徐宁 毛小明（通讯作者）
（安庆医药高等专科学校 安徽 安庆 246052）
【摘要】 目的：探讨甘草饮片中甘草酸的含量测定方法，方法：采用乙醇回流提取法提取甘草酸，并采用紫外分光法测定其含量，结果：甘草饮片中甘草酸在0.50～2.50mg/ml范围内线性关系良好，r=0.9994，平均回收率为98.88% RSD为1.47%（n=5）结论：本测定方法快速可靠，可较好控制甘草饮片的质量
【关键词】 甘草酸；甘草饮片；紫外分光法；含量测定
【中图分类号】R927.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）17-0328-02
甘草别名为甜草根为豆科多年生草本植物Glycyrrhiza.uralensis,账果甘草Glycyrrhiza inflate.Bat，感光果甘草Glycyrrhiza.glabra.L的干燥根及根茎，是一种常用药物，被冠以“众药之王”称号，其药用价值倍受人们广泛关注，具有补脾益气，清热解毒，止咳祛痰，和中润肺，调和诸药之功效[1]。主要化学成分为三萜皂甙类：甘草甜素（甘草酸）、甘草次酸和甘草酸的钾钙盐。黄酮类化合物：甘草甙、甘草甙元等[2]。甘草酸具有保肝、抗炎、抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等作用[3]，甘草酸的乙醇和氢氧化铵溶液与H2SO4、香兰醛试液显色，在波长544nm处有最大吸收[4]。
1.材料
1.1 药品与试剂
甘草饮片（上海医药公司安庆分公司提供并鉴定），甘草酸单铵盐标准品（中国药品生物制品检定所批号110731-201215），香兰醛试液（上海化学试剂分装厂），乙醇、硫酸、氢氧化铵均为国产分析纯试剂
1.2 仪器
760CRT双光束紫外分光光度计（上海精密科学分析仪器厂），天然药物提取分离设备
2.方法与结果
2.1 标准曲线方程的绘制
以甘草酸单铵盐为标准品，于80℃真空干燥2h后，精密称定，以80%乙醇为溶剂，配成每ml含1mg的标准溶液。精密吸取0.50、1.00、1.50、2.00及2.50ml,分别置10ml具塞试管中，加入80%乙醇稀释至总体积为5.0ml,并以80%乙醇为空白，各加香兰醛试液0.5ml混合，置水浴中，小心加入70%硫酸5.0ml混合，60℃保温20min,冷至室温后，于波长544nm处分别测定吸光度得回归方程为y=2.34x-0.72(x为mg/ml)r=0.9994,线性范围0.50～2.50mg/ml。
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2.2 甘草酸的提取方法
称取甘草饮片细粉（40目）2.0g，置沙化提取器中，乙醚脱脂2～3h，挥去乙醚，再用80%乙醇回流提取[5]，提取液定量转移至50ml容量瓶中，用80%乙醇稀释至刻度备用。
2.3 聚酰胺柱预处理
取2.0g聚酰胺粉，置小烧杯中，以少量蒸馏水悬浮，装入底部有棉花的小层析柱中（柱内径7～8mm,长140mm）,用95%乙醇洗至流出液澄清后备用[6]。
2.4 供试品溶液制备
精密吸取2.2甘草酸提取液2.0ml加在聚酰胺柱上端，待溶液流至柱低上约0.5mm处，用中性乙醇洗至不出现黄色为止，继用1mol/L氢氧化铵乙醇溶液洗净甘草酸[7]，以80%乙醇作为空白溶液，同法处理后作为空白对照。
2.5 精密度试验
精密吸取供试品溶液2.0ml（1mg/ml），以标准曲线方程绘制项下操作显色后，分成6份，在平行操作下于544nm波长处测定其吸收度，结果RSD为0.74%，表明本方法的精密度良好。
2.6 稳定性试验
精密吸取供试品溶液2.0ml（1mg/ml），以标准曲线方程绘制项下操作显色后，分别于0h、2h、4h、6h、24h后，在544nm波长处测定其吸收度，结果见表1
表1 甘草酸稳定性试验测定结果（n=5）
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2.8 供试品测定
精密吸取供试品溶液2.0ml，80%乙醇溶解，再加试剂显色后，以80%乙醇作空白，在波长544nm处测定吸光度，计算含量
3.结论与讨论
本实验采用氨性乙醇回流提取甘草饮片中甘草酸，采用聚酰胺柱洗脱分离法提纯甘草酸，收率最高，可比水提法提高3倍以上[8]，结果比较理想，甘草酸在一定浓度范围内是符合朗伯-比尔定律，采用紫外-可见分光法测定其含量，简便可靠，可较好的控制药材质量。甘草酸含量测定方法很多，其中紫外-可见分光法更适合对甘草饮片进行质量的初步控制。
【参考文献】
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[2] 李薇，宋新波，张丽娟等.甘草中化学成分研究进展[J].辽宁中医药大学学报，2012,14（7）：40-42.
[3] 木其尔，刘有平，李萌等.甘草酸单铵盐中有关物质的LC-MSn研究[J].中国医药工业杂志，2009,40（11）：844-845.
[4] 程晓霞.甘草及其制剂中甘草酸的定量方法研究概况[J].时珍国医国药，2000，11（4）；380-381.
[5] 郭锦棠，杨俊红等 .微波与索氏提取甘草酸的正交实验研究[J].中国药学杂志，2002，37（12）：919-922.
[6] 苑可武，白芳，杨波等.甘草酸的提取和精制方法概述[J]. 中国医药工业杂志，2002,33（7）：362-363.
[7] 张小江，刘永录，马新蕾等.甘草中甘草酸的提取工艺研究[J].中兽医医药杂志，2010,1:31-32.
[8] 鲁守平，孙群，王建华等.甘草中有效成分甘草酸的提取和测定方法研究概况[J].中国中药杂志，2006,31（5）：357-359.
省级质量工程项目：校企合作实践教育基地（项目编号2013sjjd034）；安徽省教育厅
论文作者:徐宁,毛小明（通讯作者）
论文发表刊物:《医药前沿》2016年6月第17期
论文发表时间:2016/6/24
标签：甘草论文; 乙醇论文; 甘草酸论文; 饮片论文; 溶液论文; 精密论文; 显色论文; 《医药前沿》2016年6月第17期论文;