（1山东省千佛山医院检验科 山东 济南 250014）
（2山东电力中心医院检验科 山东 济南 250014）
【摘要】目的：分析我院近3年来产碳青霉稀酶肠杆菌（CRE）检出率及其耐药情况。方法：采用回顾性方法对我院2013年至2015年临床送检标本中检出的产碳青霉稀酶的肠杆菌种类、数量进行统计，并对耐药情况进行分析。结果：2013-2015年度共检出CRE菌株128株；其中2013年度共收集标本25112例，阳性株数9216株，CRE检出21株，在阳性菌株检出率为2.28‰；2014年度收集标本28491例，阳性菌株9908株，CRE 45株，在阳性菌株检出率为4.54‰；2015年度收集标本31243例，阳性菌株11221株，CRE 62株，在阳性菌株检出率为5.52‰；检出的128株CRE菌株中，痰标本中检出23株，占18%，血液标本中检出44株，占34%，尿液标本中检出18株，占14%，引流液标本中检出26株，占20%，其它标本检出率13%；年度检出率中2013年度检出21株，占16%；2014年度检出45株，占35%；2015年度检出62株，占48%。药敏试验显示CRE菌株对目前常用碳青霉稀类的亚胺培南耐药率100%，美罗培南耐药率97.6%，厄他培南耐药率98.4%，耐药情况极为严重。结论：目前，CRE检出率呈逐年上升趋势，加强对产KPC酶的肠杆菌的检测与分析，掌握其耐药趋势，对院内感染的控制和临床抗感染治疗极为重要。
【关键词】 碳青霉稀酶；碳青霉稀类耐药的肠杆菌；耐药性；改良Hodge试验
【中图分类号】R197.323 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）09-0367-03
Penicillium 2013-2015-carbon thin in our hospital-resistant Enterobacteriaceae bacteria detection rate and and drug resistance analysis
Dong Xiutao1,Yang Le2,Ma Jianping2
The people,s hospital of Qianfoshan of Shandong province,Jinan 250014 ,china
【Abstract】Objective Analysis of hospital in the past 3 years carbapenem enzyme-producing Enterobacteriaceae detection rate and its drug resistance.Methods Retrospective methods 2013-2015detected in clinical samples of carbapenem enzyme-producing Enterobacteriaceae species and quantity analsis and analysis of drug resistance.Results 2013-2015-CRE 128 strains were detected which 2013-25122 specimens collected,positive number 9216,CRE detected 21 strains positive strain rate was 2.28‰;2014-28491 specimens collected,positive strains 9908 ,CRE 45 strains positive strain rate was 4.54‰;in2015-31243 specimens collected,11221-postive strains,CRE-62,positive samples,The detection rate is 5.52‰;128 CRE bacterium detected in sputum specimens were 23 strains 18%,44 strains have been detected in blood samples,34%,18 strains have been detected in urine specimens,14%,26 isolates drainage fluid sample,20%;detection rate of other sample 13%;2013 in the annual detection rate chenk 21,16%;2014 years chenk out 45,35%;2015 years chenk out62,48%;Drug sensitiviyy display,CRE strains currently used the carbapenem class of imipenem resistant 100%,meropenem-resistant 97.6%,Ernest he 98.4%,Imipenem resistance,drug resistance and its serious.Conclusion Current rate of CRE has an upward trend, strengthening of Enterobacteriaceae bacteria carbapenem enzyme-producing strain detection and analysis,control their drug resistance and resistance of nosocomial infection control and clinical treatment is extremely important.
碳青霉稀类抗菌药作为目前最强的抗革兰阴性杆菌抗菌药，在临床上应用广泛，但是，伴随着使用率的提高，耐药问题也随之而来。碳青霉稀类耐药在全球范围内广泛传播，并且检出率呈逐年上升趋势，给临床抗感染治疗带来极大挑战。随着碳青霉稀类抗生素的大量不合理使用，加速了对其耐药菌株的产生，目前，碳青霉稀类耐药的肠杆菌（CRE）已经大量出现。现对我院近3年来，所有临床送检标本分离的CRE菌株进行分析，总结如下。
1.材料与方法
1.1一般资料
收集我院2013年度到2015年度所有临床送检标本（包括血液、痰液、尿液、脑脊液、腹腔引流液等），病种主要包括：恶性肿瘤、尿毒症、糖尿病、心脏病、腹腔感染、泌尿系感染等，年龄14～101岁，平均年龄62岁；其中收集2013年度送检标本25112例，2014年度送检标本28491株，2015年度送标本31243例。
1.2 试剂与仪器
药敏纸片、M-H平板、E-test药敏条购自英国Oxoid公司，细菌鉴定仪采用法国梅里埃公司Vitek-2 Compact全自动细菌鉴定仪，标准菌株ATCC25922来自山东省临床检验中心。
1.3 方法
美罗培南、亚胺培南、厄他培南药敏采用K-B法、E-test和细菌鉴定仪MIC法等三种检测方法，用改良Hodge试验筛查碳青霉稀酶，质控菌株采用山东省临床检验中心提供的ATCC25922大肠埃希菌。
1.4 试验改良Hodge试验是美国临床实验室标准化委员会（CLSI）在2009年批准的检测肠杆菌科细菌碳青霉稀酶表型的楚昂贵方法。
1.4.1接种物：用生理盐水将ATCC25922标准菌株配制0.5麦氏浓度菌悬液，并做1:10稀释。
1.4.2操作步骤：按K-B法药敏操作方法将菌悬液涂布在M-H平板上，干燥3-10分钟，将10ugETP药敏片贴在平皿正中心，使用标准接种环挑取待测菌株或质控菌株，以药敏片为起点，离心方向划线。
1.4.3 培养条件 将平板放置35±2℃，培养16～20小时。
1.4.4结果判断 阳性：在被测菌株线与大肠标准菌株ATCC25922抑菌圈交汇处出现大肠杆菌生长增强现象，表明受检菌产碳青霉稀酶（KPC）；阴性：在被测菌株线与大肠标准菌株ATCC25922抑菌圈交汇处出现未出现大肠杆菌生长增强现象，表明受检菌不产产碳青霉稀酶（KPC）。
2.病原菌分布情况
2.1 表1 不同年度产KPC酶肠杆菌检出数量
3.讨论
2013-2015年度共检出CRE菌株128株；其中2013年度共收集标本25112例，阳性株数9216株，CRE检出21株，在阳性菌株检出率为2.28‰；2014年度收集标本28491例，阳性菌株9908株，CRE 45株，在阳性菌株检出率为4.54‰；2015年度收集标本31243例，阳性菌株11221株，CRE 62株，在阳性菌株检出率为5.52‰；检出的128株CRE菌株中，痰标本中检出23株,占18%，血液标本中检出44株，占34%，尿液标本中检出18株，占14%，引流液标本中检出26株，占20%，其它标本检出率13%；年度检出率中2013年度检出21株，占16%；2014年度检出45株，占35%；2015年度检出62株，占48%。
由此可见，CRE检出率呈逐年增加的趋势，目前所有的产KPC酶的肠杆菌中以肺炎克雷伯菌为主，其次为大肠埃希菌，以上两种细菌是医院感染常见菌，主要引起免疫力低下患者的各种感染，随着大量抗生素的不合理使用，使其耐药性更加严重，产KPC酶的菌株将会越来越多，将给临床抗感染治疗带来巨大挑战。从表2、表3中发现，各年度CRE菌株在阳性标本中的检出率成倍增长，并且以血液、引流液等无菌体液标本的检出率最高，从临床分离到革兰阴性杆菌中，肠杆菌科细菌感染占80%以上，将近50%的败血症和70%的泌尿系感染由肠杆菌科细菌引起，并且以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌引起的肠道外感染为主，因此加强对产KPC酶的肠杆菌的监测，对临床抗感染治疗至关重要。根据耐药情况分析，CRE菌株对目前常用的青霉素类、单酰胺类、头孢类、喹诺酮类、磺胺类抗生素均耐药，耐药率达100%;对碳青霉稀类的亚胺培南耐药率100%，美罗培南耐药率97.6%，厄他培南耐药率98.4%，耐药情况极为严重，临床治疗基本处于无药可用状态，感染死亡率较高。
近年来肿瘤和代谢性疾病不断增加，住院患者接受手术、化疗、器官移植、各种导管、抗肿瘤药、广谱抗菌药等，破坏了机体的免疫功能，导致多重耐药菌不断增加、细菌变异和耐药机制的改变等感染问题突出，严格控制抗生素的不合理使用，预防和控制多重耐药菌的传播，掌握细菌的耐药趋势，对抗感染治疗和降低院内感染率具有重要意义。
【参考文献】
[1]金炎，王勇等.碳青霉稀类耐药肺炎克雷伯菌引起的新生儿感染的耐药机制研究[J].中华医学杂志，2015年11月第38卷第11期：751-755页.
[2]倪语星，洪秀华.细菌耐药性检测与抗感染治疗[M].北京，人民军医出版社，2002:100.
[3]陈东科，孙长贵.实用临床微生物学检验与图谱[M].人民卫生出版社，2011年.791页.
[4]甘为，董秀涛.尿路感染常见病原菌种类及其耐药性分析[J].中国现代医生杂志，2011年2月第49卷第5期：63-64页.
[5]尚红，王毓三申子瑜.全国临床检验操作规程[M].人民卫生出版社,2015年.578-590页.
[6]范欣，徐英春，赵玉沛.新型碳青霉稀酶检测方法：Carba NP试验[J].中华医学杂志，2015年12月第38卷第12期：881-882页.
[7] Pasteran F,Mendez T, Guerriero L,etal.Sensitive screening tests for suspected class A carbapenemase production in species of Enterobacteriaceae[J].j Clin Microbiol,2009,47(6):1631-1639.
[8] Ambler RP.The structure of bata-lactamases[J].Philos Trans Rsoc Lond B Biol Sci,1980,289(1036):321-331.
[9] Queenan AM,Bush K.Carbapenmases:the Versatile B -Lactamases[J].Clin Microbiol Rev,2007,20(3):440-458.
[10]CLSI. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing twentieth informational supplement[S].CLSI document M100-S23.Wayne,PA:CLSI,2013.
[11]魏丹丹，刘洋，邓琼等.新德里I型金属?内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征及耐药机制[J].中华检验医学杂志，2014,37（10）：753-757.
[12]刘亚丽，王辉.新型金属?内酰胺酶-1的发现及其研究进展[J].中华检验医学杂志，2010,33（12）：1112-1115.
[13] CLSI.Performanee standards for antimiembial susceptibility testing:Twenty-first informational supplement.CLSI documentM11-S21. Wayne,PA:CLSI,2014.
[14] Chen Y,zhou Z,jiang Y,et al.Emergence of NDM-I-producing acinetobacter baumannii in china[J].j Antimicrob Chemother, 2011,66(6):1255-1259.
[15] Nordmann P,Naas T,Poirel L.Global spread of Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae [J].Emerg Infect Dis,2011,17(10):1791-1798.
论文作者:董秀涛1,杨乐2,马建萍1
论文发表刊物:《医药前沿》2017年3月第9期
论文发表时间:2017/4/5
标签：检出论文; 菌株论文; 标本论文; 年度论文; 阳性论文; 杆菌论文; 细菌论文; 《医药前沿》2017年3月第9期论文;