(湖北省广水市第二人民医院检验科 432700)
【关键词】 凝聚胺法;交叉配血;处理方法
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2015)09-0345-02
临床输血是现代医疗工作中不可缺少的治疗手段,安全输血受到医护人员的普遍重视。输血技术普遍应用于临床。交叉配血是输血前必不可少的,是保证输血安全的重要措施[1]。传统的盐水介质法只能检测出完全抗体, 凝聚胺法既可检测完全抗体也可检测不完全抗体,该方法还操作简便、快速、灵敏、结果准确[2]。在临床上得到广泛应用。是基层医院交叉配血最理想的方法。现就我科应用凝聚胺交叉技术过程中所遇到的问题及处理办法总结归纳如下:
1.试验原理及方法
1.1 原理
凝聚胺交叉配血技术首先利用低离子溶液(LIM),降低介质的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。
然后,加入凝聚胺(Polybrene)溶液,它是一种高价阳离子多聚物,肝素中和剂,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面带有的负电荷,使红细胞Zate电位降低,缩短红细胞之间的距离,使红细胞产生非特异性的凝聚。最后,加入悬浮液(Resuspending),它具有中和凝聚胺 (Polybrene)阳离子的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果为阴性;但如果红细胞被相应的抗体致敏,则会被凝聚胺凝结,凝集就不会散开,试验结果为阳性。
1.2 方法
1.2.1取试管二支,标主次侧,主侧管加病人血清(血浆)2滴,加供血者3%—5%红细胞悬液1滴,次侧管反之。
1.2.2各加LIM0.65ml,混和均匀后,再各加Polybrene溶液2滴,并混和均匀。
1.2.3用离心机3400转/min(相当于1000g离心力)离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ml液体。
1.2.4轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做。
1.2.5最后加入Resuspending2滴,轻轻摇动试管混合并同时观察结果,如果在60秒内凝集散开,代表是由Polybrene引起的非特异性聚集,配血结果相合;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合。如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
2.影响因素分析及处理办法
2.1 影响交叉配血的因素很多。在近三年的临床输血中,我院发现肝素的影响是常见因素之一。曾经遇到过妇科1例DIC高凝期抗凝治疗、3例内科血栓性疾病肝素抗凝治疗合并消化道出血的病人,按上述方法做交叉配血试验时,离心后不显示凝集,试验无效。与临床医生沟通后得知,病人均系用肝素进行抗凝治疗后采集的血标本。遂进一步进行交叉试验,在加入凝聚胺试剂时多加3~4滴,离心后红细胞呈现凝集,试验有效,配血试验结果相容。各位病人输血后均无不良反应。
分析:肝素干扰凝聚胺配血是因为肝素带有高价的阴离子,能中和Polybrene高价阳离子,使红细胞表面负电荷增高,zeta电位增高,红细胞之间的距离不能缩短,不能发生非特异性凝集,导致试验无效。因此建议,应用肝素治疗的患者需要输血时,医生应在输血申请单上注明肝素治疗情况,血库工作人员在用凝聚胺交叉配血时,加Polybrene 6滴以中和肝素,从而消除配血干扰,保证可靠的配血结果。使用血浆做交叉配血时应避免使用肝素抗凝管。
2.2 止血敏药物对凝聚胺法交叉配血的影响。我科在配血过程中发现3例消化道出血患者进行凝聚胺法交叉配血时,加入凝聚胺试剂后,不出现红细胞非免疫性的可逆聚合,即使再多加入凝聚胺试剂也不能排除干扰。
分析:这是因为止血敏药物在水溶液中带有负电荷,能使红细胞膜表面的Zete电位上升,增加红细胞之间的排斥力。经过了解3例消化道出血患者在治疗过程当中均使用了止血敏药物。实验观察到只有等止血敏的半衰期后方可消除其干扰作用。实际工作中滴注止血敏2d~3d后重新抽取患者血样本,止血敏的干扰得以完全消除。
2.3 低分子右旋糖酐对凝聚胺法交叉配血的影响。我科在对5例外伤患者进行凝聚胺法交叉配血时,加入凝聚胺试剂后,均能引起红细胞非免疫性的可逆聚合,但再加入悬浮液后,显微镜下出现串钱状凝集,查阅病历得知这些患者均在抢救过程中输入了6%低分子右旋糖酐注射液。将患者血清用生理盐水作适当稀释(1∶1)后,再进行交叉配血实验,此种凝集现象即会消失。
分析:这种串钱状凝集的出现往往容易与真凝集相混淆,但串钱状凝集并不是真正的凝集。我科对5例患者均输入同型血液,无1例发生输血反应,因此在交叉配血实验中,对真凝集与串钱状假凝集现象一定要严格区分,特别注意了解分析病史,才能保证实验结果的真实性。
2.4 冷凝集素对凝聚胺法交叉配血的影响 。我科出现在冬季时有7例操作第5步最后滴入Resusperding液后凝集不散开,后经置入37℃水浴5分钟后轻轻摇摆试管观察凝集散开。
分析:出现此种现象是因为受血者血清中含有冷凝素,解决此类假阳性的方法可在上述操作第5步最后滴入Resusperding液时,将试管置入37℃水浴中,5分钟,且30秒内观察结果如凝集散开则为冷凝集所致。
在临床输血中,影响交叉配血的因素很多,我们应该全面了解病人的各种情况,如输血史 妇女妊娠史 用药情况等,结合病史仔细分析临床治疗情况,及时准确地排除干扰因素,确保输血安全。
【参考文献】
[1]赵修凤,尤崇革.凝聚胺检测技术在交叉配血中的应用[J].兰州医学院学,2003,29:4445.
[2]马利平,张建国.凝聚胺试验在交叉配血中的应用[J].济宁医学院学,2005,28:62.
论文作者:汪桂红
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第9期供稿
论文发表时间:2015/7/23
标签:红细胞论文; 肝素论文; 抗体论文; 患者论文; 试管论文; 阳离子论文; 干扰论文; 《医药前沿》2015年第9期供稿论文;