.1.4 微阵列-比较基因组杂交（array CGH）
也称为分子核型分析，将相同性别健康人的DNA或健康男性。女性混合DNA作为一个参考的DNA，使Cy5与Cy3或者Cy3与Cy5的对待测的DNA和参照的DNA进行标记，如果前后两者的荧光强度比为1，则可以理解为两者所含的DNA量是一致的；若比值不为1，则认为两者的DNA量存在差别，DNA有缺失或者扩增。Lapaire等[4]利用微阵列-比较基因组杂交对9份新鲜未进行细胞培养的羊水上清液进行研究，发现用这种方法可以成功检测出3倍体外几乎所有胎儿的染色体非整数倍性异常。
2.1.5 光谱核型分析（SKY）
光谱核型分析是一种波谱影像分析方法，运用光谱干涉仪及傅立叶变换的方式，将一副图像中的每一像素进行光谱分析后再重新显示，这种技术加强了对多种荧光分析的辨别能力，只需通过1次检测就可以让24种染色体以不同的颜色同时显示出来。在分析标记染色体时，根据其显示的颜色，从机器上可以直观地判断其来源，它能够辨别出传统遗传学技术和仅仅单独使用FISH技术所不能发现的染色体异常中的细微变化，可以清楚地观察染色体重排、易位、插入及许多复杂的染色体结构改变，光谱核型分析使细胞遗传学的分析诊断更加的精确和稳定[5]。
3 结论
控制人口数量，提高人口素质是我国长期的基本国策，产前筛查是预防先天性疾病的有效措施，可以直接降低DS的发生率，在减轻家庭和社会的经济负担等方面具有重大意义。但是，目前国内产前筛查这项技术还未得到普及，只有在三甲及较大的医院才有开展。因此加强从业人员的专业技术规范化培训，建立完善的产前检查机构，对于降低唐氏综合征婴儿的出生率具有十分重大的意义。
参考文献：
[1]王斌，陈英耀，石琦等.我国唐氏综合征的疾病经济负担研究[J]. 中国卫生经济，2006（03）：24-26.
[2]Lee M H，Ryu H M，Kim D Jet al.Rapid prenatal diagnosis of Down Syndrome using quantitative fluorescent PCR in uncultured amniocytes[J]. J Korean Med Sci，2004，19（3）：341-4.
[3]Zuffardi O，Bonaglia M，Ciccone Ret al.Inverted duplications deletions：Underdiagnosed rearrangements??[J]. Clin Genet，2009，75（6）：505-13.
[4]Lapaire O，Lu X Y，Johnson K Let al.Array-CGH analysis of cell-free fetal DNA in 10 mL of amniotic fluid supernatant[J]. Prenat Diagn，2007，27（7）：616-21.
[5]周丽英，钱建新，郭晓葵等.光谱核型分析技术——一种新的染色体核型分析方法[J]. 辐射防护，2006（06）：371-374+380.
论文作者:陈晓婷
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2018年4月上第7期
论文发表时间:2018/9/4
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