段元山 曲艺琳 陈贝 杨楷（通讯作者）
（湖北省中西医结合医院 湖北 武汉 430000）
【摘要】目的：以肺炎链球菌自溶素蛋白LytA为抗原，并检测其抗体在外周血中水平，分析其在社区获得性肺炎的血清学诊断中意义。方法：以rLytA为抗原，采用ELISA反应模式，测定健康组（对照组）及社区获得性肺炎患者（研究组）的IgM抗体，并与痰培养结果比较。采用χ2检验分析两组结果差异。结果：测得血清学诊断的敏感度、特异度分别为30.0％和100.0％，痰培养的敏感度和特异度分别为22.2%和70.0%。血清学诊断的敏感度与痰培养相比差异无统计学意义（P>0.05），但特异度显著高于常规痰培养结果（P<0.05）。阳性预测值为100%，IgM类抗LytA抗体的阳性结果具有确切诊断意义。结论：以肺炎链球菌自溶素蛋白LytA为抗原，采用ELISA反应模式，检测IgM类LytA抗体，为早期诊断、检测链球菌感染性肺炎成为可能，值得临床推广。
【关键词】肺炎链球菌；社区获得性肺炎；血清学诊断
【中图分类号】R563.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）28-0092-02
肺炎链球菌是社区获得性肺炎主要病原体，在老年患者和幼儿患者中致病率较高[1]。准确、及时地鉴定社区获得性肺炎的病原体，可以尽早采取治疗措施，降低病死率。目前，肺炎链球菌感染的诊断主要通过细菌分离培养和鉴定实现，该方法阳性率较低[2]。肺炎链球菌自溶素蛋白LytA具有免疫活性，可以刺激机体产生相应的抗体，而且其基因序列在不同血型间具有高度保守性，因而有可能成为血清学诊断指标。本次研究通过以肺炎链球菌自溶素蛋白LytA为抗原，并检测其抗体在健康人和社区获得性肺炎患者外周血中水平，分析其在社区获得性肺炎的血清学诊断中意义，现将结果报告如下。
1.材料与方法
1.1 材料
肺炎链球菌（ATCC49619）由卫生部临床检验中心提供。
1.2 血清标本
健康组（对照组）30例，其中男14例，女16例，平均年龄49.3岁，为健康体检者，其中痰培养肺炎链球菌阳性9例。社区获得性肺炎患者组（研究组）30例，其中男15例，女15例，平均年龄48.8岁，选自我院2016～2017年呼吸内科住院患者，诊断依据为《社区获得性肺炎诊断和治疗指南》[3]，其中痰培养肺炎链球菌阳性8例。两组在年龄、性别之间无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。
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1.3 方法
采用ELISA方法检测血清抗体：将纯化的rLytA蛋白用包被液稀释到50μg/ml，并以50μL/孔加入酶标仪中，在4℃下过夜；分别加入对照组和研究组待测血清样本50μL/孔；加入HRP-兔抗人IgM抗体；用四甲基联苯胺显色；测定OD450nm值，比较各组差异；以研究组OD450nm值与对照组OD450nm值之比大于2.1为阳性。
1.4 统计学分析
所有数据采用SPSS19.0软件进行分析，计数数据采用χ2检验，P＜0.05为具有统计学意义。
2.结果
采用ELISA方法检测结果显示，研究组IgM类抗LytA抗体阳性例数为9例，阳性率为30.0%，对照组均为阴性，研究组敏感度明显高于对照组，结果具有显著性差异（P＜0.05）。研究组中痰培养阳性有8例，阳性率为22.2%，与IgM类抗LytA抗体检测阳性率30.0%相比，两者无显著性差异（P＞0.05）。对照组痰培养阳性有9例，阳性率为30.0%，检测研究组患者rLytA类抗体特异度为100%，痰培养为70%，两者具有显著性差异（P＜0.05）。阳性预测值为100%，IgM类抗LytA抗体的阳性结果具有确切诊断意义，该方法可以用于社区获得性肺炎的早期检测、诊断。
3.讨论
社区获得性肺炎是一种临床常见感染类疾病，具有病死率高的特点，肺炎链球菌是其主要病原体，而肺炎链球菌的青霉素耐药率高,呈多药耐药性[4]。因而，早期快速诊断疾病可以进行更加针对性用药，减少细菌耐药率。本研究通过以肺炎链球菌自溶素蛋白LytA为抗原，并检测其抗体在健康人和社区获得性肺炎患者外周血中水平，探究其在社区获得性肺炎的血清学诊断中意义。
本次研究结果表明，测得血清学诊断的敏感度、特异度分别为30.0%和100.0%，痰培养的敏感度和特异度分别为22.2%和70.0%。血清学诊断的敏感度与痰培养相比差异无统计学意义（P＞0.05），但特异度显著高于常规痰培养结果（P＜0.05）。阳性预测值为100%，IgM类抗LytA抗体的阳性结果具有确切诊断意义，该方法可以用于社区获得性肺炎的早期检测、诊断。此外，血清学检测方法相比较常规痰培养方法，还具有快速、客观以及不受使用抗生素影响等优点。
综上所述，以肺炎链球菌自溶素蛋白LytA为抗原，采用ELISA反应模式，检测IgM类LytA抗体，为早期诊断、检测链球菌感染性肺炎成为可能，值得临床推广。
【参考文献】
[1] Barzilay E J, O'Brien K L, Kwok Y S, et al. Could a single dose of pneumococcal conjugate vaccine in children be effective Modeling the optimal age of vaccination[J]. Vaccine, 2006, 24(7):904-913.
[2]董方,甄景慧,王艳,等.住院患儿细菌培养标本分离肺炎链球菌特征分析[J].中国实用儿科杂志,2016,31(3):201-205.
[3]中华医学会呼吸病学分会.中国成人社区获得性肺炎诊断和治疗指南(2016年版)[J].中华结核和呼吸杂志,2016,39(4):241-242.
[4]蒋浩琴,陈明亮,李天铭,等.上海地区成人患者肺炎链球菌分子流行病学的分析[J].中华检验医学杂志,2015,38(4):256-261.
论文作者:段元山,曲艺琳,陈贝,杨楷（通讯作者）
论文发表刊物:《医药前沿》2018年28期
论文发表时间:2018/11/26
标签：链球菌论文; 肺炎论文; 阳性论文; 血清学论文; 抗体论文; 性肺炎论文; 社区论文; 《医药前沿》2018年28期论文;