娄莉[1]2001年在《HHK人工腱植入兔跟腱诱导自体腱形成机制的研究》文中认为本研究以新西兰大白兔为实验对象，将HHK人工腱植入离断的兔跟腱。采用组织学、生物力学、分子生物学等技术观察自生腱形成过程中的自生腱的形态学和拉应力的变化以及某些因子的表达，探讨人工腱诱导自生腱形成的机理，为HHK人工腱的临床应用和基础研究提供理论依据。 研究内容分为叁部分： 一、HHK人工腱植入后形态学的变化。取植入后第1、3、6、9、12、16、20周人工腱标本，以正常肌腱为正常对照。光镜、电镜观察显示，活化的腱细胞胞质内粗面内质网丰富，高尔基复合体发达，具有蛋白质分泌细胞的超微结构特点。尚可见巨噬细胞、多核巨细胞聚集在人发周围，胞质内可见吞噬的人发碎片。第12周人发被完全降解。胶原纤维逐渐有少变多，由疏松紊乱变得致密规则。 二、HHK人工腱植入后拉应力的变化。取植入前人工腱、正常肌腱、植入后第9、12周的自生腱标本，测量其拉应力强度。结果显示，植入前人工腱的拉应力高于正常肌腱，植入后第9周，自生腱的拉应力强度很弱，主要是靠未被降解的HHK人工腱组分来维持。植入后第20周，自生腱的拉应力达到正常肌腱的58.7％，已能适应一定强度的体力活动。 叁、HHK人工腱植入后某些因子的变化。取植入后第3、6、9、12、16、20周自生腱及正常肌腱标本，通过RT-PCR技术测量Ⅰ型胶原，MMP-1，TIMP-1，TGF-β_1，bFGF等细胞因子的mRNA水平。结果表明，Ⅰ型胶原合成增加（P＜0.05）。正常肌腱组织MMP-1和TIMP-1无表达。植入后第6周呈低表达，第9周达高峰，第20周表达又降低，且MMP-1/TIMP-1比值逐渐减低；细胞因子TGF-β_1和bFGF实验组的表达高于对照组（P＜0.05），且植入后第20周bFGF表达量较高。 实验结果提示：人发的降解是由单核吞噬细胞系统来完成。人发在巨噬细胞、多核巨细胞、腱细胞等细胞分泌的特殊因子作用下裂解成碎片，最终被巨噬细胞、多核巨细胞吞噬降解。自生腱的形成是腱细胞和细胞因子共同作用的结果。两断端肌腱的腱细胞迁移至HHK人工腱。在TGF-β_1和bFGF的作用下，腱细胞增殖活化，分泌胶原蛋白，合成胶原纤维，且bFGF促进血管增殖。植入后期，自生健的重塑由胶原酶和拉应力的共同作用来完成。
朴英杰, 董为人, 路艳蒙, 李佩英, 董武[2]2002年在《HHK人工腱诱导再生腱形成过程中腱细胞的增殖和凋亡与胶原原纤维形成与降解的关系》文中研究说明本实验室采用了HHK人工腱诱导兔跟腱部自体腱形成的动物模型,取植入后第3、6、9周再生腱组织块经光镜和电镜常规处理,对HHK人工腱诱导自体腱形成过程中的胶原原纤维及腱细胞的形态学改变进行观察。结果:植入后第3周,光镜下可见人工腱开始降解,大量的腱细胞自植入部形成腱细胞增殖区,并可见细胞开始分化:电镜观察可见:腱细胞外围有由腱细胞分泌物形成的一级胶原原纤维(8.1±0.4nm)和二级胶原原纤维(32±
肖应庆, 董为人[3]2004年在《人发角蛋白人工腱的研究和应用》文中研究指明由于创伤或疾病所造成的肌腱缺损、短缩、变形等导致的肢体功能障碍,需进行手术修复。传统的修复方法是自体腱移植或转位术,但存在材料来源困难等问题,人们便寻找肌腱的代用品。国内外先后有人采用碳素纤维、硅橡胶和未经改构处理的人发等用于制作人工腱。其共同存在的一个主要问题,是人工腱与自体腱的衔接部不能牢固结合,拉应力逐渐衰减,最终在结合部位断裂。人们的视线瞄向了异体腱,通过深低温冷冻和冷冻干燥处理,抑制和破坏了肌腱细胞HLA-Dr的抗原性,在临床上取得了较好的治疗效果。但仍存在材料来源困难,愈合时间长,拉应力衰减等问题。20世纪80年代,人们开始了通过组织工程途径来解决人体肌腱的替代材料。虽然已经取得了较大进展,但毕竟还处于研究阶段,应用于临床,尚需时日。为此,人们仍在致力于寻找和研制肌腱永久性替代物。于是,诞生了人发角蛋白人工腱。其特点①组织相容性好。②可被机体吸收,并诱导形成自体腱。③腱的衔接部位能组织愈合,结合牢固,拉应力无明显衰减。④可屈性和绕弯性好。⑤未出现影响功能活动的粘连,无需行Ⅱ期松解术。⑥压力蒸汽灭菌,安全可靠。贮存、运输方便。⑦原料来源充足。
蒋东萍[4]2000年在《HHK人工腱诱导自生腱形成机制的形态学研究》文中指出HHK人工腱植入研究已有报道，基础与临床均有相应的文献发表，但至今为止未见关于人工腱植入后诱导自生腱形成机制的系统报道。本实验以兔为动物模型，将HHK人工腱植入离断的兔跟腱，采用组织学技术、化学测定和原位杂交法完成植入后形态学研究、胶原纤维的变化和某些关键性的生长因子的表达。 研究内容分为叁部分： 一、植入后人工腱降解和自生腱形成形态学变化。取植入后第1、2天、第1周人工腱与兔自体腱吻合端及植入后第2、3、6、9周人工腱中段，采用常规石蜡切片、HE染色和电镜技术，证实人工腱能诱导与自体腱相似的自生腱。植入后1周内主要表现为无菌性炎症反应；植入后第1周由于腱外膜的启动作用，出现一膜状物粘附在人工腱上，此膜状物是纤维鞘的雏型，随后纤维鞘不断增厚，包裹人工腱，在此封闭的环境中完成人工腱的降解过程；植入后第2周纤维鞘已明显增厚，尚无血管出现，有包裹人发的迹象；植入后第3周，纤维鞘血管丰富，人发降解活动活跃；植入后第6周，纤维鞘继续增厚，可见大量被裂解、消化的人发碎块，人工腱区出现来自腱细胞的成束的胶原纤维；植入后第9周，纤维鞘变薄形成腱外膜，人工腱消失，仅存少量的色素由单核细胞清理，胶原纤维排列规则近似正常肌腱结构。人工腱植入物经过细胞粘附、肉芽组织包裹、细胞侵入、消化裂解，最后由巨噬细胞吞噬残余的色素颗粒，完成降解吸收过程。 二、胶原纤维的变化。取植入后第2、3、6、9周的人工健中段利用Van Geison（VG）特殊染色法显示胶原纤维、分光光度法检测羟脯氨酸以反映胶原蛋白的代谢状况。VG显色结果，植入后第2周，纤维鞘中的胶原纤维呈细丝状，断断续续，杂乱无章，为幼稚状；植入后第3周，纤维鞘中除上述状态的胶原纤维外，出现较成熟的、粗大的、围绕人工腱成层排列的胶原纤维；植入后第6周，纤维鞘中胶原纤维多成层排列，人工腱区大量显色的胶原纤维，平行于肌腱长轴；植入后第9周，镜下几乎全是显红色的胶原纤维，长轴方向与自体键一致，胶原纤维成束排列，纵切面可见波浪状皱折，近似正常肌臃结构。羟脯氨酸测定结果表明植人后第2、3、6、9周各组间胶原蛋白含量有明显差异；前叁组蛋白含量逐渐升高，与正常肌健蛋白含量有差异；第9周较第6周低，且与正常肌健无明显差异。 叁、bFGF、TGF 6。mRNA的表达。运用原位杂交技术，显示bFGF、TGF 6。mRNA在组织与细胞中的定位与表达。植入后第 2周时 Bfgf mRNA表现出强阳性反应，主要在健鞘中幼稚的结缔组织细胞中表达，TGF卜2 mRNA表达较弱；植人后第 3周 bFGFmRNA弱阳性，仅在少量的血细胞有反应，纤维鞘部位的成纤维细胞 TGF卜 mRNA强阳性反应；植人后第 6周结果与第 3周近似，植入后第9周与正常肌键两者均呈弱阳性反应或阴性反应。 研究结果提示在人工健降解、自生诞形成和重塑的整个过程中，健膜、成纤维细胞、炎性细胞等扮演重要的角色。它们或通过自身的分化，或分泌细胞因子如 bFGF、TGF i） 或行使吞噬、诱导功能，使得人工懈含量不断减少，胶原纤维量不断增加，胶原纤维逐渐成熟有序，最后形成自生健。
参考文献：
[1]. HHK人工腱植入兔跟腱诱导自体腱形成机制的研究[D]. 娄莉. 第一军医大学. 2001
[2]. HHK人工腱诱导再生腱形成过程中腱细胞的增殖和凋亡与胶原原纤维形成与降解的关系[C]. 朴英杰, 董为人, 路艳蒙, 李佩英, 董武. 解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编. 2002
[3]. 人发角蛋白人工腱的研究和应用[J]. 肖应庆, 董为人. 中国临床康复. 2004
[4]. HHK人工腱诱导自生腱形成机制的形态学研究[D]. 蒋东萍. 第一军医大学. 2000
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