黑龙江中医药大学 150000
通讯简介：王晓源，1977年出生，副教授，
【摘 要】目的：研究黄芩素对人胰腺癌PANC-1细胞增殖和运动能力的影响作用。方法：随体外培养人胰腺癌PANC-1细胞，通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法与划痕愈合实验观察黄芩素对人胰腺癌PANC-1细胞增殖和运动能力的影响情况。结果：观察黄芩素对PANC-1细胞增殖的影响，黄芩素对PANC-1细胞增殖有着显著的抑制效果，同一时间不同剂量组别之间以及同一剂量不同时间组别间的差异较大，呈现明显的时间与剂量依赖性P＜0.05，统计学有对比意义。结论：黄芩素可以有效抑制肿瘤细胞运动侵袭与恶性增殖的能力，从而控制疾病的发展，具有临床推广价值。
【关键词】黄芩素；胰腺癌；PANC-1细胞增殖；运动能力
1.材料与方法
1.1细胞培养
人胰腺导管癌PANC-1细胞株全部购于中国科学院上海 细胞生物研究所，运用胎牛血清（体积分数为10%）、谷氨酰（4μmol/L）、HEPES（10mmol/L）、链霉素（1001mg/L）与青霉素（10万U/L）培养基于37摄氏度的培养箱中加以培养处理。
1.2四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测细胞增殖
运用无水乙醇稀释黄芩素，其浓度梯度为1.0μmol/L、2.0μmol/L、4.0μmol/L、8.0μmol/L、16.0μmol/L、32.0μmol/L，取对数生长期的细胞常规消化制成单细胞悬液，同时调整细胞密度为1X104/ML，将其接种在96孔板中，每孔培养液为200μL，在培养24小时且细胞贴壁后加入不同浓度的黄芩素，乙醇对照组则加入同样体积的无水乙醇，空白组加入相同体积的培养液。在继续培养24小时则会进行MTT反应，于570nm波长下检测每孔吸光值（OD）。持续监测72小时，每一时间点每组设置6个复孔，依照细胞生长抑制率的公式加以计算：细胞生长抑制率=（1-实验组平均值 OD值/对照组平均OD值）X100%。
1.3划痕愈合实验
细胞依照2X105/孔于6孔板中接种，加入含DMSO的无血清DMEM培养3小时，此时细胞呈现出单层贴壁生长状态，运用200μL的tip头为6孔板中的细胞划痕，再运用2g/L G418与体积分数为10%FBS且分别含有5.0以及10.0μmol/L 的黄芩素DMEM，将其于培养箱中加以培养处理（48小时），分别于划痕后0、24、48小时为细胞拍照，对划痕愈合能力加以观察，每组细胞实验三个样本，重复三次。
1.4统计学方法
运用SPSS20.0处理此研究中的数据，计量资料以±s来表示，X²检验数据差。P＜0.05，表明对比结果有显著差异，统计学有比对意义。
2.结果
观察黄芩素对PANC-1细胞增殖的影响，黄芩素对PANC-1细胞增殖有着显著的抑制效果，同一时间不同剂量组别之间以及同一剂量不同时间组别间的差异较大，呈现明显的时间与剂量依赖性P＜0.05，统计学有对比意义，详情见表1。
观察黄芩素对PANC-1细胞爬行能力，划痕愈合实验检测PANC-1细胞爬行能力的结果来看，24小时后，对照组细胞形态相对较正常。黄芩素5μmol/L处理组细胞生长较缓慢，呈现出短梭形，划痕区域有细胞爬行，残留有划痕存在，对比对照组差异显著P＜0.05。黄芩素10.0μmol/L处理组细胞部分死亡，残存细胞呈现短梭形状态，划痕区域几乎无细胞爬行，对比黄芩素5μmol/L以及对照组，统计学有对比价值P＜0.05，具体详情参见表2。
3.讨论：
近些年以来，黄酮类化合物在临床医学中得到了广泛的关注，此类物质具有多种生物活性，特别是大部分有着极强的抗肿瘤活性，并逐渐成为抗肿瘤药物的研究方向。黄芩素是黄芩干燥根中被提取出来的黄酮类化合物。有相关研究调查显示，黄芩素是选择性12-脂氧酶抑制剂，它具有推动肿瘤细胞凋亡、强化肿瘤细胞对化疗药物敏感性、诱导肿瘤细胞周期停滞等作用，是一类具广谱的抗肿瘤生物活性。本研究针对黄芩素对人胰腺癌PANC-1细胞增殖和运动能力的影响作用加以分析。
从本研究划痕愈合实验检测PANC-1细胞爬行能力的结果来看，24小时后，对照组细胞形态相对较正常。黄芩素5μmol/L处理组细胞生长较缓慢，对比对照组差异显著P＜0.05。黄芩素10.0μmol/L处理组细胞部分死亡，划痕区域几乎无细胞爬行，对比黄芩素5μmol/L以及对照组，统计学有对比价值P＜0.05。
由上可见，黄芩素可以有效抑制胰腺癌细胞恶性增殖，具有临床推广价值。
【参考文献】
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论文作者:敖鹏 尹丽颖,通讯作者：王晓源
论文发表刊物:《世界复合医学》2019年第01期
论文发表时间:2019/3/22
标签：黄芩论文; 细胞论文; 划痕论文; 能力论文; 统计学论文; 剂量论文; 对照组论文; 《世界复合医学》2019年第01期论文;