（河北北方学院附属第二医院 河北 宣化 075100）
【摘 要】目的：探析实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的临床价值。方法：选取2013年7月-2014年10月我院收治的480例疑似乙型肝炎患者作为研究对象，首先采用血清学标志物方法检测确定患者为乙型肝炎，然后采用实时荧光PCR法对患者进行检测，确定患者为乙型肝炎。结果：实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的结果基本上与血清学标志物方法检测结果相同，但实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的相关数据准确性较高，数据描述更为详细。大、小三阳患者血清中PCR结果均具体较高拷贝数，但HbsAb（-）或HbsAb（+）标本PCR却存在个别阳性差异情况。结论：实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的数据较为详细，准确率也比较高，具有积极的临床使用价值，值得广泛推广。
【关键词】乙肝病毒DNA；实时荧光PCR法；血清学
【中图分类号】R446.1 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）6-0618-02
临床通常都是采用血清学标志法检测患者是否为乙型肝炎病毒的携带者，其主要是利用检测患者血液的方式确定，但若操作不当，则容易导致检测者也感染上乙肝病毒。因此，积极探寻代替血清检验的乙型肝炎病毒DNA的方法已经成为各个国家医学专家研究的重要内容[1]。本文选取我院收治的480例疑似乙型肝炎患者作为研究对象，分析实时荧光PCR法检测方法在临床中的应用效果，现作如下总结汇报：
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年7月-2014年10月我院收治的480例疑似乙型肝炎患者作为研究对象，其中男患者300例，女患者180例，患者年龄16-72岁，平均年龄（54.5±3.7）岁；全部患者均知晓本次实验的目的，并在医生指导下自愿签署知情同意书。
1.2 方法
实验试剂和仪器
首先采用血清学标志物方法（试剂盒由兰州标佳生物技术有限公司生产提供，）检测确定患者为乙型肝炎，一切操作按照试剂盒中的说明书进行，将得到的乙肝病毒DNA数据作为参照组。然后采用实时荧光PCR法（按照试剂盒的相关操作进行）对患者进行检测，将得到的乙肝病毒DNA数据作为实验组，对两组数据进行比较。
1.3 统计学方法
将此次研究之中得到的数据选择统计学软件包SPSS20.0进行分析和处理，得到的所有计数资料采用百分率（%）表示，并将组间数据比较进行x2检验，若P＜0.05则表示差异有统计学意义，若P＞0.05则表示差异无统计学意义。
2 结果
实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的结果基本上与血清学标志物方法检测结果相同，但实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的相关数据准确性较高，数据描述更为详细。大、小三阳患者血清中PCR结果均具体较高拷贝数，但HbsAb（-）或HbsAb（+）标本PCR却存在个别阳性差异情况。如数据中得到的HbsAg（+）、HbcAb（+）等大三阳数据的阳性率高达98.0%左右，而HbsAg（+）、HbeAb（+）、HbcAb（+）等小三阳数据的阳性率则为69.9%左右，HbcAb（-）、HbsAg（-）、HbsAb（-）、HbeAb（-）、HbeAb（-）的阳性率为2.3%左右。上述数据充分证明，实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA数据详尽，准确率较高。
3 讨论
乙型病毒性肝炎也可以简称为乙肝，其是临床消化内科的常见病和多发病，人们的肝脏是主要发病部位。目前世界上最广泛流行的、危害最严重的病毒性肝炎之一就是乙肝。根据世界卫生组织统计的相关数据，世界上每年约有100多万因为乙肝死亡，其中慢性乙肝携带者数量已经在世界人口中占据10%的比例，20%的急性乙肝患者也会转变为慢性乙肝，然后进一步发展成为肝硬化或肝癌。所以，对乙肝进行快速准确的诊断，并积极采取针对性治疗措施，对改善患者病情，提高生活质量来说具有非常重要的作用[2]。
乙肝属于一种比较严重的传染性疾病类型，血液传播、母婴传播、性传播、皮肤黏膜损伤传播是其比较常见的传播途径，其中的血液传播主要是与乙肝病毒携带者的血液进行接触，所以为避免传染，需要杜绝与乙肝患者血液接触；禁止乙肝病毒携带者生育，避免下一代也成为乙肝患者。根据病程长短，可将乙肝分为慢性乙型肝炎和急性乙型肝炎，其中急性乙型肝炎的危险性更高，甚至会危及到患者生命安全。根据病情轻重程度，可将乙型病毒性肝炎划分成肝炎肝硬化、活动性乙型肝炎、重型肝炎、乙肝携带者等[3]。
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近年来，乙肝模式不断复杂化，临床方面针对乙肝患者的病毒感染复制情况很难做出准确判断，甚至发生漏诊的情况，因为乙肝病毒DNA是反映乙肝病毒存在的重要依据，其可作为活动性复制以及传染性的重要指标之一。一直以来临床都是采用血清学标志法来确定患者是否为乙型肝炎病毒携带者，但在收集患者血液样本时，若操作不规范就会导致工作人员也发生感染。另外一方面，这种检测方法只是检测人体对乙肝病毒DNA的免疫反应情况，不能进行最后的定性，也无法直接判断出病毒的载量情况[4]。
随着医学科技的不断发展，实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的方法在临床中普遍推广开来。本组实验结果显示，实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的结果基本上与血清学标志物方法检测结果相同，但实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的相关数据准确性较高，数据描述更为详细。大、小三阳患者血清中PCR结果均具体较高拷贝数，但HbsAb（-）或HbsAb（+）标本PCR却存在个别阳性差异情况。如数据中得到的HbsAg（+）、HbcAb（+）等大三阳数据的阳性率高达98.0%左右，而HbsAg（+）、HbeAb（+）、HbcAb（+）等小三阳数据的阳性率则为69.9%左右，HbcAb（-）、HbsAg（-）、HbsAb（-）、HbeAb（-）、HbeAb（-）的阳性率为2.3%左右。上述数据充分证明，实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA数据详尽，准确率较高。本研究结果与俞安清,陈效琴,苏丽萍等人在实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义一文中表述的结果基本一致[5]。另外，也有相关学者的研究报告显示，乙型肝炎患者出现HbsAb（+）之后，其血清之中仍存在DNA复制情况，且随着时间的不断推移，病情也会随之发展，乙肝病毒DNA的检出会呈现下降趋势，采取定量PCR检测，可将患者血液中病毒的拷贝数充分显示出来，使主治医生可以掌握病毒在患者体内的复制的动态情况，从而准确判断病情，适当的调整治疗方法、进行疗效观察、以及达到临床治疗终点。实时荧光PCR法检测法可对乙肝病毒DNA复制水平进行准确判断，同时也能将病程变化情况和临床治疗恢复情况充分显示出来，同比传统血清学标志法，其在检测乙肝病毒方面的优势更加明显[6]。
但是，采用实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA时，必须注意一些相关事项，如本组实验中，选择的实验对象都是年龄跨度比较大的乙型肝炎携带者，青少年、青年、老年等三个年龄段都涵盖在内，这样选择的目的是为了确保实验的准确性，以免发生偏离，导致结果出现误差。首先给予全部患者血清学检验方法，是为了确定患者是否为乙肝患者，以减少实验结果的误差性。研究之中最重要的一点是一定要准确记录两种检测方法得到的数据，并做好保存措施，这样作的目的是为了两组数据对比时提高准确率。由此可见，乙肝病毒NDA应用实时荧光PCR法检测时，一定要按照既定标准和要求进行，以降低误差率。进行检测时，应该综合考虑患者的实际情况，以选择适宜的检测方法，避免出现其他意外情况，影响检测结果的准确性和真实性[7-8]。
综上所述，实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA的数据较为详细，准确率也比较高，具有积极的临床使用价值，值得广泛推广。
参考文献：
[1]马兰花,任君,刘利等.探讨实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA在临床中的应用[J].西南国防医药,2009,19(8):815-817.
[2]王金梅.探讨实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA在临床中的应用[J].中国医药指南,2013,(25):173-173.
[3]王希涛.两种乙肝病毒DNA实时荧光定量检测试剂的比较[J].国际检验医学杂志,2014,(6):754-754,787.
[4]LIU Yan,WANG Chun-mei,CHENG Jun等.Hepatitis B virus in tenofovir-naive Chinese patients with chronic hepatitis B contains no mutation of rtA194T conferring a reduced tenofovir susceptibility[J].中华医学杂志（英文版）,2009,122(13):1585-1586.
[5]俞安清,陈效琴,苏丽萍等.实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义[J].中国临床实用医学,2010,04(1):88-89.
[6]肖晓光,王晶,林琳等.应用实时荧光PCR方法检测乙肝病毒1896位点变异及临床意义[J].中国实验诊断学,2014,(11):1829-1832.
[7]Yu Xuan Koo,Daniel SW Tan,Iain BH Tan等."Anti-HBc alone" in human immunodeficiency virus-positive and immuno-suppressed lymphoma patients[J].世界胃肠病学杂志(英文版),2009,15(30):3834-3835.
[8]Paraskevi Mina,Sarah P Georgiadou,Christos Rizos等.Prevalence of occult hepatitis B virus infection in haemodialysis patients from central Greece[J].世界胃肠病学杂志（英文版）,2010,16(2):225-231.
论文作者:许丽枫
论文发表刊物:《河南中医》2015年6月供稿
论文发表时间:2015/10/19
标签：荧光论文; 乙肝病毒论文; 实时论文; 患者论文; 乙型肝炎论文; 数据论文; 血清学论文; 《河南中医》2015年6月供稿论文;