（石嘴山市疾病预防控制中心 宁夏石嘴山 753000）
【摘要】目的：为了严格控制麻疹IgM 抗体ELISA 检测试剂的质量,消除试剂误差产生的检测错误。方法：根据麻疹IgM 抗体定量测定结果,选择标准曲线线性良好部分血清标本制备外对照血清, 并计算出外对照血清对于海泰公司试剂的参考值范围。结果： 实验测得外对照血清的活性为48.3～60.6Units/ml,对于海泰公司试剂的OD参考值范围是0.631～0.675。用此外对照血清对海泰公司共4个批号的试剂盒做复核验证,发现海泰公司批号为20151108试剂盒检测结果失控, 而正是此批号试剂对200份血清标本的检测阳性率和符合率明显低于其它试剂盒。还验证了此外对照血清的有效活性在4℃条件下可至少维持6个月。结论：对于只有阴/阳性定性指示的ELISA 检测试剂盒, 制备特定OD 值范围的外对照质控血清很有必要。
【关键词】ELISA;麻疹病毒;IgM 抗体;血清外对照
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）30-0124-02
麻疹是由麻疹病毒引起的一种以发热、呼吸道其他症状和全身斑丘疹为特征的急性病毒性传染病[1]，人类是麻疹病毒的自然宿主，麻疹通过呼吸道和直接接触传播。WHO已把麻疹列为第3类消灭的急性传染病。我国也提出控制麻疹的根本措施是提高免疫接种率，加强实验室监测工作[2]。快速准确的实验室诊断对控制麻疹疫情、消除麻疹有着极其重要的意义。对于麻疹疑似患者实验室一般采用ELISA法检测患者急性期血清IgM 抗体进行诊断[3]。目前各级疾病预防控制中心的麻疹实验室多数采用珠海海泰生物试剂制药公司生产的两种麻疹病毒IgM 抗体诊断酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂（过夜法和快速法），进行对比和评价用ELISA定性检测麻疹病毒血清IgM抗体时，由于某些试剂盒内提供的阴/阳性对照血清只能定性指示，无OD值参考范围，因此凭借试剂盒内阴/阳性对照血清指示有时会造成检验结果的失控而出现假阴/阳性结果。为了提示检测结果的误差，本文制备了试剂盒外的对照血清，专门针对临界值标本进行控制，实验及评价过程如下。
1.材料和方法
1.1 标本来源
选择近年来收集的麻疹IgM抗体ELISA检测OD临界值附近血清标本共200份。
1.2 检测试剂
麻疹IgM抗体ELISA检测试剂盒购自广东珠海海泰生物制药有限公司（以下简称海泰公司，批号为20151108、20151110、20151117和20151123）。
1.3 检测方法
用海泰公司出品的上述4个批号麻疹IgM抗体检测试剂盒定性检测，采用捕获ELISA 法。
1.4 统计学方法
用SPSS 17.0统计学软件，计量资料以均数±标准差（x-±s）表示，计数资料以百分比表示。分别采用单因素方差分析（ANOVA）和χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 ELISA 法检测麻疹IgM抗体结果
用海泰公司4个批号ELISA试剂对OD值临界的200份血清进行检测并比较结果，计算每种试剂检测阳性率；将海泰公司4个批号试剂的检测结果与Virion 公司试剂检测结果比较并计算符合率。结果发现，海泰公司批号为20151108试剂盒麻疹IgM抗体检测阳性率和符合率分别为3.5%和64.8%，明显低于其余批号试剂盒检测结果（P＜0.01），而海泰公司其它批号试剂盒的检测阳性率和符合率差异无统计学意义（P＞0.05），结果见表1。
3.讨论
1954年Enders与Peebles应用人胚肾细胞培养麻疹病毒获得成功之后，多位学者开始研制麻疹疫苗以控制麻疹的传染[2]。我国于1965年开始使用麻疹减毒活疫苗，可靠地保护了绝大多数9～12个月乃至年龄更大的儿童。然而，由于麻疹疫苗的广泛使用，接触野毒株的机会少，体内抗体水平逐年减少，最终可导致不能完全抵御麻疹病毒的侵袭，出现不典型的临床表现。于是有效的检测方法对麻疹的诊断和及时的治疗起着重要作用。
在麻疹实验室日常检测工作中发现，选用某试剂盒进行麻疹IgM 定性检测时，有时阴/阳性对照虽然正常显色，却不能提示试剂误差，很容易出现假阴/阳性结果。为了弥补试剂盒内阴/阳性对照的缺陷，本文参照相关方法制备了标准外对照血清，并且测定了其活性值和对于特定公司试剂的OD 值范围[1]。本次研究发现，某一批号试剂与其他批号试剂之间检测阳性率和符合率有明显差异。可见，对于检测阳性率和试剂间检测结果符合率均有差异的批号为20151108试剂盒，外对照血清9次复核OD值均在0.632～0.675参考值范围以外；而对于检测结果符合率很好的批号为20151117和20151123试剂盒，9次复核OD值均在参考值范围以内。由此，用某试剂盒检测时根据外对照血清OD值是否失控就能指示试剂盒误差，提示检测结果失控。总之，制备麻疹IgM抗体外对照血清对控制麻疹IgM ELISA检测质量有重要意义。
【参考文献】
[1]杨屹，刘雪娟，孟茹，等.弱阳性外部对照质控血清的制备方法[J].中国国境卫生检疫杂志,2004,27(5):269-270.
[2]蒋泓，许文波，Sato Takeshi.乳胶凝集法检测麻疹IgM抗体的应用[J].中国计划免疫，2003,9(2):98-100.
[3]王虹玲.两种ELISA试剂检测麻疹病毒IgM抗体实验室对比与评估[J].中国卫生检验杂志，2007,17(10):1817-1818.
论文作者:程艳君
论文发表刊物:《心理医生》2016年30期
论文发表时间:2017/1/12
标签：麻疹论文; 血清论文; 抗体论文; 试剂论文; 批号论文; 试剂盒论文; 阳性论文; 《心理医生》2016年30期论文;