PCR检验在肺结核早期诊断中的临床效果分析论文_李天阳 黄涛

李天阳 黄涛（江西省高安市人民医院；江西高安330800）【摘要】目的：探讨PCR检验在肺结核早期诊断中的临床应用效果。方法：选择我院2018年1月~2019年6月期间收治的早期肺结核患者，共计60例，先后为这些患者应用PPD皮肤结核菌素纯蛋白衍生物检验诊断和PCR聚合酶链式反应检验法诊断，对比两种检验方法下早期肺结核患者的阳性率及ROC曲线下AUC面积。结果：PCR诊断方法的阳性例数为62例，阳性率为86.7%，PPD法的诊断阳性例数是26例，阳性率为43.3%，两组数据比较存在显著统计学差异（P<0.05）。而PCR检验方法应用的AUC诊断价值为（0.813±0.145），高于PPD检验方法应用的AUC诊断价值（0.522±0.105），P<0.05。结论：诊断早期肺结核应用PCR检验的检出率和准确率较高，具有很高的应用价值，值得广泛推广和应用。【关键词】PCR检验;PPD检验;肺结核早期诊断;应用价值治疗临床上，肺结核疾病比较常见，是因结核分枝杆菌导致患者出现肺部感染性疾病，传染性非常强，患者临床表现包括咳嗽、咳痰、发热、胸痛、咯血、呼吸困难等等，对患者的生活质量产生影响，甚至威胁患者生命安全[1]。肺结核患者早期临床症状不典型，较为隐匿，需要依靠准确有效的诊断结果为后续的治疗提供依据。在诸多的检验方法中，PCR聚合酶链式反应检验是通过放大扩增特定DNA片段用以检验的分子生物学技术，能够复制生物体外特殊NDA，其具备的最大优势为大幅度增加微量DNA，提高肺结核疾病的诊断准确性。为进一步探讨应用PCR诊断早期肺结核疾病患者的效果，本研究选择60例我院近两年收治的早期肺结核患者，对其一般资料进行分析，现报告如下。1.资料与方法1.1一般资料选入我院收治的60例早期肺结核患者，患者及其家属均知晓本研究的开展流程并签署知情同意书，排除精神疾病患者、心肝肾严重疾病患者以及配合度低，不签署知情同意书的患者，本研究经医院伦理委员会批准。60例患者中，男41例，女19例，年龄22岁~73（47.3±10.2）岁，病程2个月~8（6.1±1.9）个月。1.2诊断方法我院为60例患者提供PPD方法进行诊断，采用稀释生理盐水（国药准字S10960017 北京祥瑞生物制品有限公司），取0.1ml于患者前臂进行皮内注射，在48~72h内记录发生反应的面积。随后提供PCR方法进行诊断，在患者清晨咳嗽后取0.5ml第一口痰液放入容器中，加入5μL浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液，充分混合后放置的37°C环境下静置40min。通过离心机调试10000r/min并持续5min进行混合液的离心操作，将清液混合后再采用生理盐水将其洗脱。取患者1ml血清与1ml胸水，再进行离心沉淀处理，与上述操作方法一样，加入50ml裂解液进行10min沸水浴，加入0.2μL15μL反应液均匀混合，同时加入20μL石蜡油进行封顶，最后，将5μL上清液加入其中使其形成TB-DNA模板。不同温度下进行35次循环扩增，取20mlPCR扩增液电泳处理。1.3观察指标对比患者应用PCR检测与PPD检测的阳性率，其中PCR检测阳性表示在紫外线下160bp橙黄色荧光带，PPD检测阳性表示72h内可观察患者局部肿结直径在5~10mm范围。同时对比两种诊断方法的应用价值[2]，通过ROC工作特征曲线分析，ROC曲线下面积AUC的达标诊断应用越有价值。1.4统计学方法本研究采用SPSS19.0统计学软件对相关数据进行处理，计数资料以百分比表示，计量资料以均数±标准差表示，分别采用x2与t进行检验，P<0.05表示比较差异具有统计学意义。2.结果2.1阳性率指标采用PCR诊断阳性率为86.7%，比PPD诊断的43.3%的阳性率更高，差异具有统计学意义（P<0.05）。2.2应用价值经检验，PCR检验方法应用的AUC诊断价值为（0.813±0.145），PPD检验方法应用的AUC诊断价值为（0.522±0.105），低于PCR的诊断价值，P<0.05。3.讨论这些年来，伴随着环境污染加剧，世界范围内诱发了很多传染病并出现了广泛的传播和转移，导致目前临床上肺结核疾病患者的总量越来越多。结核病属于一种结核杆菌导致的传染性疾病，会直接损伤人体的很多器官，最为典型的就是肺结核，目前肺结核疾病已经成为我国公共卫生防治最主要的疾病之一，引起越来越多人的关注。肺结核疾病在早期无特异性的表现，很多患者甚至没有其他症状反应，疾病的隐蔽性较高，因此很容易造成误诊和漏诊的情况，延误患者的后续治疗和疗效，而一旦起病为急性，那么相应的症状就会危重，严重的还将导致患者死亡。长期以来，大量的临床实践均证实[3]，对于肺结核患者要尽早明确诊断病情和发展的态势，及时采取有效的治疗方法，才能最大程度保障患者的健康和安全。目前，临床上针对肺结核患者的检验方法与手段很多，不同的方法操作过程、便捷性、有效性、检查成本均不同，当前最为常见的方法包括痰涂片结核菌检验法、抗原胶体金法、皮肤结核菌素纯蛋白衍生物检验法以及聚合酶链式反应检验法。有研究显示[4]，诸多学者认为应用痰涂片法为患者进行肺结核疾病的诊断，准确性较高，但如果检验疑似对象处于早期发病阶段，那么对应的检出率与准确率比较低。抗原胶体金法会因患者血液的免疫抑制因子及结核抗体等因素的直接影响，检验过程中也常发生误诊或漏诊的情况，诊出率与准确性得不到保障。将皮肤结核菌素纯蛋白衍生物检验法应用在早期肺结核的诊断临床上，要求筛选患者结核感染的指标，在操作上较为简洁方便。在本研究中，对60例肺结核患者采用皮肤结核菌素纯蛋白衍生物检验法进行检查诊断的阳性有26例，阳性率为43.3%，这表明早期诊断肺结核患者应用皮肤结核菌素纯蛋白衍生物检验法有一定的效果，从判断患者是否有肺结核感染着手，在诊断上有一定的准确性，具有一定的临床应用价值。有临床研究显示[5]，采用皮肤结核菌素纯蛋白衍生物检验法检验的机理为患者机体感染结核杆菌后，机体中会出现致敏淋巴细胞，这种细胞有识别结核杆菌的能力，因此如果遇到少量的结核菌素，致敏淋巴细胞就能通过刺激患者机体释放更多淋巴因素，那么患者的血管通透性大幅度增加，同时也将出现皮肤局部反应。皮肤结核菌素纯蛋白衍生物检验法检验结果并不高，可能与出现假阴性以及部分患者感染中未产生变态反应有关。而本研究应用PCR检验法阳性率达到86.7%，这一检查方法主要检测患者结核菌基因片段，有着较高的特异性、灵敏度以及准确度，能够有效避免未产生变态反应、体内因子与抗体产生的影响，因此患者阳性检查率比较高。另外，该方法还能通过将结核菌特异性荧光探针和结核菌特异性引物在PCR反应液等成分处理下，再行体外扩增法对结核菌DNA进行检测，以患者是否被感染判断结果。因此，PCR检验法的AUC诊断价值较高，高于PPD检验法的AUC诊断价值，P<0.05。本研究中对比PCR检验法与PDD检验法在肺结核患者早期诊断中的阳性率与诊断价值，均一一证实PCR检验法的有效性综上所述，采用PCR检验法为肺结核患者提供早期的诊断，阳性检出率高，准确率高，在与PDD检验法的对比中证实检验价值更高，有助于尽早确定患者的疾病与发展情况，为后续尽早治疗奠定基础，保障较好的疗效，因此值得在临床上广泛推广和应用。【参考文献】[1]黄杰,曾成林,陈博智.两种检验方法在肺结核早期诊断中的应用比较[J].临床医学工程,2017,24(12):1703-1705.[2]韦惠玲.两种检验方法在肺结核早期中应用及预防研究[J].河南预防医学杂志,2016,27(5):345-346.[3]杨萍,闫国蕊,王勇鸣.3种结核抗体检测方法对结核病诊断价值对比分析[J].河南预防医学杂志,2013,23(6):465-466.[4]赵楠.肺结核早期诊断中不同检验方法的应用分析[J].蛇志,2018,30(3):477-478.[5]汪峻岭,李照丹,徐兴伟.PCR技术、抗酸染色法在肺结核病理学诊断中应用比较[J].中外医疗,2016,35(15):77-78.

论文作者:李天阳 黄涛

论文发表刊物:《医师在线》2019年11月22期

论文发表时间:2020/4/17

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