杨运东[1]2001年在《骨炎定对体外培养软骨细胞的影响》文中进行了进一步梳理骨性关节炎是中老年人的常见疾患，主要病理特征是关节软骨的退变。关节软骨退变的原因尽管是多方面的，但软骨细胞的结构破坏和功能丧失在其中起着至关重要的作用。采取有效方法保护软骨细胞的结构、调节软骨细胞的功能是防止软骨退变的关键措施，是治疗骨性关节炎的正确途径。陈基长教授研制的中药骨炎定（GUYANDING，GYD）能减轻骨性关节炎的临床症状，改善关节功能。为了深入探讨其作用机理，本实验采用软骨细胞培养技术观察其对软骨细胞代谢的影响。实验一：关节软骨细胞的分离和培养 采用胶原酶Ⅱ分段酶消化法从叁月龄大耳白兔的关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养。每日在倒置显微镜下观察细胞形态及其生长情况，并用甲苯胺蓝异染色法进行细胞表型鉴定。结果表明，软骨细胞形成单层的时间原代培养1周左右，传代培养约4-5天，细胞以圆形或上皮样细胞形态为主。甲苯胺蓝染色证实，细胞可合成蛋白多糖，异染反应主要集中在细胞集落样生长区，异染程度以原代培养最为显着。实验二：骨炎定对培养兔软骨细胞增殖和蛋白质合成的影响 把传一代的软骨细胞接种于96孔培养板和24孔培养板中，培养24小时后细胞贴壁进行分组试验。1 MTT法测细胞增殖把96孔培养板中的32孔随机分为8组，每组4孔，每孔培养体积0.1ml。A组（对照组）加用5％血清培养液；B-G组：分别加用含有5％血清与1.25％、2.5％、5％、10％、20％、40％DMEM培养液；AO组为空白调零组，未接种细胞，只加有含有5％血清的DMEM 广州中医药大学九八级骨科博士：杨运东 导师；陈基长培养液。在培养48小时后用MIT ie检测细胞活性和增殖。结果GYD组 5O、10o、20％骨炎定可促进软骨细胞增殖，与对照组相比，差别有非常显着意义。2考马斯亮蓝祛检测细胞总蛋白 24孔培养板随机分为六组，每组4孔，分别为：A组：空白对照组。只加含有5％血清培养液；BS组分别加含有20％、10％、5％骨炎定、5％防风、5％当归注射液的培养液，培养叁天后用考马斯亮蓝法检测细胞总蛋白。结果表明：5％、10％、20％可促进软骨细胞总蛋白合成，与对照组相比差别有非常显着性意义。炉仍刀l）实验叁：骨炎定对培养软骨细胞NOS和SOD的影响 把原代培养的软骨细胞接种于24孔培养板中，细胞贴壁生长后随机分为6组并更换相应的培养液。A组（空白对照组人更换DMEM培养液；B组（实验对照组）更换含有 100U／rnllN’－－的培养液滑卜骨＊组：分别更换含有100、5o、2。50、1．25O骨炎定培养液（含有100UhaltwF）。焙养刀小时后，收集各孔．上清液，用比色法检测NOS、SOD ％性。结果表明，TN’－可使软骨细胞中的iNOS活性增加，5％骨炎定可显着提高软骨细胞SOD ％性，抑制i：NOS活性。实验四。骨炎定对培养软骨细胞超微结构的影响 传代培养的软骨细胞接种于8个培养瓶中，每瓶中预先置有盖玻片一块。培养24小时细胞贴壁后培养瓶随机分为两组，对照组：更换含有生理盐水的培养液。骨炎定组：更换含有5％骨炎定培养液。培养5天后，取出小盛片，2，5％戊二醛固定后行扫描电镜观察。收集培养瓶中的细胞，2．5％戊H醛固定后行透射电镜观察。结果：5％骨炎定组软骨细胞表面的 3 骨炎定对体外培养软骨细胞的影响纤细突起和皱稻较对照组多，细胞表面的囊泡数少，透射电镜观察软骨细胞胞浆丰富，线粒体和粗面内质网发达。超微结构的变化说明中药骨炎定对软骨细胞有保护作用。结论：本实验充分说明中药骨炎定可促进软骨细胞的增殖和蛋白质合成，保护软骨细胞兔受肿瘤坏死因子等细胞因子的损害，可提高自由基清除水平，调节软骨细胞的合成代谢，从而有效地保护软骨细胞，达到防止软骨退变的日的。
周琦石[2]2006年在《骨炎定对一氧化氮抑制人类软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响》文中认为目的 观察骨炎定对体外培育的人软骨细胞增殖以及在白细胞介素-1影响下诱导型一氧化氮合酶和Ⅱ型胶原基因表达的影响,在细胞和分子水平对骨炎定保护软骨的作用机制进行研究。 方法 从人工关节置换手术中取出的人类关节软骨中分离出软骨细胞,将其分为空白对照组、IL-1组、IL-1+L-NAME组和IL-1+骨炎定组,应用血清药理学的方法进行给药和离体培养,用MTT法观察各组软骨细胞增殖的差异,应用逆转录聚合酶链技术观察骨炎定对软骨细胞诱导型一氧化氮合酶、Ⅱ型胶原mRNA表达的影响,了解骨炎定保护软骨的作用机制。 结果 骨炎定含药血清用于体外培养人软骨细胞时,对软骨细胞的增殖有一定的促进作用;在IL-1作用下,软骨细胞诱导型一氧化氮合酶的表达明显增加,加入一氧化氮合酶抑制剂L-NAME后,一氧化氮合酶的表达明显减少,接近于空白对照组,骨炎定含药血清也能够对抗IL-1的作用,令软骨细胞一氧化氮合酶的表达接近于空白对照组。同时,在IL-1作用下,软骨细胞Ⅱ型胶原的表达会明显减少,而一氧化氮合酶抑制剂L-NAME和骨炎定含药血清都能使Ⅱ型胶原的表达增加。 结论 骨炎定对软骨细胞的增殖有一定的促进作用,结合骨炎定对体外培育的人软骨细胞在IL-1作用下诱导型一氧化氮合酶、Ⅱ型胶原mRNA表达影响的观察发现,这种促进增殖的作用有可能是通过对抗前炎症细胞因子IL-1诱导产生一氧化氮并抑制Ⅱ型胶原合成的机制而实现的,表明骨炎定对软骨中的软骨细胞和胶原成分都具有一定的保护作用。
曹燕明[3]2002年在《外固定支架及骨炎定对骨性关节炎的实验研究》文中指出骨性关节炎是一种因各种不同原因导致的以关节软骨退变为主要病理特征的综合征，是骨科临床的多发病和常见病。目前公认的骨性关节炎的发病机制有负荷传导紊乱、自由基及细胞因子、血液循环障碍、关节软骨酶、自身免疫反应等原因。本试验用与人有近似力学环境的鸡作实验动物做骨性关节炎的造模，探讨用可活动的带关节的外固定支架固定关节两侧，通过撑开关节面，减少关节面的负重，改善关节的力学环境达到预防和治疗骨性关节炎的目的。陈基长教授研制的中药骨炎定能减轻骨性关节炎的临床症状，改善关节功能。它的成分是红花、牛膝、补骨脂、骨碎补、北芪，具有补肝肾，益气血的功效。为深入探讨其作用机理，本实验研究骨炎定对动物关节软骨病理形态和血清氧自由基的影响，以及测定骨炎定对内皮细胞的影响。 实验一 带关节的外固定支架及骨炎定对鸡膝关节病理形态的影响的观察 目的：用鸡膝关节造成骨性关节炎的模型，观察带关节的外固定支架和中药骨炎定是如何影响鸡膝骨性关节炎的病理形态。方法：采用25只叁月的雄性AA鸡做实验动物，分成5组，每组5只鸡。分成对照组，不做任何处理。造模组，骨性关节炎的造模方法是，于鸡的膝关节切断前后交叉韧带，切除半月板，直到确认膝关节抽屉试验阳性。中药组，即造模后给予中药骨炎定汤剂灌胃。带关节的外固定支架组，即造模后给予带关节的外固定支架撑开保护关节面。造模后在缝合伤口前，在关节的远近端，距关节面1-2cm垂直骨面由内到外，钻入直径1mm的克氏针4条，克氏针相距约1-2cm。将克氏针插入带关节的外固定支架的固定块中用镙钉固定。旋转镙母撑开关节面，同时活动关节，确认关节活动可。带关节的外固定支架加中药组，即给予带关节的外固定支架和中药骨炎定治疗。饲养12周后处死，取标本做病理形态学的观察。结果：造模组，于鸡膝关节形成明显骨关节炎病理特征，有关节软骨面不光滑、关节软骨缺损、骨赘生物形成、软骨软化，关节周围结缔组织增生，远侧关节面明显，并形成类似半月板结构保护远侧关节面。镜下见，软骨表面不平滑，出现多个裂隙，部分软骨剥脱，形成缺损区。表面出现多个空隙窝，软骨细胞消失，部分软骨细胞固缩，偏于一侧。深层出现软骨细胞簇积现象，软骨下骨板增厚。用鸡可造出骨性关节炎的模型。中药组软骨组织破坏程度，明显低于造模组。所有带关节的外固定支架组软骨组织破坏程度与造模组无明显区别。结论：带关节的外固定支架没有达到保护关节的目的，而中药骨炎定能达到保护关节软骨的目的。 外固定支架及骨炎定对骨性关节炎的实验研究 目的：探讨骨炎定防治骨性关节炎的机理，对骨炎定影响鸡实验性膝关节炎氧自由基的代谢进行研究。方法：选取鸡40只，随机分成正常组、模型组、骨炎定低剂量组、骨炎定高剂量组和芬必得组，每组8只，雌雄各半。骨炎定低剂量组、骨炎定高剂量组分别灌胃 58／kg、10g／kg药物，芬必得组灌胃 150wig药物，正常组和模型组灌胃同体积的蒸馏水，每天2次，早晚各1次。用超氧化物歧化酶试剂盒、丙H醛试剂盒分别测定各组血清SOD活性和MDA含量。结果：骨性关节炎时，鸡血清超氧化物歧化酶活性下降，与正常组比较有显着性差：异（凸P功．05人骨炎定低剂量组、高剂量组能提高骨性关节炎鸡血清超氧化物歧化酶活性，与模型组、正常组比较均有显着性差异（P＜0刀1），芬必得组和正常组相当，两者无显着性差异（＊功刀5人骨性关节炎时，鸡血清丙二醛含量上升，与正常组比较有显着性差异（’P＜0刀1）。骨炎定低剂量组、高剂量组能降低骨性关节炎鸡血清丙二醛含量，与模型组比较有显着性差异O邓刀leq刀5人且正常组与芬必得疗效相当，两者无显着性差异（＊刀＞0刀5）。结论：骨炎定通过提高实验性膝关节炎鸡血清SOD活性，清除了体内过剩自由基，降低了血清MDA含量，防治了氧自由基对患病关节的损伤，从而起到了延缓关节软骨的退变，促进了软骨修复，达到了治疗骨性关节炎的目的。 实验叁 中药骨炎定对皮内细胞的增殖作用 目的：用MTT法测定含中药骨炎定的兔血清对人脐静脉内皮细胞的增殖作用。方法：首先制备含药血清，给兔灌胃后根据需要，于不同时段在兔耳中央动脉采血，无菌分离血清，经 0．45 n m、0．2 u m双层微孔滤膜过滤除菌，置．40oC低温冰箱保存各用。然后用购自CCTCC的人脐静脉内皮细胞培养至3．5代，将第3代至第5代血管内皮细胞以含15％小牛血清的DMEM培养液调成sxm‘个l毫升的细胞悬液，以100VV孔接种于96孔培养板中，于37’C 5％CO。温箱中饱湿静置培养 48小时，更换无血清的 DMEM培养液，使细胞同步化 12小时，每孔加入 100 VI不同时相采集的空白兔血清或高剂量含药血清，每组均设 8个平行孔，总体积为 200 P V孔，置 37’C 5％COZ温箱中饱湿静置培养 36 ’J’时，每孔加入 sing／thl的MTT溶液20川，继续培养4小时以进行显色反应。以 50O／DMF－－0％SDS 00 of终止反应，室温静置过夜。待孔内蓝色结晶完全溶解后置酶标仪上测波
林柳泽[4]2007年在《补肾活血法改善膝关节骨性关节炎患者生存质量的临床研究》文中研究说明目的膝关节骨性关节炎是一种常见的慢性退行性骨关节疾病，好发于中老年人。临床上多见膝关节疼痛和缓慢发生的关节活动受限，其病因主要与年龄、遗传因素、性别、肥胖、机械和外伤、骨内高压、氧自由基、细胞因子与生长因子的影响、自身免疫反应以及负荷传导紊乱的影响等因素有关；其病理特征是关节软骨发生原发或继发性改变和由此而导致的关节软骨变性、软化并逐渐消失，软骨下骨质改变，骨板层骨质硬化，随后出现软骨下及边缘骨赘形成，继发关节滑膜炎、关节囊挛缩、关节间隙狭窄，引起关节功能障碍等症状，严重影响人们的正常生活和工作。现代医学针对本病的治疗主要以药物和手术两种治疗方法为主。中国传统医学将本病归属于“骨痹”范畴，其病因病机以肝肾亏虚、气血不足为主，属“本虚标实”之证。治疗上以补益肝肾为主，兼以活血化瘀、舒筋通络等，以达到攻补合宜、标本兼治的目的。临床辨证论治中内治法主要以补肾法、补肾活血法、柔肝法为主，同时又有敷贴法、熏洗、热熨、关节腔内注射及灌洗、中药离子导入、小针刀配合中药、针灸、推拿按摩等外治疗法；亦有内外同治的综合疗法。经大量实验及临床研究证实，中药防治膝骨关节炎具有改善OA时关节软骨的力学性能、改善OA时关节软骨的生物学因素、促进软骨细胞增殖和抑制软骨细胞凋亡、改善退变过程中软骨细胞功能、下调性激素水平、清除膝关节内过多的氧自由基、提高抗氧自由基系统的能力等作用机制。目前，补肾活血法被广泛地应用于膝关节骨性关节炎的临床治疗中，通过实验以及临床研究业已证实，补肾活血法治疗膝关节骨性关节炎可以降低实验性骨性关节炎动物血清、关节软骨和滑膜中NO水平，延缓OA的组织学改变进程，抑制骨性关节炎的发生和发展。临床治疗中应用该法治疗膝关节骨性关节炎也取得了满意的临床疗效。根据“肾主骨”、“肝肾相关论”、“血瘀论”，本研究项目课题组在导师的指导下，结合几十年来治疗膝关节骨性关节炎的临床经验，在中医平衡观、整体观和辨证施治的观点指导下，概括该病病机为多虚多瘀、多因多果，提出治疗主要原则是补肝肾、益气行血，从内而治，整体调节，并研制出中药骨炎定。经过多年的临床研究证实，该方剂能明显地改善KOA患者的关节疼痛、肿胀和功能障碍，改善患者骨内压和调节异常的血液循环，临床效果满意。虽然应用补肾活血法治疗膝关节骨性关节炎的实验研究以及临床治疗方面都取得了较好的成绩和疗效；但在临床研究中，特别是评价临床疗效时，多是根据患者的主观感觉作为判定的依据。而医生在制定疗效评价标准时，由于传统的中医术语缺乏精确的量值指标，缺少客观化和标准化，对有关情绪和心理状态的描述欠充分，缺少对患者社会性及相关因素的反映。生存质量量表评价的引入将会解决原有中医疗效评价中的模糊性和不确定性，为进一步推进补肾活血法治疗本病的临床研究奠定坚实的基础。膝关节骨性关节炎属于一种慢性疾病，致残率高，针对该病的治疗目的主要是缓解症状，提高患者的生存质量，当疾病的预后仅仅是部分恢复，治疗只是缓解症状而不是治愈时，用量表来考察生存质量是很有意义的。方法本研究重点在于针对中药治疗后患者生存质量改善情况进行研究。研究对象从2005年3月～2006年9月广州中医药大学第一附属医院及第叁附属医院门诊及住院76患者中，挑选出符合纳入标准的72例膝关节骨性关节炎患者进行观察研究，并将观察对象随机分为2组。72例患者中共113个患病膝，其中单膝为31例，双膝41例。在年龄、病程、居住环境、文化程度、职业、婚姻状况等方面比较，2组组间差异无显着性(P＞0.05)。本次临床观察以中药骨炎定治疗膝关节骨性关节炎，并以西乐葆作为对照组，临床治疗前1周对观察对象进行临床症状、James积分以及生存质量量表调查；之后各组按上述药物服用方式连续服药6周，治疗6周后开始对观察对象进行临床疗效以及治疗后6、10周James积分和生存质量的跟踪调查；对生存质量调查结果进行统计，并与广州市社区老年人生存质量对比分析，进行组内、组间对比，经统计学分析后得出观察结论。结果经过6周的治疗后，西药组因胃肠道反应中途退出观察者3例，中药组中途失访1例，余72例全部完成本次临床观察的治疗与积分调查。在临床疗效方面，中药组总有效率为77.1％；西药组总有效率为81.1％。两组在临床疗效方面对比无显着性差异(P＞0.05)，说明中药骨炎定在治疗膝关节骨性关节炎临床疗效方面功效与西乐葆相似。两组组间对比治疗前以及治疗后6、10周James积分比较无明显差异(P＞0.05)，两组治疗前以及治疗后6、10周组内比较James积分明显改善，治疗前后对比差异显着(P＜0.01)；说明两组药物都可以明显地改善James积分，缓解膝关节骨性关节炎病情，提高患者的日常生活能力。治疗后10周James积分两组均略有降低，但与治疗后6周组内比较无明显改善。说明停药4周后，患者的症状没有明显反复，中药骨炎定在远期疗效方面与西乐葆类似。生存质量各分量表治疗前两组比较，均无统计学意义(P＞0.05)，说明两组具有可比性。两组在生理职能、躯体疼痛方面治疗前后组内进行比较，均有显着性差异(P＜0.01)；但两组治疗前以及治疗后6、10周改善值组间比较，无统计学意义(P＞0.05)，说明骨炎定对生理职能、躯体疼痛方面改善方面与西乐葆功效相似。在生理功能方面，中药组治疗前以及治疗后6、10周相比较，有统计学意义(P＜0.05)，治疗后6、10周组内比较无显着性差异(P＞0.05)；说明中药具有改善生理功能的作用；西药组治疗前后比较，无统计学意义(P＞0.05)；两组改善值相比较，骨炎定治疗后6、10周在改善生理功能方面优于西乐葆(P＜0.05)。在活力方面，中药组治疗前后相比较，有统计学意义(P＜0.05)，说明骨炎定有改善活力方面的作用。在情感职能方面，两组改善值组间相比较，有统计学意义(P＜0.01)，表明骨炎定改善情感职能作用优于西乐葆。与广州市健康中老年人生存质量调查结果对比，两组在生理功能、生理职能以及活力方面明显低于同龄健康人水平；由于疼痛的原因，导致膝关节骨性关节炎患者的体育锻炼及活动大为减少；经过治疗后疼痛等症张虽然有所缓解，但仍未达到正常人健康的标准，因此在此叁个纬度的评分应低于正常健康人水平。在躯体疼痛纬度评分对比方面，中药组、西药组经过治疗后虽然组内比较评分有所升高，但治疗后仍低于正常健康水平，说明针对膝关节骨性关节炎的治疗是一个长期、持续的过程。在余下的各项纬度评分比较中，中药组生存质量水平均与正常健康水平相当，其中在社会功能、情感职能两项中还略高于正常健康水平，证实了中医中药治疗疾病是从整体观着手，治疗疾病的过程是对机体整体功能的调治过程，充分体现了中医中药整体、辨证论治的特点。两组在治疗后6周与10周组内比较无明显差异，治疗后两组均没有出现明显的疾病病症反跳现象，说明两组治疗方法具有较好的远期疗效，但日后需要进一步作更长期的远期观察。结论通过本次临床研究证实，中药骨炎定治疗膝关节骨性关节炎与西乐葆在临床疗效、改善James积分方面作用相似；在改善生存质量方面，量表中生理职能、躯体疼痛方面改善作用二者相似，生理功能、活力以及情感职能改善方面，中药骨炎定作用优于西乐葆。两组治疗后与广州市健康中老年人生存质量调查结果对比，在生理功能、生理职能以及活力方面明显低于同龄健康人水平。余下的各项纬度评分比较中，中药组生存质量水平均与正常健康水平相当，其中在社会功能、情感职能两项中还略高于正常健康水平。与西药治疗相比，中药骨炎定具有应用范围广泛、低毒性、低副作用、价廉、可以长期连续服用等优点，充分体现了中医中药整体论治、辨证治疗的优势。
赵俊峰, 苏友新[5]2010年在《骨性关节炎发病中一氧化氮的作用及中医药干预的研究》文中研究指明骨性关节炎(osteoarthritis,OA)病理特点是关节软骨变性、破坏,并伴有滑膜炎症、软骨下骨硬化、关节边缘和软骨下骨反应性增生、骨赘形成等。不少研究表明,一氧化氮(NO)与OA的发病密切相关,抑制NO的产生,可以延缓OA的进程。近年来中医药防治OA的研究甚多,其中对NO的干预是研究热点之一。
郑晓辉, 屠永刚, 夏雄智, 周琦石[6]2008年在《补肾行气活血法在骨髓基质干细胞诱导软骨细胞修复兔关节软骨缺损中的作用》文中研究表明[目的]探讨补肾行气活血法在骨髓基质干细胞诱导软骨细胞修复兔关节软骨缺损中的作用。[方法]将胶原凝胶包埋的骨炎定含药血清培养的骨髓基质干细胞诱导的软骨细胞和异体软骨细胞接种CPPf/PLLA支架构建的复合物体外培养3周,行倒置显微镜和扫描电镜观察,并将复合物异体移植入兔关节软骨缺损,术后4、8、12周取材,从大体、组织学和Ⅱ型胶原免疫组织化学分别对再生软骨组织进行评价。[结果]诱导软骨细胞组在支架内分布均匀、透明软骨样组织的形成、表面光滑度、与周围组织整合程度及基质内有Ⅱ型胶原分布等方面明显优于软骨细胞组。[结论]补肾行气活血法在关节软骨缺损修复的作用中较传统的方法有其优越性。
彭昌华[7]2010年在《联合顺次法对兔膝骨性关节炎软骨bFGF表达及组织形态影响的实验研究》文中进行了进一步梳理目的本实验运用联合顺次法(关节冲洗,透明质酸注射,中药离子导入)治疗实验兔膝关节骨性关节炎,通过检测实验兔右股骨内髁软骨中bFGF表达以及对软骨的组织形态学观察,探讨其治疗膝骨性关节炎的机理。为临床上运用膝关节冲洗,关节腔内透明质酸注射,中药离子导入联合顺次治疗膝骨性关节炎提供理论和实验依据。方法本研究选取70只体重为2500g(±100g)健康成年日本大耳白兔,雌雄不分,随机分成7组,分为正常组(Ⅰ)、模型组(Ⅱ)、关节冲洗组(Ⅲ)、透明质酸注射组(Ⅳ)、中药离子导入组(Ⅴ)、骨友灵擦剂组(Ⅵ))、联合顺次组(Ⅶ),每组10只。除正常组外,余组采用结扎右侧股静脉致骨内高压的方式造模。造模8周后,正常组及模型组不做任何特殊处理,余组以相应的方法处理或治疗。治疗5周后,将实验动物处死,解剖膝关节,肉眼观察实验兔关节软骨表面情况,切取部分右股骨内髁软骨,用免疫组化法检测软骨中bFGF的表达,并对软骨进行透射电镜观察并摄像。结果1.关节软骨bFGF表达各治疗组关节软骨bFGF表达与正常组、造模组比较均有明显增高(p<0.01),其中联合顺次组最明显,与其他治疗对照组比较有显着差异(p<0.05)。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组间比较无显着差异(p>0.05)2.肉眼及电镜下观察肉眼下观察：肉眼下Ⅰ组膝关节软骨未见明显异常变化,关节面光整,色泽正常；Ⅱ组关节软骨改变最明显,其关节面变黄、糜烂,缺损深达软骨中层或关节面溃疡形成,缺损深达软骨深层。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组关节面粗糙,有小的裂隙且色泽灰暗。联合顺次组表层软骨破坏比模型组明显减轻。镜下观察：Ⅰ组见软骨细胞形态正常,细胞核完整,核膜清晰,核内染色质均匀分布；Ⅱ组可见凋亡细胞,细胞高度固缩,染色质浓聚,染色深,核仁消失,胞质内细胞器减少甚至消失,胞膜下可见空泡；Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组可见核不规则,基质尚匀称,染色浅,部分内质网轻度扩大；Ⅶ组联合顺次法组见软骨细胞核呈椭圆形,细胞及胞膜完整,细胞核完整、胞质内有丰富的细胞器。通过肉眼及电镜下观察联合顺次组与其他治疗组相比能较好改善兔膝关节软骨的破坏。结论联合顺次法对实验兔膝骨关节炎软骨改善有很好的效果,且联合顺次法对软骨的改善作用优于对照组治疗方法。实验结果表明联合顺次法与其他治疗组相比能上调bFGF表达,较好修复兔膝骨性关节炎关节软骨,改善破坏的关节软骨,延缓关节软骨的退变。联合顺次法为临床膝关节冲洗、关节腔内透明质酸注射、中药离子导入治疗膝骨性关节炎提供理论和实验依据。
参考文献：
[1]. 骨炎定对体外培养软骨细胞的影响[D]. 杨运东. 广州中医药大学. 2001
[2]. 骨炎定对一氧化氮抑制人类软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响[D]. 周琦石. 广州中医药大学. 2006
[3]. 外固定支架及骨炎定对骨性关节炎的实验研究[D]. 曹燕明. 广州中医药大学. 2002
[4]. 补肾活血法改善膝关节骨性关节炎患者生存质量的临床研究[D]. 林柳泽. 广州中医药大学. 2007
[5]. 骨性关节炎发病中一氧化氮的作用及中医药干预的研究[J]. 赵俊峰, 苏友新. 福建中医药. 2010
[6]. 补肾行气活血法在骨髓基质干细胞诱导软骨细胞修复兔关节软骨缺损中的作用[J]. 郑晓辉, 屠永刚, 夏雄智, 周琦石. 中国矫形外科杂志. 2008
[7]. 联合顺次法对兔膝骨性关节炎软骨bFGF表达及组织形态影响的实验研究[D]. 彭昌华. 湖北中医药大学. 2010
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