（湘潭医卫职业技术学院 湖南 湘潭 411104）
摘要：目的 探究胃癌外周血p53基因定量表达及与患者预后的关系。方法 选取2017年1月～2018年1月在我院接受治疗的100例胃癌患者作为观察组（其中胃癌转移和未转移各50例），并选择同期前来我院体检的50例健康正常人作为对照组，对所有患者抽取外周血并利用荧光定量PCR（RTFQ PCR）技术进行p53基因定量检测和比较。结果 观察组中P53检测阳性率为34.00%，显著高于对照组的0.00%，差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组50例胃癌转移患者的P53检测阳性率为62.00%，显著高于未转移的0.00%，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 胃癌外周血p53基因定量表达对胃癌的检测、有无转移以及预后均有较高的诊断价值。
关键词：胃癌；外周血；p53基因；定量表达；预后
[Abstract：] objective to explore the quantitative expression of p53 gene in peripheral blood of gastric cancer and its relationship with prognosis of patients.Methods from January 2017 to January 2018 in our hospital for treatment of 100 cases of gastric cancer patients as observation group（including gastric cancer metastasis and transfer 50 cases each），and select the same period to come to our hospital check-up as control group，50 cases of healthy normal peripheral blood in patients with all and by using the fluorescent quantitative PCR（RTFQ PCR）technique for quantitative detection of p53 gene and comparison.Results the positive rate of P53 in the observation group was 34.00%，significantly higher than the control group's 0.00%，and the difference was statistically significant（P<0.05）.The positive rate of P53 detection in 50 patients with gastric cancer metastasis in the observation group was 62.00%，significantly higher than that of 0.00% without metastasis，and the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion the quantitative expression of p53 gene in peripheral blood of gastric cancer has high diagnostic value for the detection，metastasis and prognosis of gastric cancer.
[Key words：] gastric cancer；Peripheral blood；P53 gene；Quantitative expression；The prognosis
近年来随着生活水平的提高、饮食结构的改变、起居运动的变化、不良生活嗜好的比例增加以及幽门螺杆菌感染等，使得临床上消化系统恶性肿瘤的发生率呈现逐年上升和年轻化趋势，其中以胃癌的发病率居首[1]。胃癌由于早期缺乏特异性，患者仅出现诸如消化不良等症状如上腹不适、嗳气等，而且胃癌的病程较长，疾病发展期间所表现出的症状也类似于胃炎、胃溃疡等慢性疾病，使得临床容易出现漏诊或误诊，延误了患者的诊断和治疗[2]。随着分子生物学的不断发展和临床检测技术的不断进步和更新，有研究指出P53基因在恶性肿瘤疾病的早期诊断和预后均有较高的诊断价值[3]，为此本文试就胃癌外周血p53基因定量表达及与患者预后的关系展开观察与研究，现将结果具体汇报如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
选取2017年1月～2018年1月在我院接受治疗的100例胃癌患者作为观察组（其中胃癌转移和未转移各50例），纳入标准：①所有患者均经临床相关症状、胃镜以及病理组织活检首次确诊为胃癌；②所有患者临床资料均完整无缺。排除标准：①预后生存不足1个月者；②自行中断研究或失访者；③本研究前1个月内接受过相关药物以及手术治疗者。其中观察组患者中男性68例，女性32例；年龄25岁~69岁，平均年龄（34.8±7.1）岁；其中有淋巴结转移50例，无淋巴结转移50例。选择同期前来我院体检的50例健康正常人作为对照组，男性37例，女性13例；年龄26岁~67岁，平均年龄（33.6±6.8）岁。所有研究对象在性别、年龄等一般资料的比较上，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究已向我院医学伦理委员提出申请并获批准。
1.2方法
对所有研究对象均清晨空腹分别采集5ml外周静脉血置于肝素抗凝管内，利用RTFQ PCR技术进行p53基因定量检测。其中模板按照Chelex-100法提取有核细胞DNA进行制备，并应用特异PCR引物扩增P53基因外显子5-6（长度为410bp，上下游序列分别为5’GCAGTTCCTCTTCCTGCAGTACTC3’、5’AACCAGACCTCAGGCGGCTCATAG3’）、外显子7-8（长度为580bp，上下游序列分别为5’TGTTGTCTTCTAGGTTGGCTCTGACTA3’、5’GTCCTGCTTGCTTACCTCGCTTAGTGC3’）以及外显子8（长度为165bp，上下游序列分别为5’CCTATCCTGAGTAGTGGT3’、5’GTCCTGCTTGCTTACCTC3’），调整PCR产物浓度确保各标本浓度相当。取8ul甲酰胺与等量产物进行混合，待热变性后立即放入冰浴盒中并加入0.25%溴酚蓝加样缓冲液，然后进行电泳。电泳凝胶为6%聚丙烯酰胺，温度4℃、电压200V、5h后银染。利用美国ABI公司衬衫的Step One plus RTFQ PCR进行相应的检测，其中PCR热循环条件为：50℃ 2min，95℃ 10min，95℃ 15s，60℃ 60s；循环40次。以上所有操作及流程均由专业技术人员严格按照仪器、试剂的相关说明和步骤及要求进行。
1.3 观察及评价指标
观察胃癌转移组、胃癌未转移组以及对照组三组研究对象的p53检测阳性率，
1.4统计学处理
数据均采用SPSS19.0统计软件进行分析，计数资料采用n或%表示，进行χ2检验；以P<0.05表示具有统计学意义。
2 结果
2.1 P53基因在不同分组中的表达情况
观察组中P53检测阳性率为34.00%，显著高于对照组的0.00%，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。
表1 P53基因在不同分组中的表达情况（n，%）
3 讨论
胃癌是临床常见的恶性肿瘤，但是研究指出大多数胃癌患者死亡的主要原因并非是由胃癌直接引起，相反均是由于胃癌细胞出现腹腔和远处转移后引起的多器官损伤[4]。胃癌由于缺乏早期特异性，虽然可以通过胃镜以及手术进行活体组织的病理检查，但患者的耐受程度较低、依从性较差，因此临床实用性大打折扣，这也进一步导致了胃癌患者在确诊时往往已经达到中晚期，甚至已经失去治疗意义。因此通过何种方式来更加有效的提高临床胃癌患者的早期诊断和早期治疗成为亟待解决的关键问题。
P53作为目前已知的肿瘤抑制基因，几乎能在所有恶性肿瘤患者中均可表达，其主要生物学功能是阻滞细胞周期变化，从而达到诱导凋亡以及促进分化的效果[5]；这在本研究中对照组作为正常健康人的外周血p53的检出率为0获得了证实；同时本研究还提示对于已经发生转移的胃癌组其p53检出率也显著高于未发生转移的胃癌组，这与殷石[6]等的研究结果一致，充分说明了p53检测对胃癌的诊断和是否转移具有较高的诊断价值。
综上所述，胃癌外周血p53基因定量表达对胃癌的检测、有无转移以及预后均有较高的诊断价值。
参考文献
[1] 常敏，张久聪，周琴，等.胃癌流行病学研究进展[J].胃肠病学和肝病学杂志，2017，26（9）：966-969.
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[3] 甘伟平，罗陈飘，陈喜志，等.抑癌基因PTEN和p53在胃癌中的表达及意义[J].中华实用诊断与治疗杂志，2016，25（1）：3956-3958.
[4] 季林华，张斌，王超杰，等.胃癌组织中p53、Ki67表达与患者生存质量及预后的关系[J].中国医学前沿杂志（电子版），2017，9（3）：124-127.
[5] 李明，刘燕青，胡鹏飞.外周血中K-ras和p53基因突变对胃癌术后复发转移的预测价值[J].中国中西医结合消化杂志，2018，26（1）：48-53.
[6] 殷石，付瑜，曹峰林，等.p53基因定量表达与胃癌复发和预后的关系[J].哈尔滨医科大学学报，2016，50（2）：179-181.
论文作者:贺惠
论文发表刊物:《航空军医》2018年12期
论文发表时间:2018/8/24
标签：胃癌论文; 患者论文; 基因论文; 定量论文; 统计学论文; 外周血论文; 意义论文; 《航空军医》2018年12期论文;