郭庆渠[1]2004年在《软坚护肝片对肝纤维化影响的实验研究》文中认为目的：探讨软坚护肝片对实验性肝纤维化大鼠的影响 方法：应用40％四氯化碳和酒精联合建立肝纤维化大鼠模型。第一阶段(预防肝纤维化实验)，取清洁级雌性Wistar大鼠38只，随机分成叁组，①正常组8只②未干预组15只③软坚护肝片干预组15只。未干预组、干预组按40％四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型，用花生油将四氯化碳稀释成40％的溶液，首次按体重5ml／kg皮下注射，以后3ml／kg注射，叁天一次，正常组以0.9％NaCl溶液2ml／只代替。在造模的同时软坚护肝片干预组给以软坚护肝片蒸馏水水溶液1.55g／kg.d，相当于生药量30.107g／kg.d，灌胃，5次／周。正常组与未干预组给以同等剂量的生理盐水灌胃。未干预组和软坚护肝片干预组长期饮用20％酒精。六周后未干预组大鼠、正常组和干预组大鼠，麻醉后腹腔内动脉采血，离心3000转／分，15分，取血清，留置—80℃冰箱保存，测透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、层粘连蛋白(LN)；切取肝叶组织放入10％中性磷酸福尔马林溶液中固定，进行病理切片，做HE染色，进行纤维化分期；胶原纤维Masson’s染色、VG染色，病理图像分析系统测定胶原纤维总面积和百分比。第二阶段(治疗肝纤维化实验)，大鼠58只，按上述方法制造肝纤维化模型，造模成功的肝纤维化大鼠再随机分成叁组：空白对照组、秋水仙碱组和软坚护肝片治疗组，治疗组给以软坚护肝片水溶剂灌胃，剂量同上，空白对照组以同等剂量的生理盐水做对照，秋水仙碱组给以秋水仙碱灌胃1.5mg／kg，5次／周。6周后按上述方式留取血清和肝组织做相同的指标测定。了解软坚护肝片对实验性肝纤维化大鼠的预防和治疗作用。 结果：①第一阶段(预防肝纤维化实验)：正常对照组及干预组与未干预组比较，血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ⅣC)和纤维增生程度、胶原纤维面积及所占百分比减少。②第二阶段(治疗肝纤维化实验)：治疗组和秋水仙碱组血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ⅣC)和胶原纤维增生程度、胶原纤维面积及所占百 分比较同期空白对照组明显下降，治疗组和秋水仙碱组无差异。结论: 1.软坚护肝片对大鼠肝纤维化形成有很好的预防作用 2.软坚护肝片可减少实验性肝纤维化大鼠肝脏胶原纤维的面积和降低血 清透明质酸、层粘连蛋白、IV型胶原水平。
汪永玲[2]2013年在《软坚护肝片的安全性评价和初步作用机制研究》文中研究说明目的：研究RJHGT对实验动物的急性毒性；观察软坚护肝片对实验动物的中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的影响；观察软坚护肝片对SD大鼠的长期毒性；研究RJHGT对HSC-T6细胞增殖的影响,研究RJHGT对抗纤维化相关基因mRNA表达的影响,探讨其可能预防肝纤维化的机制。方法：以最大给药量法测定RJHGT给予小鼠的急性毒性；实验动物随机分为对照组和RJHGT最大给药组,观察给药后急性毒性反应,比较两组小鼠体重增长,脏器局部解剖、脏器系数。以不同剂量软坚护肝片(0.31、0.62、1.24g/kg)对小鼠灌胃给药,观察软坚护肝片对小鼠自发活动和运动协调能力的影响；以不同给药剂量软坚护肝片(0.31、0.62、1.24g/kg)对麻醉大鼠十二指肠给药,观察软坚护肝片对大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压、心率、呼吸频率等各指标的影响。将160只大鼠随机分为4组(每组40只),分别为软坚护肝片低剂量组(1.24g/kg)、中剂量组(2.48g/kg)、高剂量组(4.96g/kg)和对照组：给药组每日灌胃1次,每周给药6d,连续27周,对照组灌胃等体积蒸馏水；观察大鼠一般状况、体重、摄食量,检查给药后14、27周及停药后4周末时实验大鼠的血常规、血液生化学、脏器体重比值、相关组织的系统解剖和病理组织学改变。体外培养HSC-T6细胞,采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测各RJHGT给药组对HSC-T6细胞的抑制作用：普通PCR法测定RJHGT对肝纤维化相关基因(PDGFR-β、TGF-β1、Smad3)表达的影响。结果：RJHGT给予小鼠口服最大给药量为19.84g/kg,实验期间体重增长正常,脏器系数与对照组无差异。软坚护肝片各剂量组对小鼠自发活动和运动协调能力无明显影响(P>0.05)；对麻醉大鼠呼吸频率无明显影响(P>0.05)；对麻醉大鼠大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压、心率、呼吸频率、呼吸幅度等各指标均无明显影响(P>0.05)。给药期间观察,RIHGT高中低剂量组动物和溶媒对照组一般状况良好,血常规、血液生化及脏器体重比值与溶媒对照组比较均无统计学意义(P>0.05),组织病理学检查未见异常改变。RJHGT各剂量组对HSC-T6细胞生长有抑制作用,与对照组相比,RJHGT对肝纤维化相关基因(PDGFR-β、TGF-β1、SMAD3)表达的影响不大。结论：RJHGT不会引起明显的急性毒性反应,软坚护肝片对心血管系统、呼吸系统、自主神经系统均无明显影响,软坚护肝片长期连续使用无明显毒性,安全性高。RJHGT预防肝纤维化的机制与肝纤维化相关基因PDGFR-β、GF-β1、Smad3无明显关系。
莫凤珍, 孔晓龙, 陈方, 汪永玲, 梁凯[3]2013年在《软坚护肝片对大鼠肝纤维化的治疗作用》文中指出目的探讨软坚护肝片对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用及其可能的作用机制。方法将90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、扶正化瘀胶囊阳性对照组和软坚护肝片1.24、0.62和0.31g/kg剂量组,除正常对照组外,其余各组采用CCl4灌胃建立大鼠肝纤维化模型共12周,于第9周治疗组每天灌喂软坚护肝片(1.24、0.62和0.31g/kg)和扶正化瘀胶囊(0.20 g/kg)干预8周。实验结束后检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(Alb)、透明质酸(HA)和Ⅲ型前胶原酶(PCⅢ)的水平,以及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量和肝指数。HE染色观察各组大鼠肝纤维化程度。结果与模型组比较,各剂量的软坚护肝片及扶正化瘀胶囊能显着降低大鼠血清中ALT、AST、HA和PCⅢ的水平,降低肝组织中异常升高的Hyp含量(P<0.05);同时,各剂量的软坚护肝片能显着提高大鼠血清中的Alb含量(P<0.05)。软坚护肝片各剂量组大鼠肝脏纤维化程度明显减轻。结论软坚护肝片有一定的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与降低胶原的合成及抗自由基有关。
莫凤珍[4]2013年在《软坚护肝片的药效学初步研究》文中提出目的：研究软坚护肝片(RJHGT)对小鼠化学性肝损伤,免疫性肝损伤、肝纤维化的保护作用及对HSC-T6细胞相关基因mRNA表达的影响。方法：1.昆明种小鼠随机分为正常对照组(NC),损伤模型组,联苯双酯阳性对照组(0.15g/kg),RJHGTH、RJHGTM、RJHGTL(1.24,0.62,0.31g/kg)剂量组。分别采用0.2%四氯化碳(CCl4)300mg/kg对乙酰氨基酚(AP)和800mg/kgD-半乳糖胺盐酸盐(D-GalN)腹腔注射小鼠,建立化学性肝损伤模型。观察胸腺及肝脾重量指数；测定血清AST、ALT、ALP活性及T-AOC;肝组织MDA、SOD、GSH、GSH-PX含量。HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。2.采用小鼠尾静脉注射ConA建立肝损伤模型,观察RJHGT对小鼠血清ALT、AST、TNF-α、IFN-γ的活性,肝组织体NO、MDA、GSH含量和SOD活性,HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。3.肝纤维化实验中造模组大鼠采用50%CCl4花生油溶液灌胃造模,每周两次,共12周,正常组用花生油代替。于第9周开始,将造模组分为5组分为模型组、扶正化瘀胶囊组、RJHGT H、RJHGT M、RJHGTL组,除正常对照组和模型组外,治疗组每天灌喂软坚护肝片2个月。实验结束后分别观察胸腺及肝脾重量指数；检测大鼠血清中ALT、AST、Alb、HA、PCⅢ的水平和肝组织中Hyp的含量。HE染色观察各组大鼠肝脏纤维程度。4.体外培养HSC-T6细胞,RT-PCR法测定RJHGT对肝纤维化相关基因(TIMP-1、TNF-α、TLR4)表达的影响。结果：1.与模型组比较,RJHGT能降低血清ALT、AST、ALP水平,TNF-α IFN-y活性,肝纤维化诊断指标HA和PCⅢ的含量,提高血清T-AOC和Alb的含量(P<0.05或P<0.01)。2.与模型组比较,RJHGT能降低肝组织中MDA和NO含量；增加肝组织SOD、GSH、GSH-PX活性,降低肝组织中的异常升高的Hyp含量(P<0.05或P<0.01)。3.病理组织学结果表明,RJHGT能够减轻肝细胞损伤程度。4. RJHGT可显着下调TIMP-1、TNF-amRNA的表达(P<0.05),而对TLR4mRNA表达的影响不大结论：1.RJHGT对肝损伤及肝纤维化的发生具有一定的抵抗作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用,降低胶原的合成有关。2.RJHGT可抑制肝星状细胞增殖,并抑制的金属蛋白酶组织抑制因子和炎性因子的生成、促进ECM的降解,这可能是其抗肝纤维化的作用机制之一。
孙振[5]2010年在《软肝方与介入疗法治疗根治术后小肝癌的长期疗效比较及影响因素分析》文中认为目的：比较软肝方(原名软坚护肝片)与介入疗法治疗根治术后小肝癌的长期疗效差异,验证“根治术后小肝癌患者使用中医药预防其复发的效果会比介入疗法更好”的假说。方法：在导师治疗肝癌遣方用药经验总结和我研究中心前期临床研究的基础上建立“根治术后小肝癌患者使用中医药预防其复发的效果会比介入疗法更好”的假说。通过病案信息科计算机数据库,使用国际疾病分类(ICD)编码查询1987.1-2008.12期间在广西医科大学第一附属医院肝胆外科和微创肿瘤外科病房行手术切除的所有原发性肝癌患者,手术标本均经病理检查证实为肝细胞癌,最终将399例根治术后小肝癌患者纳入验证假说的队列,其中346例为男性患者,53例为女性患者。按照根治术后小肝癌患者接受TCM治疗的暴露程度不同分为四组：(1)TCMO组(2)TCM与介入治疗术联合组(TCM-IT)(3)介入治疗组(ITO)(4)单纯手术组(SO)。生存率评估采用Kaplan-Meier生存分析法,组间生存率的差异比较采用Log-rank检验,寿命表法估算逐年复发率。预后多因素分析采用Cox比例风险模型回归分析,通过最终长期生存率结果比较,验证假说的成立。结果：对住院行根治术的399例小肝癌患者进行回顾性队列研究,随访至2009-02-28。对所有患者的基线资料进行分析,仅在肿瘤位置上四组差异有统计学意义(P=0.036)。TCMO组与ITO组1,2,3,5、10、15年总生存率(OS)分别为94.76%vs91.85%、91.69% vs74.42%、89.27% vs55.74%、83.94% vs45.50%、71.22%vs33.34%、55.58% vs9.26%(p=0.000,HR=0.210,95%CI:0.126-0.348),两组1,2,3,5、10、15的无病生存率分别(DFS)为85.30% vs81.60%、81.40% vs73.10%、76.10% vs57.10%. 69.80% vs45.00%、54.00% vs30.80%、44.50% vs0%(p=0.001,HR=0.518,95%CI: 0.341-0.788);TCMOvsTCM-IT组1,2,3,5、10、15年总生存(OS)率分别为94.76%vs98.53%,91.69% vs93.38%,89.27% vs87.54%,83.94% vs74.16%,71.22% vs57.10%,55.58% vs0%(Log Rank检验x2=2.365,p=0.124)；两组1,2,3,5、10、15年无病生存(DFS)率85.30% vs92.50%,81.40% vs83.30%,76.10% vs83.30%,69.80% vs76.20%, 54.00% vs62.20%,44.50% vs0%, (Log Rank检验x2=0.710,p=0.399)。两组(OS)率和(DFS)率比较差异无统计学意义；TCM-IT组总生存率和无病生存期率均高于ITO组,差异有统计学意义(P<0.05);TCMO组总生存率、无病生存率均高于SO组,差异有统计学意义(P<0.05)；ITO组总生存率高于SO组,差异有统计学意义(P<0.05)；ITO组vs SO组生存率无病生存率统计数据显示无明显差异(P>0.05)。总的中位生存时间分别是151.20月(TCM-IT组)、43.87月(ITO组)、20.77月(SO),而TCMO组由于各时间段对应的生存率均大于50%。中位无病生存时间分别是152.900月(TCMO组),51.733月(ITO组),76.667月(SO组)(P<0.0001),而TCM-IT组由于各时间段对应的无病生存率均大于50%; TCMO组vs ITO组1,2,3,5年逐年复发率为15% vs19%、5% vs100%、4% vs12%、5%vs4%(P=0.002),两组差异有统计学意义。单因素分析显示与总生存期(OS)相关的预后因素分析是：家族史、球蛋白、肿瘤个数、血管侵犯、肿瘤位置、child分级、TNM分期、治疗方式(P<0.05)。Cox多因素分析结果显示治疗方式、肿瘤大小、就医方式、TNM分期、家族史、性别6个变量为影响根治术后小肝癌患者生存期(OS)的独立风险因素；Cox多因素分析显示就医方式、性别、以及group 1 (TCMO group versus ITO group) (HR=0.210,95%CL 0.126-0.348)、group3 (TCM-IT group vs ITO group) (HR=0.294,95%CL 0.174-0.496)的回归系数均<0是保护因素,其中ITO组的死亡风险均高于TCMO组、TCM-IT组,分别是TCMO组,TCM-IT组的4.76倍、3.40倍。而group2 (SO group versus ITO group) (HR=2.613,95%CL 1.663-4.106)、肿瘤大小、TNM分期、家族史的回归系数>0是危险因素,其中SO组死亡风险是ITO组的2.613倍。单因素显示与无病生存期(DFS)相关的预后因素具体为：年龄、AFP、肿瘤包膜、TNM分期、治疗方式(P＜0.05); Cox多因素分析结果显示治疗方式和TNM分期2个变量为影响肝癌无病生存期的独立风险因素,其中group1 (TCMO versus ITO group)属保护性因素(P=0.002,HR=0.518,95%CL0.341-0.788),显示介入治疗组复发风险是TCMO组1.93倍；group2(SO group versus ITO group) (HR=1.107,95%CL0.609-2.011)是危险因素,显示单纯手术组复发风险是介入治疗组的1.107倍；：group3 (TCM-IT group vs ITO group)属保护性因素(P=0.001,HR=0.401,95%CL0.233-0.690),介入治疗组复发风险是联合治疗组的2.49倍。结论：长期口服软肝方能够明显延长根治术后小肝癌患者的无病生存时间和总生存时间、降低复发率,其结果有待于进一步前瞻性随机对照研究验证。
梁水庭, 巫山, 林进令, 黎乐群, 陆云飞[6]1997年在《软坚护肝片的护肝及抗乙肝病毒作用的实验研究——附74例乙肝病毒携带者疗效观察》文中提出通过软坚护肝片对能产生全部乙肝病毒指标细胞株的抑制试验和临床初步应用的结果，说明该药有抑制乙肝病毒ＨＢｅＡｇ，ＨＢｓＡｇ的作用，治疗指数（ＴＩ）分别为＞５．７４及＞１０．２１（ＴＩ＞２为有效）。临床应用的ＨＢｓＡｇ转阴率为２８％—５７％，ＨＢｅＡｇ转阴率达７８％，动物实验结果表明：软坚护肝片有减轻ＣＣｌ４及硫代乙酰胺所致小鼠急性肝损伤的作用，有减轻Ｄ—氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤的作用，其降低小鼠血清ＡＬＴ活性的作用，并非通过直接抑制ＡＬＴ而产生，对正常小鼠的血清ＡＬＴ活动无明显影响。此外，尚有提高小鼠碳粒廓清能力及血清溶血素生成的作用。
汪永玲, 孔晓龙, 莫凤珍, 梁凯, 覃振明[7]2013年在《软坚护肝片对SD大鼠的长期毒性研究》文中指出目的观察软坚护肝片对SD大鼠的长期毒性。方法将160只大鼠随机分为4组(每组40只),分别为软坚护肝片低剂量组(1.24g/kg)、中剂量组(2.48g/kg)、高剂量组(4.96g/kg)和对照组。给药的叁组每日灌胃1次,每周给药6d,连续26周;对照组等体积蒸馏水灌胃。观察大鼠一般状况、体重、摄食量等变化,给药后13、26周及停药后4周时检查大鼠的血液学、血液生化学、脏器系数和组织病理学改变。结果各剂量组动物一般状况良好,血液学、血液生化学及脏器系数与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),组织病理学检查未见异常改变。结论软坚护肝片在临床剂量范围内毒性小,用药安全。
梁水庭, 覃晓, 巫山, 陆云飞, 黎乐群[8]1997年在《软坚护肝片对慢性乙肝及乙肝“大叁阳”的疗效分析(附动物实验研究)》文中研究说明应用中药软坚护肝片治疗７４例乙肝“大叁阳”（其中３８例为慢性乙肝或伴肝硬化）。结果ＨＢｅＡｇ转阴率为７８％，ＨＢｓＡｇ转阴率为４３％。对慢性乙肝或伴肝硬化的有效率为８１．５％。为证实该药的可靠性，作者进行了动物实验研究，证明软坚护肝片具有抗ＨＢＶ及护肝作用。
汪永玲, 孔晓龙, 莫凤珍, 梁凯, 覃振明[9]2013年在《软坚护肝片的急性毒性及一般药理学研究》文中指出目的观察软坚护肝片对实验动物的急性毒性及中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的影响。方法小鼠20只,按最大给药量法给予软坚护肝片(19.84 g/kg),2次/d,14 d后观察急性毒性反应;不同剂量软坚护肝片(0.31、0.62、1.24 g/kg)分别给予各组小鼠灌胃给药,观察小鼠自主活动和运动协调能力;不同给药剂量软坚护肝片(0.31、0.62、1.24 g/kg)分别给予各组麻醉大鼠十二指肠给药,观察大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压、心率、呼吸频率、呼吸幅度。结果软坚护肝片19.84 g/kg灌胃给药14 d后,小鼠无毒性反应。软坚护肝片各剂量组对小鼠自主活动和运动协调能力无明显影响(P>0.05);对麻醉大鼠血压、平均动脉压、心率、呼吸频率、呼吸幅度均无明显影响(P>0.05)。结论软坚护肝片对实验动物心血管系统、呼吸系统、自主神经系统均无明显影响。
莫凤珍, 孔晓龙[10]2015年在《软坚护肝片对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用》文中研究指明目的观察软坚护肝片(RJHGT)对刀豆蛋白A(Con A)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法将60只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、RJHGTH组、RJHGTM组、RJHGTL组,每组10只;正常组和模型组以0.2 ml/10 g生理盐水灌胃,阳性对照组给予联苯双酯0.15 g/kg灌胃,RJHGTH组、RJHGTM组、RJHGTL组以0.2 ml/10 g分别给予RJHGT溶液1.24、0.62、0.31 g/kg灌胃,1次/d,连续7 d。末次给药后4 h,正常组尾静脉注射生理盐水,其余各组尾静脉注射Con A制备小鼠免疫性肝损伤模型。检测各组小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)、ALT、AST等水平;检测肝组织谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)等指标。结果与模型组比较,各浓度RJHGT组小鼠血清ALT、AST、TNF-α、IFN-γ水平及肝组织中MDA、NO含量均降低,肝组织SOD和GSH水平均升高(P<0.05)。结论 RJHGT对免疫性肝损伤小鼠具有一定的保护作用。
参考文献：
[1]. 软坚护肝片对肝纤维化影响的实验研究[D]. 郭庆渠. 广西医科大学. 2004
[2]. 软坚护肝片的安全性评价和初步作用机制研究[D]. 汪永玲. 广西医科大学. 2013
[3]. 软坚护肝片对大鼠肝纤维化的治疗作用[J]. 莫凤珍, 孔晓龙, 陈方, 汪永玲, 梁凯. 国际药学研究杂志. 2013
[4]. 软坚护肝片的药效学初步研究[D]. 莫凤珍. 广西医科大学. 2013
[5]. 软肝方与介入疗法治疗根治术后小肝癌的长期疗效比较及影响因素分析[D]. 孙振. 第二军医大学. 2010
[6]. 软坚护肝片的护肝及抗乙肝病毒作用的实验研究——附74例乙肝病毒携带者疗效观察[J]. 梁水庭, 巫山, 林进令, 黎乐群, 陆云飞. 中医药研究. 1997
[7]. 软坚护肝片对SD大鼠的长期毒性研究[J]. 汪永玲, 孔晓龙, 莫凤珍, 梁凯, 覃振明. 中国临床新医学. 2013
[8]. 软坚护肝片对慢性乙肝及乙肝“大叁阳”的疗效分析(附动物实验研究)[J]. 梁水庭, 覃晓, 巫山, 陆云飞, 黎乐群. 广西医科大学学报. 1997
[9]. 软坚护肝片的急性毒性及一般药理学研究[J]. 汪永玲, 孔晓龙, 莫凤珍, 梁凯, 覃振明. 广西医学. 2013
[10]. 软坚护肝片对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用[J]. 莫凤珍, 孔晓龙. 广西医学. 2015