李桃
（江苏省南通市肿瘤医院肿瘤内科 江苏 南通 226001）
【摘要】目的：探讨培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌NSCLC的疗效及预后因子。方法：回顾性分析2016年7月-2018年6月在南通市肿瘤医院接受培美曲塞联合顺铂一线化疗的100例ⅢB期、Ⅳ期NSCLC患者。采用荧光定量PCR方法检测患者外周血TS、DHFR基因表达情况，研究各项指标与NSCLC治疗疗效的关系。同时选取 98例健康体检者的外周血样本作对照。结果：100例 NSCLC患者接受培美曲塞单药或联合治疗，无CR病例，PR 25例，SD 45例，PD 30例。25例化疗敏感者的DHFR 水平为(0.21±0.11)pmol/L，75例化疗抵抗者的DHFR水平为(0.41±0.18)pmol/L，组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论：外周血TS 可作为预测培美曲塞化疗晚期肺癌预后的分子标志，DHFR可能作为近期疗效的预测因子。
【关键词】培美曲塞；胸苷酸合成酶；二氢叶酸还原酶；非小细胞肺癌
【中图分类号】R734.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）27-0213-02
培美曲塞作为一种多靶点抗叶酸药，在晚期NSCLC肺腺癌中取得了较好的疗效，临床中需筛选出培美曲塞优势人群。研究发现，培美曲塞通过以下靶点发挥作用：胸苷酸合成酶（TS）、二氢叶酸还原酶（DHFR）、甘氨酸核糖核苷甲酰基转移酶（GARGT）和氨基咪唑羧酰胺核苷甲酰基转移酶（AICARFT），以上药物的作用位点，可能为本研究提供有效的疗效预后标志[1]。
1.对象与方法
1.1 研究对象
选择100例2016.7-2018.06年南通市肿瘤医院住院的接受培美曲塞治疗的初治晚期NSCLC 患者。组织类型明确，PS0-1分。
1.2研究方法
1.2.1化疗方案 100例患者均接受以培美曲塞联合顺铂（cisplatin， DDP）或卡铂（carboplatin，CBP）为主的方案化疗。两周期进行疗效评价，分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、稳定（SD）和进展（PD）。如出现CR、PR为对化疗敏感；如为SD或PD，则对化疗不敏感。
1.2.2基因检测 采用荧光定量PCR方法检测患者化疗前外周血中TS、DHFRmRNA的表达水平。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆抽取每位受试者的外周静脉血5ml，EDTA抗凝。用淋巴细胞分离液分离出白细胞。按Trizol试剂说明提取总RNA，-80℃保存备用。cDNA合成反应体系：5×逆转录buffer（含有探针）4μl、上游引物（10pmol/μl）0.4μl、下游引物（10pmol/μl）0.4μl、dNTPs（10mmol/μl）0.2μl、逆转录酶（200U/μl）1μl、DEPC水9μl、RNA模板5μl、总体积20μl。每个样本重复测量3次。分别以2种基因表达的Ct值的平均值作为分界点。另选取同期100例健康体检者外周血作对照。
1.2.3统计学处理 使用SPSS21统计软件。TS、DHFR基因表达情况与化疗疗效的相关性分析采用卡方检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 循环TSmRNA、DHFRmRNA与NSCLC疗效的关系
NSCLC组血清TSmRNA组的表达为0.88±0.12，对照组的TSmRNA水平为2.23±0.21，血清DHFRmRNA的表达为0.25±0.16，对照组的DHFRmRNA水平为1.23±0.22，NSCLC组的TSmRNA、DHFRmRNA水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。100例NSCLC患者无CR，PR 25例，SD 45例，PD 30例。25例化疗敏感者的TS水平为（0.67±0.19）pmol/L，75例化疗抵抗者的TS水平为（1.59±0.18）pmol/L，组间差异有统计学意义（P＜0.05）。25例化疗敏感者的DHFR 水平为（0.21±0.11）pmol/L，75例化疗抵抗者的DHFR水平为（0.71±0.18）pmol/L，组间差异有统计学意义（P＜0.05） 。
3.讨论
TS是培美曲塞治疗作用机制中的主要靶点，TS表达与培美曲塞的敏感性相关，即TS表达越高，培美曲塞的敏感性越低[2]。TS表达检测需要肺癌组织，其来源相对困难。而培美曲塞的另一个关键靶点，二氢叶酸还原酶基因（DHFR）是生物体内重要的酶，Levy等[3]回顾性研究发现，40例白血病患儿显示DGFR活性与患者预后相关，通常表达活性高的患者预后差。
本研究发现，25例化疗敏感者的DHFR水平为（0.21±0.11）pmol/L，75例化疗抵抗者的DHFR水平为（0.41±0.18）pmol/L，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示外周血循环TS可作为预测应用培美曲塞化疗晚期肺癌患者预后的分子标志，DHFR可能作为近期疗效的预测因子。因此，晚期肺腺癌外周血循环中检测TS及DHFR转录水平对培美曲塞治疗疗效的预测有一定的价值，通过可检测的临床指标，筛选优势人群，使化疗更具针对性。
【参考文献】
[1] Lee SH,Noh KB,Lee JS,et al.Thymidylate synthase and ERCC1 as predictive markers in patients with pulmonary adenocarcinoma treated with pemetrexed and cisplatin[J].Lung Cancer,2013,81(1) :102-108.
[2] Levy AS,Sather HY,Steinherz PG,et al.Reduced folate carrier and dihydrofolate reductase expression in acute lymphocytic leukemia may predict outcome:a Children Cancer Group Study[J].J Peditar Hematol Oncol,2003,25(9):688-695.
论文作者:李桃
论文发表刊物:《医药前沿》2018年27期
论文发表时间:2018/11/22
标签：疗效论文; 水平论文; 统计学论文; 患者论文; 晚期论文; 肺癌论文; 南通市论文; 《医药前沿》2018年27期论文;