包呼日查[1]2009年在《纤维软骨细胞—纤维蛋白凝胶复合物修复半月板损伤的初步研究》文中提出本实验通过体外培养兔子半月板纤维软骨细胞,观察其生物学特性及最佳的培养时间,鉴定细胞,并通过纤维凝胶作为组织工程的支架材料,观察纤维凝胶和半月板纤维软骨细胞的相容性、建立半月板损伤动物模型,将组织工程半月板植入半月板损伤动物模型膝关节内。初步观察植入的纤维软骨细胞-纤维蛋白凝胶复合物对损伤半月板的愈合有无影响。种子细胞的获取:从一个月龄兔子膝关节内切除半月板组织,经胶原酶的消化而获取兔子膝关节半月板纤维软骨细胞,进行原代和传代体外单层培养。测定原代和传代的纤维软骨细胞的生物学特性:研究方法包括细胞倒置显微镜下的形态表现,细胞计数,免疫组化染色,甲苯胺蓝染色,生长曲线等。构建纤维软骨细胞-纤维蛋白凝胶复合,将第叁代纤维软骨细胞与纤维凝胶支架结合,并植入半月板损伤动物模型膝关节内,观察对损伤半月板的愈合的影响。半月板纤维软骨细胞在体外培养,可获取大量细胞。并将体外培养获得的细胞经Ⅰ型和Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性,显示细胞内含有Ⅰ型和Ⅱ型胶原(主要是Ⅰ型胶原)。甲苯胺蓝染色异染性强,显示蛋白多糖(主要是糖胺聚糖,GAG)的合成,胶原和GAG是半月板的细胞外基质的主要成分,这些检测的阳性结果均显示了半月板纤维软骨细胞的特性。术后4、6周,纤维软骨细胞-纤维蛋白凝胶复合物修复组以类半月板组织修复缺损,单纯纤维蛋白凝胶修复组和未加任何移植物组的缺损区未见修复。
祝云利, 荆鑫, 缪志和, 吴海山, 周维江[2]2002年在《纤维软骨细胞-胶原复合物修复半月板损伤的实验研究》文中提出为了探讨纤维软骨细胞 胶原复合物对半月板损伤的修复作用 ,分离提取狗半月板纤维软骨细胞 ,体外扩增培养后种植于自制胶原模板上形成细胞 胶原复合物 ,将 18只狗随机分为 3组 ,在狗的外侧半月板作一楔形缺损 ,缺损内分别植入细胞 胶原复合物、胶原或不作处理 ,在不同时间取材进行大体和组织学观察。结果显示 ,植入的复合物形成与正常半月板相似的组织 ,胶原支架逐渐降解 ,而胶原对照组及空白对照组缺损区仅少部分修复或无修复。提示 ,这一新的组织工程学方法具有一定的指导意义及实用性。
王志波[3]2012年在《BMP-2诱导MSCs修复无血运区半月板损伤的实验研究》文中研究表明目的：为探寻无血运区半月板损伤的治疗方式,我们以新西兰大白兔为实验动物,制作半月板损伤动物模型,并尝试使用以自体纤维蛋白胶(FG)为基质材料,以骨形态发生蛋白-2(BMP-2)为细胞因子,在无需传代扩增骨髓间充质干细胞(MSCs)的前提下,诱导MSCs转化成纤维软骨细胞来修复半月板损伤。通过BMP-2的诱导作用,提高骨髓间充质干细胞转化效率,来增加纤维软骨细胞的生成数量,达到促进半月板愈合的目的,避免因半月板损伤引起关节软骨过早的发生退变,继发骨性关节炎(OA),从而为临床半月板无血运区损伤的治疗,提供一些新的思路。方法：选用健康新西兰大白兔36只,年龄6-12个月,体重2-3kg,随机分成A、B两组,每组18只,双膝内外侧半月板均用于实验,在其半月板体部统一造成无血运区纵行全层裂。A组(36膝)每只对其双膝随机采取一侧于半月板损伤区注入纤维蛋白胶(FG组),另一侧为空白对照组(NT组),对损伤区不做任何处理；B组(36膝)对其双膝随机采取一侧于半月板损伤区注入纤维蛋白胶与骨髓间充质干细胞混合物(FM组),另一侧于膝关节半月板损伤区注入纤维蛋白胶+骨髓间充质干细胞+骨形态发生蛋白混合物(FMB组),分别于术后第4周、8周、12周取材,每组每次处死动物3只。对半月板损伤区的修复情况行大体观察,并取材对修复组织行光镜组织学观察,12周时的半月板修复组织行电镜观察,对其修复质量情况做出评价,并进行相应的统计学处理。结果：1.大体观察示：空白对照组(NT组)半月板损伤区在术后各时间点均无明显组织修复,纵行全层裂仍然存在,边缘不整齐,色泽灰暗,表面不平整,但与FG组及FM组相比均无统计学意义(P>0.05),与FMB组相比差异显着(P<0.05)。FG组术后各时间点,半月板缺损区修复情况明显好于NT组而不及FMB组,但统计学处理仅与FMB组差异有显着意义(P<0.05)。FM组术后各时间点,损伤区支架材料与周围组织部分融合,与周围组织界限清楚,统计学处理结果显示仅与FMB组在第12周这一时间点差异具有显着意义(P<0.05)。FMB组术后,缺损区修复组织与周围组织融合可,12周半月板损伤区修复组织与周围组织界限模糊,效果明显好于FG组及FM组,与NT组和FG组及12周时与FM组相比差异显着(P＜0.05)。2.光镜观察示：FG组修复组织为少量的纤维结缔组织,纤维排列紊乱,偶见纤维软骨细胞。FM组术后各时间点损伤区可见纤维结缔组织及少量的纤维软骨细胞,纤维组织排列欠规整。FMB组术后各时间点损伤区有较多的胶原纤维形成,可见成团的软骨细胞,有软骨囊形成,并有较多的同源细胞群,胶原纤维排列规则。12周时甲苯胺蓝染色,缺损区修复组织及修复细胞周围可见甲苯胺蓝染以阳性物质,FG组及FM组基质染色较FMB组明显变浅且不均匀,经计算机病理彩色图象分析及统计学处理有统计学意义(P<0.05)。3.电镜观察：12周时,NT损伤边缘组织可见到调亡软骨细胞,胶原纤维粗细不等,排列不规则。FG组纤维软骨细胞有突起,细胞形状不规则,胶原纤维粗细不等,排列不规则。FM组纤维软骨细胞有突起,核糖体丰富,胶原纤维丰富排列规则。FMB组软骨细胞有突起,高尔基复合体及粗面内质网丰富,胶原纤维丰富,排列规则。结论：纤维蛋白胶是骨髓间充质干细胞及骨形态发生蛋白的理想载体,以纤维蛋白胶为载体的FG+MSCs+BMP-2复合物可以有效的促进和改善无血运区半月板损伤的修复,从而为临床治疗无血运区半月板损伤提供一种新的方法。
符培亮[4]2009年在《自体滑膜间充质干细胞—小肠粘膜下层复合物修复兔半月板损伤的实验研究》文中研究指明目的:以经体外扩增及细胞因子诱导后已进入软骨细胞分化谱系的兔自体滑膜间充质干细胞(SMSCs)为种子,借助猪小肠粘膜下层(SIS)为支架,以SMSCs-SIS复合物的形式回植入兔体内半月板缺损处,探讨以此修复半月板损伤的可行性。方法:通过有限稀释单克隆培养法将兔SMSCs由滑膜组织中分离出来并加以纯化,并进一步在体外培养条件下研究其形态学、超微结构、分子表型、增殖动力学、核型以及致瘤性等基本的生物学特性;在体外用BMP-2、TGF-β3和DEX协同刺激SMSCs后,以RT-PCR检测I、II型胶原及软骨特异性聚集蛋白聚糖(Aggrecan)的mRNA表达,细胞免疫荧光化学染色检测细胞分化过程中I、II型胶原的表达,碱性甲苯胺蓝细胞化学染色检测软骨特异性糖胺聚糖(GAG)的表达,借此判断BMP-2、TGF-β3和DEX是否能够诱导SMSCs进入软骨细胞分化谱系;采用Abraham方法处理SIS,并检测其生物安全性和组织相容性,评价其作为种子细胞支架的可能性;最后将经体外扩增及细胞因子诱导已进入软骨细胞分化谱系的SMSCs种植在SIS支架上,回植入体内,6周、12周后取修复组织块行HE染色,碱性甲苯胺蓝染色,I型、II型胶原与S100蛋白的免疫化学组织染色,探讨以此修复损伤半月板结构和功能的可行性。结果:在体外培养条件下兔SMSCs的增生分裂能力十分活跃,可以通过离体培养使其实现数目的扩增;DNA含量检测、染色体核型分析、荷瘤实验结果表明,SMSCs是正常的二倍体细胞,无致瘤性,可作为半月板组织工程的种子细胞。在体外,SMSCs经BMP-2、TGF-β3和DEX协同诱导后14天,RT-PCR检测到I型、II型胶原及软骨特异性聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA的表达,细胞免疫荧光化学染色也证实有I型、II型胶原的表达,同时碱性甲苯胺蓝细胞化学染色也证实有软骨细胞特异性胞外基质GAG成分,以上即证明SMSCs已进入软骨细胞分化谱系;本实验制成的SIS经组织切片和扫描电镜的观察表明是一种海绵样结构,其表面及内部均含有丰富的微孔结构,并与SMCSs有良好的组织相容性,可作为SMCSs的支架材料。SMSCs-SIS复合物植入半月板缺损区12周后大体观察原半月板缺损区有半月板样组织生成,HE染色可见纤维软骨样结构,周围胶原纤维结构明显,排列规则;碱性甲苯胺蓝染色可见蓝色异染基质-GAG;I型胶原、II型胶原与S100蛋白的免疫化学组织染色呈强阳性。而胶原对照及空白对照组则仅见纤维组织样的修复组织。结论:利用自体SMSCs经体外扩增及细胞因子刺激后,以SIS为支架,按一定的密度复合预培养后,回植入半月板缺损区的方法,是一种较为可行的修复半月板损伤的方法。为进一步提高这一方法的有效性,还需要在生物材料科学、生物力学和生物化学等方面进行更为深入的研究。
祝云利[5]2001年在《纤维软骨细胞-胶原复合物修复半月板损伤的实验研究》文中指出目的：以胶原酶消化法分离提取狗半月板纤维软骨细胞、体外扩增培养，然后以胶原-GAG模板为载体，将经体外扩增的纤维软骨细胞回植入体内，探讨以此修复半月板损伤的可行性。方法：以胶原酶消化法将狗半月板纤维软骨细胞分离出来并加以纯化，在体外培养条件下研究其增殖及生长特性；采用Yannas法以Ⅰ型胶原和糖胺聚糖(GAG)作为原料制备Ⅰ型胶原-GAG模板，并检测其作为功能细胞载体的可能性；最后通过以胶原-GAG模板为载体，将经体外扩增培养的纤维软骨细胞植入半月板缺损区，探讨以此修复半月板损伤的可行性。结果：在体外培养条件下，狗半月板纤维软骨细胞的增殖分裂能力活跃，可以通过离体培养使其实现数目的扩增；大体标本、扫描电镜、裸鼠皮下标本组织切片观察表明，本实验制成的Ⅰ型胶原-GAG模板是一种海绵样结构，其表面及内部含有丰富、孔径大小适中的微孔结构，适合细胞在其中生长，自制胶原模板具有无毒、可生物降解的特性。术后3、6、12周大体、组织学观察显示胶原-GAG模板被逐渐吸收，而纤维软骨细胞逐渐合成分泌新生基质，经不断改建形成半月板样纤维软骨组织，实验组同时可见相对应的关节软骨面光滑，胶原对照组及空白对照组修复较差或未见修复，对应关节软骨面出现退变或磨损。结论：利用经体外扩增的纤维软骨细胞，经由胶原-GAG载体按一定的密度植入半月板缺损区，是一种较为 第二军医大学博土论文·中文摘要可行的修复半月板损伤进而防止发生骨性关节炎的方法。尚需要在生物材料学、生物力学、生物化学等方面进行更为深入的研究。
葛廷云[6]2011年在《组织工程材料修复半月板运动损伤的可行性及特点》文中认为背景:组织工程技术的发展为半月板损伤的修复和再造开辟了新的途径,利用该技术构建有功能的半月板在防治半月板切除后的并发症中有重要意义。目的:综述了组织工程材料在半月板运动损伤修复中的可行性及特点。方法:由第一作者检索1990/2010 PubMed数据库及中国知网数据库有关天然生物材料、人工合成材料、纳米材料修复半月板损伤的文章。英文检索词为"meniscus,sports injuries,repair,tissue engineering,material",中文检索词为"半月板,运动损伤,修复,组织工程,支架材料"。结果与结论:由于半月板的血供特点,致使半月板无血运区损伤不具备愈合能力。组织工程技术的发展为半月板损伤的修复和再造开辟了新途径。目前报道较多的修复半月板支架材料主要有天然生物材料、人工合成材料、纳米材料等。组织工程化半月板的研究已取得了阶段性的成果,但对支架材料正处于研发实验阶段,还没确定出一种最理想的材料,因此寻求一种具有良好的细胞相容性,可控制的降解率并具有一定力学强度的支架材料仍是半月板组织工程的研究热点。
刘以俊, 张秋霞, 田京[7]2014年在《间充质干细胞-支架复合体修复膝关节半月板损伤》文中进行了进一步梳理背景:半月板损伤常规治疗手段效果并不显着,随着组织工程学的进展,间充质干细胞-支架复合体有望应用于此方面的治疗。目的:对间充质干细胞-支架技术治疗半月板损伤的相关研究进行综述,为后续研究和临床应用提供参考。方法:第一、二作者共同检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普数据库和万方数据库1980至2013年有关间充质干细胞-支架复合体修复半月板损伤的文献,英文检索词为"mesenchymal stem cell,meniscus injury,tissue engineering,scaffold,stent",中文检索词为"间充质干细胞,半月板损伤,组织工程"。同一领域文献选择近期发表或发表在权威杂志的文章,排除Meta分析及重复性研究。共检索到文献282篇,根据纳入标准选取59篇文献进行综述。结果与结论:目前很多研究表明间充质干细胞可在体外或体内被诱导分化为软骨细胞,间充质-支架复合体对半月板损伤有明显疗效。虽然此技术仍处于探索阶段,但其具有取材方便,无抗原性,有生命力等优点,在治疗半月板损伤方面有着广阔的应用前景。
吴鹏飞, 谷文光, 戴志唐[8]2016年在《Ⅰ型胶原-TGF-β1-纤维蛋白胶复合材料对兔半月板损伤修复作用的实验研究》文中研究说明目的探讨Ⅰ型胶原-转化生长因子-β1(Transform growth factor,TGF-β1)-纤维蛋白胶复合材料修复兔半月板无血运区损伤的临床效果。方法选取健康新西兰大白兔60只,在半月板损伤造模的基础上随机分为损伤对照组(A组)、TGF-β1组(B组)、Ⅰ型胶原-纤维蛋白胶组(C组)和Ⅰ型胶原-TGF-β1-纤维蛋白胶组(D组)。A组不做处理,C组与D组于关节腔内分别一次性注入Ⅰ型胶原-生物蛋白胶复合物、Ⅰ型胶原-TGF-β1-纤维蛋白胶复合材料至填充物与半月板表面相平为止;B组于关节腔内连续注射3周TGF-β1。术后2周、4周、12周分批处死动物,进行形态学观察和组织学检查。结果形态学观察发现,损伤后各组新西兰大白兔的半月板组织形态变小,颜色微黄,质地较硬,脆性增加。组织学检查发现,B组对半月板无血运区损伤的愈合无明显影响,仅对半月板边缘滑膜中的成纤维细胞有明显的促进作用;C组半月板伤口较术前小,表面稍凹陷,愈合组织与邻近半月板组织结合紧密;D组半月板表现为纤维软骨样愈合,但愈合部分与正常半月板仍有差异。A组、B组、C组,在4周、12周时与D组愈合情况比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用Ⅰ型胶原-TGF-β1-生物蛋白胶复合材料对半月板无血运区损伤治疗是非缝合技术治疗半月板损伤的一种可靠手段。
李澎[9]2016年在《制备具有生物相容性和机械强度的半月板组织工程支架的实验研究》文中提出因为半月板组织解剖结构的独特性,所以半月板的损伤是很常见的骨科疾病,而通过外科手术技术很少能真正地重建半月板组织。半月板是纤维软骨组织,由纳米级胶原纤维交错相连构成半月板结构的基本框架,从微观上观察,它又分为叁层不同结构,构成每一层结构的胶原纤维有各自排列模式。半月板损伤后,无血液供应部分不能再生,所以研究人员尝试利用组织工程技术来重建半月板。从目前国内外的研究发现,尚无一种单一材料和单一的制备技术能制备出具备半月板纤维软骨组织特征的组织工程支架。应用复合材料的原理和方法,将具有互补特性的两种或两种以上材料按一定比例和方式组合,制成兼备机械强度、可降解性和生物相容性的复合材料,并选择适宜的制备工艺,可以设计构造出能够满足组织工程支架所需的结构和性能优化的叁维复合材料支架。目前复合材料种类繁多,而天然生物材料与人工合成高分子材料之间的复合,显现了良好的组织相容性及生物力学特性,适合应用在半月板这种组织构造比较特殊的软骨组织重建。在本课题中,根据人工合成材料聚乳酸(PLA)具备一定的机械强度,又有弹性,符合半月板的―双相‖特性,我们选用其作为生物材料中的基本成分,为了增加它的可降解性,将它与聚羟基乙酸(PGA)复合,为了改善它的生物相容性,我们又利用天然生物聚合物明胶对它进行表面修饰。同时,考虑到组织工程支架的形貌结构对引导细胞增殖方向,诱导组织形成起到关键作用,设计制备的支架就要很好地仿生组织的细胞外基质结构。静电纺丝技术能够制备纳米级的纤维结构支架,很好地仿生了细胞外基质的胶原纤维结构。根据前期工作,改变接收板材质为铜质,增加一个电场,先行应用静电纺丝技术制备聚乳酸聚羟基乙酸(PLGA)纤维结构的支架作为支架基底层,仿生半月板组织的细胞外基质纤维结构,再在plga纤维结构支架表面纺一层明胶纤维结构支架对plga进行表面修饰,制成双层结构支架,增加plga支架的亲水性和组织相容性。制备的支架兼具机械强度、可降解性和组织相容性。鉴于静电纺丝技术制备的支架达到一定厚度后,因高分子材料的绝缘性和电场力的限制,再想提高支架的厚度,有相当大的挑战。而热致相分离(tips)技术,使叁维立体结构支架的厚度得到大大地改观,改良的梯度热致相分离技术,又使支架孔隙的排列走向得到控制。我们选用有韧性可降解材料聚3-羟基丁酸酯共聚4-羟基丁酸酯poly(3-hydroxybutyrateo-co-4-hydroxybutyrate),简称p(3hb-co-4hb),复合聚乳酸(pla),改善pla的降解性,利用梯度热致相分离技术制备pla/p(3hb-co-4hb)取向孔隙叁维支架,再结合物理吸附作用,将天然生物聚合物明胶涂覆在支架表面,更加改善了支架的生物相容性,使其具备诱导细胞取向增殖,促进组织形成,发挥组织工程支架的作用。第一部分静电纺丝技术制备有机械强度和细胞相容性的双层纳米纤维结构半月板组织工程支架目的:1.利用静电纺丝技术制备组织工程支架。2.通过明胶纤维的表面修饰提高支架生物相容性。3.评估支架具备适合组织工程支架要求的物理化学性质。方法:在前期工作基础上,改进静电纺丝设备,将接收板改用铜质材料,并在接收板上增加一个新的电场,利用―层-层沉积‖技术,先纺出一层plga纤维结构支架作基底层,再纺制一层明胶(gelatin)纤维结构在其表面上沉积制备双层结构支架。同时以纯的plga和明胶混合plga分别各纺出一种纤维支架作为对照组。将叁种支架的表征、亲水性、降解性和机械强度进行测试比较。结果:gelatin/plga双层纤维结构支架与另外两种支架对比,具备直径合适的纳米级纤维、有较大孔径、较高的孔隙率、较高的亲水性、满意的降解率和良好的机械强度。结论:明胶/plga双层纤维结构支架仿生了半月板组织细胞外基质结构,具备作为组织工程支架的理化特性。第二部分骨髓间充质干细胞诱导分化的半月板细胞种植支架联合培养目的:1.提取兔的骨髓间充质干细胞,进行诱导分化为半月板细胞。2.将细胞种植于前面制备的叁种不同的纤维结构支架上,在体外进行培养。3.观察细胞在支架上的形态,通过细胞增殖情况及合成分泌功能的比较分析,评估不同支架的细胞相容性。方法:应用密度梯度离心法提取兔骨髓间充质干细胞,在软骨诱导培养基中培养,获得的纤维软骨细胞通过表征观察和特异性染色(h.e、甲苯胺蓝、ab-pas、i、ii型胶原免疫组化染色)进行鉴定。接种细胞于叁种不同支架,通过观察细胞表征、组织染色、增殖测试评估叁种不同支架对细胞的相容性及对细胞特性的保持。结果:提取的骨髓间充质干细胞可以诱导分化成半月板纤维软骨细胞,种植于支架后能够增殖,并保持纤维软骨细胞的表征和功能,尤其在明胶/plga双层纤维结构支架上增殖显着。结论:明胶/plga双层纤维结构支架接种经诱导分化的纤维软骨细胞的联合培养为组织工程技术重建半月板提供理论依据。第叁部分制备具有生物相容性和机械强度的gelatin/pla/p(3hb-co-4hb)叁维组织工程支架目的:1.改进的梯度热致相分离技术制备pla/p(3hb-co-4hb)叁维多孔取向支架。2.在支架表面吸附明胶(gelatin)进行修饰,制备的支架进行表征、亲水性、降解性和机械强度的测试评估。3.支架上种植前面获得的诱导分化的骨髓间充质干细胞,评估支架的细胞相容性。4.与第一部分制备的gelatin/plga双层纤维结构支架进行机械强度和细胞相容性方面的对比。方法:应用改进的梯度热致相分离技术制备pla/p(3hb-co-4hb)叁维多孔支架,用物理吸附方法以明胶对支架进行表面修饰,标记为gelatin/pla/p(3HB-co-4HB)支架,制备的支架与未经过修饰的PLA/P(3HB-co-4HB)支架进行表征、孔隙率、降解性、亲水性和机械力学性能的测试对比后,种植经诱导分化的骨髓间充质干细胞,通过观察细胞在支架上的生长,及细胞—支架复合体的特异性染色和扫描电镜、共聚焦显微镜观察情况进行对比分析,评估明胶修饰支架在细胞相容性方面的优越性。为了选择更优越的支架,再与第一部分制备的Gelatin/PLGA双层纤维结构支架进行拉伸强度和细胞种植支架增殖情况的对比。结果:梯度热致相分离技术制备的叁维多孔支架经明胶修饰后,具备较理想的理化性质,种植其上的经诱导分化的骨髓间充质干细胞能够很好地增殖,并保持纤维软骨表征。与Gelatin/PLGA双层纤维结构支架对比,有更强的机械强度和优越的细胞相容性。结论:相比Gelatin/PLGA双层纤维结构支架,明胶修饰的PLA/P(3HB-co-4HB)叁维立体结构支架更适于成为半月板组织工程支架。第四部分Gelatin/PLA/P(3HB-co-4HB)支架负载诱导分化的干细胞植入裸鼠体内构建纤维软骨的实验研究目的:检测细胞—支架复合体植入裸鼠皮下构建纤维软骨组织。方法:首先测试支架的安全性,用支架浸提液进行皮下刺激试验和急性毒性实验。然后将前面实验中已经得到的经示踪剂染色的诱导分化干细胞负载于支架上构成复合体与单纯无细胞支架植入裸鼠皮下,进行培养4周后,在多功能活体成像系统下观察,确认支架内细胞存活、增殖。将裸鼠处死,取出细胞—支架复合体,制成切片,进行组织染色和免疫组化染色观察对比。结果:制备的Gelatin/PLA/P(3HB-co-4HB)支架是有生物相容性的,是安全的。负载诱导分化干细胞的支架植入裸鼠皮下后,可见支架内被标记的细胞增殖明显,细胞融合,相互联系,分泌纤维软骨细胞外基质。在支架环境中,有半月板纤维软骨组织形成的趋势。结论:负载诱导分化干细胞的Gelatin/PLA/P(3HB-co-4HB)支架于裸鼠皮下培养成纤维软骨组织,为组织工程技术重建半月板提供理论依据。
顾羊林, 陈鹏, 王予彬, 朱文辉, 朱国兴[10]2013年在《成肌细胞-PLGA支架复合物修复比格犬半月板损伤的实验研究》文中研究表明目的探讨成肌细胞种植于聚乳酸聚乙酸共聚物(PLGA)支架上,软骨定向诱导后植入比格犬体内修复半月板缺损的可能性。方法将来源于比格犬的成肌细胞培养传代至第4代,收集后以5.0×106细胞/cm3材料体积密度将细胞接种于PLGA支架中,含50 ng/ml软骨源性形态发生蛋白-2(CDMP-2)和20 ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)软骨诱导培养基培养14 d。然后将细胞-支架复合体植入24只比格犬半月板缺损模型中,术后4、8、12周取材,采用大体观察、组织学、生物化学和生物力学作为评估指标。结果术后4、8、12周各项检测结果显示PLGA支架材料逐渐降解吸收,而成肌细胞可逐渐合成分泌新生胶原,并最终形成半月板样纤维组织,而对照各组缺损区则仅见少许纤维组织样的修复组织。结论利用成肌细胞经体外扩增及细胞因子刺激后,以PLGA支架为载体,按一定的细胞密度复合培养后,植入关节腔内修复半月板局部缺损的方法,是一种较为可行的修复半月板损伤的方法。
参考文献：
[1]. 纤维软骨细胞—纤维蛋白凝胶复合物修复半月板损伤的初步研究[D]. 包呼日查. 吉林大学. 2009
[2]. 纤维软骨细胞-胶原复合物修复半月板损伤的实验研究[J]. 祝云利, 荆鑫, 缪志和, 吴海山, 周维江. 解放军医学杂志. 2002
[3]. BMP-2诱导MSCs修复无血运区半月板损伤的实验研究[D]. 王志波. 青岛大学. 2012
[4]. 自体滑膜间充质干细胞—小肠粘膜下层复合物修复兔半月板损伤的实验研究[D]. 符培亮. 第二军医大学. 2009
[5]. 纤维软骨细胞-胶原复合物修复半月板损伤的实验研究[D]. 祝云利. 第二军医大学. 2001
[6]. 组织工程材料修复半月板运动损伤的可行性及特点[J]. 葛廷云. 中国组织工程研究与临床康复. 2011
[7]. 间充质干细胞-支架复合体修复膝关节半月板损伤[J]. 刘以俊, 张秋霞, 田京. 中国组织工程研究. 2014
[8]. Ⅰ型胶原-TGF-β1-纤维蛋白胶复合材料对兔半月板损伤修复作用的实验研究[J]. 吴鹏飞, 谷文光, 戴志唐. 中国实验诊断学. 2016
[9]. 制备具有生物相容性和机械强度的半月板组织工程支架的实验研究[D]. 李澎. 大连医科大学. 2016
[10]. 成肌细胞-PLGA支架复合物修复比格犬半月板损伤的实验研究[J]. 顾羊林, 陈鹏, 王予彬, 朱文辉, 朱国兴. 中华关节外科杂志(电子版). 2013