佳木斯市传染病医院 黑龙江佳木斯 154005
摘要：目的：观察灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠肝脏氧化应激的影响。方法：Wistar大鼠40只，随机分正常组10只，糖尿病组15只，灵芝孢子粉组15只.经干预后断头取血，取肝脏检测相关指标及光镜下观察病理学改变。结果：2型糖尿病模型制备成功，糖尿病组大鼠肝脏中MDA高于正常组和灵芝孢子粉组（P<0.05）， SDH、GSH-Px、SOD均显著低于正常组和灵芝孢子粉组（P<0.05）。结论：灵芝孢子粉能抑制糖尿病大鼠肝脏氧自由基的产生，提高抗氧化酶活性，减轻糖尿病肝脏组织细胞损伤，对糖尿病大鼠肝脏组织具有保护作用，在临床上对糖尿病的治疗具有广泛应用的前景。
关键词：2型糖尿病；氧化应激；灵芝孢子粉
糖尿病是引起糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱的一组临床综合征，现已成为临床上的一种常见病、多发病，其引起的死亡人数仅位列心脑血管病及癌症之后。糖尿病发病原因复杂，常发展为全身多种器官病变。肝脏是体内调节血糖的关键器官，糖尿病患者常伴有各种各样的肝脏病变[1].随着糖尿病病程的延长，发生肝脏病变的危险性及其严重性也将随之增加.因此，糖尿病状态下的肝脏病变已越来越引起人们的重视[2].本实验研究灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠肝脏组织自由基的影响，探讨灵芝孢子粉对实验性糖尿病大鼠肝脏功能的影响，报道如下：
1材料与方法
1.1实验动物：选用Wistar大鼠40只，雌雄各半，采用随机分组法，将大鼠分为3组：正常对照组、（糖尿病）模型组和灵芝孢子粉治疗组。
1.2实验方法：Wistar大鼠40只，随机分正常组10只，糖尿病组15只，灵芝孢子粉组15只.糖尿病组及灵芝孢子粉组大鼠经尾静脉一次性按25mg/kg注射2%链尿佐菌素（STZ），正常对照组尾静脉注射等量柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。正常饮食喂养2周后，进行血糖试验，糖尿病组和灵芝孢子粉组以血糖异常者保留，余去除，并改喂高脂高糖饮食，灵芝孢子粉（250mg/kg/d）持续10周。实验结束前一天做血糖试验，断头取血，取肝脏检测相关指标及光镜下观察病理学改变。
1.3指标检测及方法
应用血糖试纸进行检测大鼠尾静脉血糖值。采用放射免疫分析方法测定血清胰岛素。运用酶促反应方法测定琥珀酸脱氢酶（SDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性。硫代巴比妥酸染色法测定丙二醛（MDA）含量。全自动生化分析仪分析谷草转氨酶（AST），谷丙转氨酶（ALT）活性。考马斯亮蓝法测定蛋白含量。
1.4统计学处理
实验数据中各指标测定结果均以±S表示，进行t检验，组间比较采用方差分析（LSD检验），阳性率比较用χ2检验，均使用SPSS11.5软件。
2结果
2.1实验性2型糖尿病模型制备
2.1.1血糖试验
实验开始，糖尿病组及灵芝孢子粉组大鼠血糖升高（P<0.05），实验12周糖尿病组血糖显著升高（P<0.05），灵芝孢子粉组血糖降低（P﹥0.05）。（见表1）
3 讨论
肝脏是糖、脂肪、蛋白质三大物质代谢的转换中心，尤其在糖代谢中起着关键的作用.对机体内糖的储存、分解和血糖调节等方面至关重要[3].糖尿病持续性高血糖状态及其他因素会对肝脏产生一定的影响和损害。本实验选用雄性Wistar大鼠通过尾静脉注射链尿菌佐菌素造成糖耐量异常，再喂以高热量食物诱发动物肥胖，持续喂养10周，动物出现体重增加、血糖值升高及血清胰岛素水平升高，类似人的2型糖尿病模型。通过对糖尿病大鼠血浆进行检测，实验性糖尿病大鼠血浆中AST升高。模型组显著高于灵芝孢子粉组和正常组（P<0.05），说明在糖尿病中，确有肝脏损伤.ALT升高，模型组高于灵芝组和正常组（P﹤0.05），灵芝组高于正常组（P﹤0.05）低于模型组（P﹤0.05）。SDH为线粒体标致酶，其活性的变化与线粒体损伤同时出现，与线粒体数目平行升降。本实验结果显示在糖尿病大鼠肝脏损伤过程中，SDH活力下降，说明糖尿病引起的肝脏损伤中，线粒体损伤后恢复较慢，不能达到正常水平。
近年来许多研究发现不少疾病的起因与氧自由基有关，氧自由基会引发PUFA过氧化而生成脂质过氧化物，MDA是脂质过氧化物的最终产物，它能使蛋白质、核酸、脂类发生交联，使生物膜变性、细胞突变、衰老或死亡.因此测试MDA的量能反映出机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度.文献报道认为体内氧自由基是引起糖尿病的原因之一，同样机体内氧自由基也能引起糖尿病并发症及其它疾病[4].本实验对糖尿病大鼠肝脏组织MDA进行检测，结果显示模型组显著升高，说明糖尿病由于糖代谢障碍，脂肪代谢增加，体内产生过多的MDA使蛋白质核酸脂类发生交联，生物膜变性，细胞膜流动性降低。而灵芝组和正常组MDA含量比较差异无显著性（P﹥0.05），说明灵芝孢子粉能够清除自由基，提高局部细胞的抗缺氧功能.
生物体内存在多种防御自由基损伤的损氧化酶类，如SOD、GSH-PX。现已证实，人类多种疾病的病理生理过程均与SOD的代谢失常有关。患糖尿病时，由于患者的血糖升高，糖化血红蛋白（GHb）生成增多，氧合血红蛋白减少，红细胞携氧能力下降，加之血糖升高致血液粘度升高，微血管灌注不良，均可致组织细胞缺氧，促进了自由基的形成，同时血糖本身亦可以自发地氧化产生自由基，使自由基增多。GSH-PX是反映机体抗氧化能力的重要因素，机体通过增加GSH-PX活性对氧化应激产生反应[5]。抗氧化能力降低、不能将其及时清除时，必然导致自由基在体内的大量堆积，加重了组织细胞的损害，导致其功能的受损。本实验结果显示糖尿病大鼠肝脏组织SOD、GSH-PX显著降低，灵芝孢子粉可提高糖尿病大鼠SOD和GSH-PX活性，抗氧化能力增强，对肝脏组织的损伤具保护性作用，从而阻止或减少其并发症的发生。
综上所述，灵芝孢子粉能有效清除糖尿病肝脏组织细胞中的氧自由基，增强大鼠肝脏抗氧化的能力，说明灵芝孢子粉可能通过抗氧化损伤、清除自由基等作用和抑制免疫炎症反应的发生发展来减轻糖尿病肝脏组织的损伤，在糖尿病临床治疗中有广泛应用前景。
参考文献：
[1]Daniel Porte， Robert Sherwin 主编 埃伦堡 里弗金斯糖尿病学第 5 版（英文影印版）科学出版社出版 1196-1197
[2]Bahjat，-F-R；Dharnidharka，-V-R；Fukuzuka，-K；et al.Reducedsusceptibility of nonobese diabetic mice to TNF-alpha andD-galactosamine-mediated hepatocellular apoptosis and lethality.J-Immunol.2000 Dec 1；165（11）：6559-67
[3]沈稚舟 吴松华主编.糖尿病慢性并发症 上海医科大学出版社1999 年 1 月第 1 版 319~320
[4]李忆农，卢纯朝，徐向进等.NIDDM患者红细胞超氧化物歧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性与肾功能相关性研究.中华内分泌代谢杂志，2006，12（2）：78-80.
[5]周玖，陈瑗 谷胱甘肽过氧化物酶 生物化学与生物物理进展，2005，3：27 30
论文作者:孙涛
论文发表刊物:《健康世界》2015年22期
论文发表时间:2016/3/15
标签：糖尿病论文; 肝脏论文; 大鼠论文; 灵芝孢子粉论文; 血糖论文; 自由基论文; 损伤论文; 《健康世界》2015年22期论文;