王尉[1]2001年在《转化生长因子-β_1调控腱细胞生长的机理研究》文中进行了进一步梳理组织工程化肌腱研究中，腱细胞是一种分化程度很高的细胞，在体外培养条件下如何调控其增殖及基质合成是腱细胞作为种子细胞所必须研究的问题。近年来的研究表明转化生长因子-β_1（TGF-β_1）在肌腱的形成、生长及修复过程中起着重要作用。为了探讨TGF-β_1对人胚腱细胞增殖和胶原代谢及其下游信号分子Smad的影响及其机制。首先我们采用免疫组化和流式细胞仪定量分析法，对体外培养腱细胞TβR_(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、)的表达及密度进行了分析，发现体外培养的腱细胞TβR_(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)各维持一定密度；通过PI及FITC的流式细胞仪双标记法分析了同一细胞周期不同时相的TβR_(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)受体数目差别，发现TβR_Ⅰ、TβR_Ⅱ及TβR_Ⅲ在细胞周期中G_2M细胞表面的受体密度比G_1期细胞受体密度高。此外采用~3H-TdR和~3H-脯氨酸掺入法观察TGF-β_1对人胚腱细胞的DNA和胶原合成的影响，证实在0.5％胎牛血清条件下TGF-β_1可刺激腱细胞增殖，其作用在0.5-10μg/L之间呈剂量依赖性增强（P＜0.05），饱和剂量10μg/L增加DNA合成73％，10μg/LTGF-β_1作用36小时始增殖显着（P＜0.05），并持续到72小时。细胞周期分析表明：TGF_β_1作用下，G_0/G_1％呈降低趋势，而S％呈升高趋势，反映细胞增殖活力的PI值也呈升高趋势，尤以5μg/L以上浓度时为显着（P＜0.05）。TGF-β_1各剂量组对胶原蛋白合成均有促进作用（P＜0.05），最大效应剂量为5μg/L（107％）。通过对Smad2、4基因MH2结构域的克隆和序列鉴定证实腱细胞内存在SMAD2、4信号转导途径。最后采用RT-PCR反应检测TGF-β_1作用24h腱细胞Smad2、3和7mRNA表达水平的变化。TGF-β_1作用12小时后能显着下调Smad2和Smad3基因的表达水平，同时诱导TGF-β_1信号拮抗因子Smad7的产生。 因此，我们的结论是腱细胞存在稳定的TGF-β受体系统及其胞内信号分子。TGF-β_1通过对胞内信号分子的反馈调控，在一定范围内能有效促进腱细胞增殖及胶原合成。为组织工程化肌腱构腱中调控种子细胞增殖分化提供基础。
熊雁[2]2006年在《核心蛋白聚糖（decorin）在屈肌腱愈合中作用的实验研究》文中研究表明目的:肌腱损伤术后愈合发生粘连,导致手的功能恢复效果不理想,是手外科领域亟待解决的一大难题。近来研究发现,转化生长因子(TGF-β)在粘连形成和胶原原纤维形成过程中起到一个关键的生长因子的作用。核心蛋白聚糖(decorin,DCN)作为体内自身正常的TGF-β调节因子,能够调节细胞黏附、迁移、增殖和胶原纤维的形成,起着生理状态下的抑制纤维化粘连的作用。本课题的目的是通过体内和体外动物实验,研究DCN在肌腱愈合过程中的机制,为将来临床的进一步应用提供理论依据。方法:原代培养兔肌腱细胞,分别加入不同浓度(0.25、1.25、2.5、5μg/ml)的DCN;培养12、24、48h用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法测定细胞增殖速度;2.5μg/ml的DCN作用兔肌腱细胞24h后,镜下观察低浓度DCN作用24h后对兔肌腱细胞增殖的影响;2.5μg/ml的低浓度DCN培养兔肌腱细胞24h后用流式细胞仪检测细胞周期。原代培养大鼠肌腱细胞,2.5μg/ml的DCN作用大鼠肌腱细胞12h后,采用免疫细胞化学,免疫荧光方法观察DCN对大鼠肌腱细胞I型胶原蛋白的影响,采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测DCN对大鼠肌腱细胞I型胶原mRNA表达的影响。体外研究兔屈肌腱术后愈合过程中,DCN在形态和功能上对肌腱愈合效果的提高作用。选取成年日本大耳白兔18只。按术后不同时间随机分成2、4、8周组,每组6只。○1取兔后肢的第2趾,暴露深屈肌腱,横行切断。右侧肌腱缝合位点直接注射核心蛋白聚糖100μl (0.25g/L)为实验趾;左侧肌腱缝合位点注射磷酸盐缓冲液100μl为对照趾。石膏固定。○2各组兔肌腱大体粘连性状观察:于术后2、4、8周分别暴露粘连组织、腱鞘和肌腱,观察肌腱粘连形状(肌腱粘连分为5级,I级为无粘连, V级为广泛粘连)。○3各组兔肌腱缝合段组织学观察:于术后2、4、8周取实验趾和对照趾肌腱缝合区切片。随机取2个标本切片做苏木精伊红染色观察成纤维细胞计数;2个标本切片做Masson色染色观察胶原纤维含量;2个标本行透射电镜观察肌腱愈合中成纤维细胞及胶原纤维的超微结构。结果:体外实验,0.25、1.25、2.5μg/ml浓度DCN作用12h后对兔肌腱细胞增殖有着减少的趋势,但是24h后却明显地促进其增殖(P<0.05),但是48h后差异不显
庞全海[3]2005年在《山羊骨髓间充质干细胞的分离培养及体外分化潜能的研究》文中认为骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是来自于骨髓的两种干细胞之一,在人、小鼠、大鼠、兔、猪等许多物种的研究证明了该类干细胞具有体外分化为多种细胞表型的能力,有望成为未来细胞/基因治疗、组织工程的主要种子细胞之一。但是,迄今未见关于山羊,特别是成年山羊骨髓间充质干细胞分离、培养、分化等方面的系统研究报道。本研究目的在于阐明山羊骨髓间充质干细胞的生物学性能及其分化潜能,以便未来利用该类细胞作为疾病细胞/基因治疗的模型,以及利用该类细胞作为细胞生物反应器体外生产生物活性物质,进而建立山羊骨髓间充质干细胞细胞系。为此,本试验利用成年关中奶山羊为对象,较为系统全面地研究了其骨髓间充质干细胞的分离、培养、扩增、形态学、生长特性、细胞表面标志,以及体外诱导分化能力。结果如下:1. 本试验应用贴壁分离法或密度梯度离心法成功分离获得关中奶山羊髂骨骨髓间充质干细胞,体外培养到第21 代,仍然保持其干细胞的特性,并已扩增到2.8×108细胞。2. 本试验所分离的关中奶山羊骨髓间充质干细胞呈多角形、叁角形或长梭形,类似于人和其他物种的间充质干细胞。3. 扫描电镜下,山羊骨髓间充质干细胞表面较为粗糙,有多个突起,并有较多微棘和丝突,当多个细胞同时存在时,这些丝突相互搭接成网状。透射电镜下,山羊骨髓间充质干细胞的结构与其他物种基本相似,即表现为细胞内有大量扩张的粗面内质网、线粒体,分泌功能旺盛,具有该类细胞的典型特征:细胞核质比大、胞浆中细胞器少、核仁明显处于功能静息期。4. 免疫细胞化学分析表明,山羊骨髓间充质干细胞能够表达间充质干细胞的表面标志CD29、CD44、CD105、CD106 以及CD166(阳性),而不表达造血干细胞的标志CD14、CD34、CD45、c-kit (阴性),和其他物种的骨髓间充质干细胞相似。这些标志的检测有助于鉴定间充质干细胞。但本试验还发现,山羊骨髓间充质干细胞也表达TGF-α,其意义需要进一步阐明。5. 山羊骨髓间充质干细胞可以在体外用5-氮胞苷诱导分化为心肌细胞表型,能够表达α-actin 抗原,呈PAS 染色阳性,并分泌糖原,从而为未来利用这种细胞进行心脏疾病细胞/基因治疗的模型研究提供了科学依据。同时,这也是和骨髓造血干细胞的区别之一。6. 用HGF 和尼克酰胺向胰岛β-细胞诱导后,山羊骨髓间充质干细胞能够变为较典
何旭[4]2006年在《低氧促进人骨髓间充质干细胞成管、内皮分化及其在血管生成过程中的作用》文中指出本实验通过模拟骨髓内的低氧张力对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)进行体外低氧培养,探讨低氧对hMSCs成管及内皮分化倾向的影响及其作用机制。体内实验中利用pLEGFP-N1逆转录病毒载体对hMSCs进行标记,通过EGFP来追踪hMSCs植入体内的变化;以BALB/C裸鼠为实验动物模型,通过Matrigel或肿瘤血管生成实验研究体内低氧环境对hMSCs内皮分化、血管生成作用的影响及其机制。结果如下:①成功地建立了一套hMSCs分离培养、纯化、鉴定及扩增的标准化技术平台;P12代内hMSCs生物学性状稳定并保持未分化状态,可以作为后续实验工作的细胞来源。②体外低氧培养能通过加速细胞的铺展、促进细胞外基质的降解和细胞的迁移而促进hMSCs成管及内皮分化,其机制为:a.低氧诱导hMSCs表达HIF-1α,进而上调VEGF与MT1-MMP的表达,从而促进hMSCs成管及内皮分化;b.低氧可能通过促进hMSCs细胞Ca~(2+)通道开放,而促进其向内皮细胞分化。③hMSCs能促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生。④pLEGFP-N1逆转录病毒载体能有效地转导hMSCs,转导后的细胞维持其原有的生物学特性。⑤Matrigel血管生成实验证实体内低氧环境能促进hMSCs血管生成及内皮分化,但大部分血管为宿主源性的新生血管,只有极少数血管的内皮细胞是由hMSCs分化而来的。⑥hMSCs能促进肿瘤的血管生成,这与肿瘤造成的低氧张力有关,其作用也主要是通过促进宿主源性的血管新生实现的。综上所述,本实验为MSCs的内皮诱导分化提供了一个新的技术路线和实验方法,也为今后更好地应用MSCs治疗临床缺血性疾病或血管依赖性疾病,以及利用组织工程化MSCs抗肿瘤治疗提供了理论基础和实验依据。
刘一军[5]2017年在《自体外周血富白细胞-血小板纤维蛋白对兔关节外骨道内移植肌腱腱骨早期愈合的影响》文中研究表明目的探讨兔关节外骨隧道内使用自体外周血富白细胞-血小板纤维蛋白(leukocyte-and platelet-rich fibrin,L-PRF)对移植肌腱早期腱骨愈合的影响。方法30只健康的新西兰大白兔被均分为实验组和空白对照组。将兔子的半腱肌腱取出并对肌腱末端编织,由内向外移入同侧胫骨近端的横向骨道内加以固定制成腱骨愈合模型。实验组加入自体血来源的L-PRF,对照组不加入任何东西。分别于术后4、8、12周叁个时间点处死取材、切片染色,行腱骨界面的组织形态学观察并在高倍显微镜下行成纤维细胞计数并分析。结果各个时间点实验组成纤维细胞的数目均多余对照组,并且在统计学有差异P<0.05);在叁个时间点中,实验组与对照组相比腱骨连接更加紧密,腱骨间隙更小,胶原纤维排列更加有序规则;标志着腱骨愈合早期愈合的sharpey样纤维在实验组四周时可观察到,而对照组则是在8周时,并且随着时间延长,两组sharpey样纤维均持续增多,但是两组标本的腱骨界面组织形态学Buark级差异有统计学意义(P<0.05)。结论自体血来源的L-PRF可以促进移植肌腱骨道内腱骨的早期愈合。
丁木亮[6]2007年在《结缔组织生长因子对体外培养肌腱细胞增殖和量效关系的实验研究》文中进行了进一步梳理目的：研究不同浓度的CTGF对体外培养肌腱细胞增殖的影响，探讨CTGF参与肌腱损伤修复的可能机制。方法：本实验以成年兔后肢趾屈肌腱为材料，用酶消化后，将分离的细胞用含10％胎牛血清的培养基培养，贴壁达80％后传代。观察细胞的形态及生长规律。取第二代细胞，通过免疫组化的方法进行肌腱细胞鉴定。取第叁代肌腱细胞，按细胞数约为4×10~3／孔接种在96孔培养板的48孔，每6孔为一组，共分为8组，根据每组CTGF浓度不同，分为5ng／ml CTGF组、10ng／ml CTGF组、20ng／ml CTGF组、50ng／ml CTGF组、100ng／ml CTGF组、200ng／ml CTGF组、500ng／ml CTGF组及对照组(不加CTGF)。显微镜下观察各组细胞均进入对数生长期时，用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)法染色，在酶联免疫检测仪上测出各孔吸光度(optical density，OD)值，并计算各组OD均值进行比较。结果：MTT实验通过比较各组OD值发现：5ng／mlCTGF组肌腱细胞增殖与对照组无显着性差异；5ng／ml、10ng／ml、20ng／ml、50ng／mlCTGF组肌腱细胞增殖有随CTGF浓度增加而上升的趋势，且各组之间的差异均有显着性(P＜0.05)；50ng／ml、100ng／ml、200ng／ml CTGF、500ng／ml CTGF组肌腱细胞增殖有随浓度增加而稍呈下降的趋势，但各组之间的差异均无显着性(P＞0.05)。结论：10ng／mlCTGF、20ng／mlCTGF、50ng／mlCTGF、100ng／mlCTGF、200ng／mlCTGF、500ng／mlCTGF有促进肌腱细胞增殖作用；5ng／mlCTGF对肌腱细胞增殖无明显作用。CTGF浓度在0ng／ml～50ng／ml之间时，肌腱细胞的增殖随浓度增加呈上升趋势；在50ng／ml～500ng／ml之间时，肌腱细胞的增殖随浓度增加稍呈下降趋势。50ng／ml为促肌腱细胞增殖的最佳CTGF浓度。
梁大伟, 卫小春, 魏垒[7]2016年在《富血小板血浆在肌肉骨骼疾病中的应用》文中研究表明治疗慢性复杂性的肌肉骨骼损伤对于医生来说是一个严峻的挑战。骨生物活性材料是一种相对前沿的技术,如人类自身的细胞和血浆,为促进和加速骨与软组织的愈合提供了希望。富血小板血浆(PRP)是一种近来得到关注的骨生物活性材料。α颗粒是血小板的主要成分,富含多种生长因子,包括转化生长因子β、血小板源生长因子、胰岛素样生长因子、血管内皮生长因子和表皮细胞生长因子等,这些因子在疾病发展及组织修复中起到重要作用。本文回顾总结了PRP的作用机制及近年来其用于治疗肌肉骨骼疾病的文献。
王尉, 王子灿, 鲍永耀, 朴英杰[8]2001年在《人胚腱细胞转化生长因子-β受体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ密度分析》文中研究表明目的 观察转化生长因子-β受体I 、II和III （TβRI 、II 、III）在体外培养的肌腱细胞中的表达情况，探讨TGF-β1对细胞周期及增殖指数PI值的影响。方法 采用免疫组化法鉴定受体的表达，流式细胞仪法分析了同一细胞周期不同亚时相的TβRI 、II 、III受体数目差别并观察了不同浓度的TGF-β1对细胞周期及增殖指数PI值(S+G2M)的影响。结果 TβRI 、II 、III在体外培养的肌腱细胞中均有表达，TβR I 、II 、III平均荧光强度在G1期分别是7.93±0.20、8.76±0.16、8.46±0.14，而在G2M期分别是17.7±0.36、18.9±0.35、18.3±0.67。细胞周期分析表明：TGF-β1作用下，G0/G1%呈降低趋势，而S%呈升高趋势，反映细胞增殖活力的PI值也呈升高趋势，尤以5 ng/ml 以上浓度时为显着(P<0.05)。结论 在肌腱细胞周期的不同亚时相，肌腱细胞TβRI 、II 、III各自密度均具显着差别（P<0.01），TGF-β1能促进腱细胞增殖。TGF-β受体系统不同亚时相的差别可能是其调控细胞增殖活动的生物学基础。
卢荟[9]2017年在《丹参酮ⅡA治疗肌腱粘连的动物实验及临床研究》文中指出研究背景:肌腱粘连是指肌腱损伤修复过程中周围组织的增生和侵入,造成肌腱运动功能障碍。外伤术后肌腱粘连是肌腱损伤后常见问题之一,迄今为止仍无有效的解决方法,仍大概有30～40%的病人术后有关节活动度不佳,手功能受限等并发症[1]。我们希望通过深入肌腱粘连机制的研究来解决这一问题。肌腱粘连发生的原因可能为机械性和化学性的损伤。损伤诱发间质细胞和肥大细胞释放多种活性物质,使组织产生炎性反应,毛细血管通透性增加,大量浆液渗出。这些渗出物如不能被分解吸收,则促使纤维蛋白积聚,继而发生纤维细胞浸润和新生毛细血管的长入,最后形成纤维粘连[2]。目前认为肌腱的愈合由内、外两种修复机制完成。内源性修复机制指通过肌腱细胞增生修复损伤肌腱;外源性修复机制指通过腱周组织增生,纤维母细胞,炎症细胞的增生修复损伤肌腱。肌腱自身的强度主要取决于内源性修复机制;而外源性修复则主要形成粘连[3,4]。由于炎性反应导致局部组织渗出增多,炎性后的机化后更加重肌腱的粘连,这就是肌腱外源性修复容易广泛粘连的主要问题[5]。TGF-β1/Smad3是创伤修复过程中的重要信号通路。TGF-β1是各种损伤后组织发生病理性纤维化的因素之一。目前实验发现在肌腱损伤时TGF-β1可刺激腱细胞DNA合成,促进腱细胞增殖参与肌腱的修复,促使成纤维细胞和巨噬细胞的募集、血管的生成、刺激胶原的产生[6]。丹参酮ⅡA,TanshinoneⅡA,为唇形科鼠尾草属植物丹参(Salviamiltior-rhizabunge)的有效成份具有抗菌、消炎、扩张血管、抗血小板凝集等作用来治疗冠心病等心血管疾病[7-9]。我们研究TSA是否可以有效的防止肌腱粘连和其可能作用机制,包括微小RNA(miRNA)及通过TGF-β/Smad信号通路的蛋白表达,并且进一步验证并运用于临床。本研究的成功实施将为肌腱功能修复提供了新的理论和途径。第一部分丹参酮ⅡA治疗肌腱粘连的动物实验研究背景:肌腱表面和腱鞘之间的肌腱粘连是一种常见的临床问题。虽然骨科修复技术和康复治疗进步使肌腱粘连得到一定的改善,但仍然无法彻底根治。丹参酮ⅡA(TSA)是因为它的抗炎活性作为主要功能活性的植物化学物质之一。我们用丹参酮ⅡA(TSA)在大鼠的跟腱损伤模型中来防止肌腱粘连的和通过TGF-β/Smad信号通路研究可能的作用机制,包括微RNA(miRNA)的表达和蛋白质表达。方法:建立SD大鼠的跟腱损伤模型,肌腱损伤处通过改良Kessler的技术缝合,随机分为TSA和对照组。肌腱断端用TSA进行干预,并用生理盐水作为对照。6周后对肌腱组织进行大体观察和组织学评价。我们通过显微镜观察,大体观察肌腱的粘连情况,根据瘢痕量来评价胶原纤维的重塑的程度。通过实时PCR检测microRNA的表达和通过western blotting来检测蛋白表达。结果:根据肌腱粘连的评价标准,发现TSA组比对照组粘连形成少。两组中均未观察到肌腱断裂或局部感染的情况。TSA组中肌腱组织中的胶原纤维的含量降低,与对照组相比有显着的统计学差异,P=0.0004。在TSA组中在修复肌腱组织中进行检测 miRNA 的检测包括的 miR-155,miR-29b,miR-21,miR-133B 和 let7 的表达,仅观察到miR-29b的表达比对照组有增高,P<0.0001,有显着的统计学差异。western blotting来检测TSA组中TGF-β1和p-Smad3蛋白的表达低于对照组。结论:在大鼠粘连模型中使用TSA可能是防止肌腱粘连的有效方法。第二部分丹参酮ⅡA治疗肌腱粘连的临床研究背景:手外伤容易造成术后掌指关节粘连和关节活动受限。特别是创伤术后掌指关节僵硬的患者,由于掌指关节的活动度对手指功能影响较大,所以如何恢复手部掌指粘连患者术后手部功能及提高生活质量具有重要意义。2015年9月～2016年3月,我们对80例掌指关节粘连的病人进行临床研究,随机双盲分成两组。现通过回顾分析患者临床资料,讨论丹参酮ⅡA(TSA)防治掌指关节粘连的临床疗效。目的:探讨丹参防治创伤后掌指关节粘连的临床疗效。方法:2015年9月～2016年3月,对80例掌指关节粘连的病人进行研究。随机双盲分成两组,TSA组40例和空白组40例。男58例,女22例;年龄20～55岁,平均38岁。其中拇指掌指关节16例,示指24例,环指22例,中指11例,小指7例。致伤原因:机器伤33例,运动伤21例,车祸伤17例,刀砍伤9例。治疗前、治疗后3个月和6个月进行影像学评估,功能评定采用手部关节活动度TAM系统评价法(total active movement,TAM),日常生活手功能评定采用Michigan手功能评价(Michigan Hand Outcome Questionnaire,MHQ),评分数据采用独立样本t检验。结果:患者术后切口均Ⅰ期愈合,术后均无内固定松动、断裂,骨折不愈合等并发症。患者均获随访,随访6个月时TAM评分丹参组优27例,良10例,可3例,差0例,优良率93%;空白组优15例,良16例,可9例,差0例,优良率78%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);MHQ评分丹参组60.0±14.2分,空白组50.1±15.7分。组间比较差异有统计学意义(t=2.96,P<0.05)。结论:运用丹参酮ⅡA可以减少术后掌指关节粘连程度,临床疗效满意。第叁部分丹参酮ⅡA联合Swanson人工关节置换治疗严重掌指关节粘连的初期疗效研究Swanson人工关节最初并用于近端指间关节(proximal interphalangeal joint,PIP)和掌指关节(metacarpophalangealjoint,MCP)的关节置换。既往研究主要集中在Swanson人工关节置换治疗类风湿MCP关节的临床疗效[10-12]。对于创伤后掌指关节僵硬患者的治疗缺乏系统的临床研究。考虑到目前创伤后重度掌指关节粘连及僵硬的患者临床疗效不佳,我们选择使用丹参酮ⅡA联合Swanson人工关节置换来解决这个问题。评估其近期临床疗效和患者的主观评价。目的:探讨丹参酮ⅡA联合Swanson人工关节置治疗创伤后重度掌指关节粘连及僵硬患者的初期疗效。方法:从2014年9月至2015年7月在就诊的属于创伤后重度掌指关节粘连及僵硬患者,使用丹参酮ⅡA联合Swanson人工关节置换治疗掌指关节严重粘连僵硬患者的回顾性研究。其中男3例,女1例。示指为2例,中指为1例,同时涉及示指和中指1例。掌指关节离断3人,掌指关机挤压伤1人。患者平均年龄为52.15±2.6岁(范围41岁～67岁)。数据统计包括术前和术后6个月的评分(握力,关节活动范围,Sollerman 手功能测定和 Michigan 手功能评价(Michigan Hand Outcome Questionnaire,MHQ)"。结果:随访时间为术后6个月。握力较术前显着增加(术前4.2±2.2公斤,术后6.7±2.8公斤,P=0.027)。关节运动度范围已显着增加(术前24.6±9.0度,术后47.0±10.7度,P<0.001)。Sollerman评分显示前和操作后,无统计学显着差异。MHQ总得分较术前显着增加(术前50±15,术后57±15,P=0.002)。功能方面,日常生活,外观和满病人满意度等术后评分也显着增加了。然而日常工作和疼痛的术后评分没有改善。所有患者对术后外观,自身满意度改善。结论:丹参酮ⅡA联合Swanson人工关节置换可明显改善掌指关节僵硬患者的运动范围。患者手部美观性功能及都得到了提高。今后的长期随访将有助于更好地确定该方法的功效。我们建议外伤后掌指关节僵硬患者可以选择丹参酮ⅡA联合Swanson人工关节置换这个手术方式。
向磊[10]2014年在《rhBMP12对SD大鼠跟腱断裂术后愈合的影响》文中认为【目的】观察重组人骨形态发生蛋白12（recombinant human bone morphogeneticprotein12，rhBMP12）对Sprague Dawley（SD）大鼠跟腱断裂术后生物学和力学性质的变化，探讨rhBMP12对SD大鼠跟腱断裂术后愈合的影响及其可能机制,为临床治疗跟腱断裂提供实验基础。【方法】选用雄性SD大鼠，10-12周龄，体重350（±50）g，共60只，每只大鼠自身采取左右对照，分成左后肢组（实验组，A组），右后肢组（对照组，B组）。所有SD大鼠双侧后肢均行跟腱断裂吻合术，A组以2μg/ml的rhBMP12处理跟腱断端后3/0尼龙线kessler缝合，B组以等剂量的生理盐水（NS）处理跟腱断端后3/0尼龙线kessler缝合，双侧后肢均不予以外固定。术后1周、2周、4周、6周、8周分别随机处死12只SD大鼠（分别记做亚组A1、B1, A2、B2, A4、B4,A6、B6, A8、B8），观察大鼠跟腱大体，光镜下的形态及成纤维细胞计数，并测定跟腱胶原蛋白含量以及跟腱的刚度，最大负荷和最大负荷下应变的变化。【结果】1.大体形态同一时间点比较实验组跟腱呈白色、有光泽、质地坚韧，纤维结构规整；对照组跟腱出现不同程度表面血管化，与腱鞘粘连，弹性较差，局部呈灰黄色。2.粘连情况比较实验组与对照组术后不同时间点的跟腱粘连情况，实验组均轻于对照组，P<0.05，差异有统计学意义。3.成纤维细胞计数术后第1、2、4周，实验组成纤维细胞计数少于对照组，P<0.01；术后第6、8周，实验组成纤维细胞计数少于对照组，P<0.05，所有差异均有统计学意义。4.力学性质术后第1周到第6周，实验组内或者对照组内跟腱的刚度，最大负荷和最大负荷下应变均逐渐增大。A6与A8，B6与B8亚组间最大负荷无明显变化，差异无统计学意义。除术后第8周的最大负荷，各对应的A组力学性能均强于相应的B组，其差异有统计学意义（P<0.05）。5.胶原蛋白含量5.1PⅠNP术后第1周到第8周，PⅠNP含量逐渐增高。术后第1、2、4、6周，实验组跟腱PⅠNP含量高于对照组，P<0.05，差异有统计学意义。术后第8周，实验组对照组比较P=0.18，差异无统计学意义。5.2PⅢNP术后第1周到第8周，PⅢNP含量逐渐先增高后降低。术后第1、2、4、6周，实验组对照组比较，P<0.05，差异有统计学意义。术后第8周，实验组对照组比较P=0.62，差异无统计学意义。【结论】1. rhBMP12对SD大鼠跟腱断裂术后愈合有一定的促进作用。2. rhBMP12促进跟腱愈合的机制，可能与rhBMP12促进胶原蛋白的表达，增强跟腱的强度和硬度有关。
参考文献：
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[4]. 低氧促进人骨髓间充质干细胞成管、内皮分化及其在血管生成过程中的作用[D]. 何旭. 吉林大学. 2006
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[6]. 结缔组织生长因子对体外培养肌腱细胞增殖和量效关系的实验研究[D]. 丁木亮. 中南大学. 2007
[7]. 富血小板血浆在肌肉骨骼疾病中的应用[J]. 梁大伟, 卫小春, 魏垒. 中华关节外科杂志(电子版). 2016
[8]. 人胚腱细胞转化生长因子-β受体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ密度分析[J]. 王尉, 王子灿, 鲍永耀, 朴英杰. 第一军医大学学报. 2001
[9]. 丹参酮ⅡA治疗肌腱粘连的动物实验及临床研究[D]. 卢荟. 浙江大学. 2017
[10]. rhBMP12对SD大鼠跟腱断裂术后愈合的影响[D]. 向磊. 南华大学. 2014
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