胶州市人民医院儿科 266300
关键词：儿童；支气管哮喘；过敏原检测
支气管哮喘是儿童时期最常见的慢性疾病之一，它是由多种细胞，包括炎症细胞（嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞等）和细胞组分共同参加的所形成的气道弥漫性、慢性、变应性炎症性疾病[1]。近年来全球哮喘的患病率的急剧上升表明环境过敏原的作用更为主要。由此可见过敏原的检测在哮喘的发病机制中具有显著的意义。本实验主要研究支气管哮喘儿童吸入性过敏原和食物过敏原的情况，为哮喘儿童的病情评估、个体化治疗及其预防工作提供科学依据。
1材料与方法
1.1一般资料
所有病例均选自2013年12月—2015年2月，在胶州市人民医院儿科门诊及病房就诊的70例支气管哮喘缓解期（观察组）患儿及正常健康体检儿童（对照组）20例为研究对象，哮喘患儿诊断符合儿童支气管哮喘诊断标准[2]和哮喘缓解期标准[3]，且患儿于就诊前2周内未使用过糖皮质激素、免疫调节剂及抗组胺药物等。其中男孩45例，女孩45例，年龄在2岁-11岁之间，按年龄分组，<5岁20例，5-7岁35例，>7岁35例。两组患儿年龄、性别经统计学处理，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2方法
采用德国欧蒙公司提供的试剂盒，利用欧盟印迹法，对所选儿童行吸入性过敏原和食物过敏原筛查。
（一）抽取患儿静脉血3ml，静置于常温下自然凝固，采用普通离心机，将转速调至3000r/min，将凝固的血液放置于离心机中，离心3min后，取上层血清1ml，放置在2-8℃冰箱中保存24-72小时。采用我院中心实验室由欧蒙公司生产并提供的特应性过敏原中国组合3体外检测试剂盒，按照使用说明，利用体外定性的免疫印迹法，对哮喘缓解期和正常儿童共90例儿童进行检测。
（二）检测步骤 1）预处理：将膜条放置于温育槽中，膜条上有编号的一面朝上，加入缓冲液1ml，于温室在摇摆床上温育5min，之后吸去温育槽中的液体，2）血清温育：在温育槽中加入患者血清1ml，在摇摆床上室温温育60min，3）吸去槽内液体，在摇摆床上用1.5ml缓冲液清洗膜条3次，每次5min，4）酶结合物温育：在温育槽中加入1.0ml酶结合物，在摇摆床上室温温育60min，5）清洗：吸去槽内液体，在摇摆床上用1.5ml缓冲液清洗膜条3次，每次5分钟，6）底物温育：在温育槽中加入1.0ml底物液，与摇摆床上室温温育10分钟，7）终止：吸去槽内液体，用蒸馏水清洗膜条3次，每次1min，8）结果判定：将实验膜条放置在结果判定模板中，风干后判定结果。
（三）结果判定：在判定结果时必须考虑到条带的位置和颜色的强度。通过比较结果判定模板和已温育的检测膜条可确定抗相应过敏原IgE抗体。
条带的颜色强度可分为4类：
1.3 观察指标
哮喘儿童过敏原检测的阳性率，及其主要过敏原种类。
1.4 统计学处理
所有资料分析采用SPSS16.0统计软件包进行。进行正态性与方差齐性检验，符合正态资料，方差齐。
结 果
（一）观察组与对照组行吸入性和食入性过敏原筛查实验，两者过敏原结果比较：
注：从表中可看出观察组和对照组儿童行过敏原检测，在所测结果中，观察组阳性率较高，而对照组儿童阳性率为0，两者阳性率比较，具有统计学意义，P＜0.05。说明在哮喘的发病机制中，过敏原与哮喘关系密切，是诱发哮喘的常见危险因素。
（二）不同年龄之间过敏原的比较
讨 论
近几十年来中国儿童的支气管哮喘发病率也有显著上升趋势。其中很大一部分是由于过敏原因所致，研究发现它的发病大多与接触过敏原相关。哮喘属于变态反应范畴，是人体免疫应答的失衡。其临床意义是一种对异物的超敏反应。通常这些异物对于正常儿童是无害的，但对于具有过敏反应的患儿而言，则可产生强烈的病理性免疫应答。最常见的过敏反应为Ⅰ型过敏反应，其特征是形成特异性的IgE抗体。一旦跟过敏原接触后很快就会产生诸如发红、水肿以及瘙痒等症状。导致吸入性过敏反应原因很多，可由季节过敏原引起。除了空气传播的过敏原可引起过敏反应外，还有食物也可以引起过敏反应，最常见的食物过敏原有花生，大豆，小麦，贝类，鱼，牛奶，蛋类和坚果。食物过敏是由于人体进食某种蛋白质后所引起的机体免疫系统紊乱的异常的病理性反应。根据发病机制可分为IgE介导（速发）的和非IgE介导（迟发）的反应；前者包括IgG途径，其属于Ⅲ型变态反应，亦称免疫复合物型或血管炎型超敏反应。某些个体食用动物蛋白或服用某些药物后，可发生胃肠道过敏症，该途径占少数，其机制为：患者胃肠道分泌型IgA含量明显减少，并多伴有蛋白水解酶缺乏。由于患者肠粘膜屏障防御作用减弱，肠壁易受损伤，同时肠内某些食物蛋白尚未完全分解即通过黏膜而被吸收，从而作为过敏原诱发消化道过敏反应。导致食物过敏反应的绝大多数都是IgE介导的。IgE介导的食物过敏反应一般发生较急，且多见于对某种单一的食物过敏。有研究发现，虽然食物类过敏原很少引起支气管哮喘的症状发作，但可能会导致气道高反应性的增高[4]。现已有研究证实，在婴幼儿期血清中查到食物类SIgE，是儿童期吸入过敏原敏感或以后发生的过敏性哮喘的重要的危险因素[5]。本研究通过对哮喘缓解期的患儿及正常儿童行过敏原检测发现，在哮喘的发病机制中，过敏原是诱发哮喘的常见危险因素，与哮喘有密切的关系，且不同年龄段患儿过敏原不同，婴幼儿期以食物过敏原为主，年长儿以吸入性过敏原为主。为哮喘的合理化、规范化、个体化治疗提供科学依据。
参考文献：
[1]宋广卿，等.嗜酸性粒细胞及其毒性蛋白与哮喘.国外医学呼吸系统分册 1995，5（2）：67.
[2]洪建国.2006年版全球哮喘防治创议[J].使用儿科临床杂志，2007，22（16）：1278-1280.
[3]中华医学会呼吸病学分会哮喘组。支气管哮喘防治指南（支气管哮喘的定义、诊断、治疗、疗效判断标准及教育和管理方案）[J].中华结核和呼吸杂志，2008，31（3）：77.
[4]赵京.婴幼儿变应原过筛实验在儿童变态反应性疾病检测中的应用[J].国际儿科学杂志，2007，（34）：162-165.
[5]贾守月.荨麻疹116例疗效观察[J].中国医学创新，2008，（5）：32-33.
论文作者:汪宏,王燕,刘敏
论文发表刊物:《健康世界》2015年8期供稿
论文发表时间:2015/11/10
标签：过敏原论文; 哮喘论文; 支气管哮喘论文; 儿童论文; 食物论文; 患儿论文; 缓冲液论文; 《健康世界》2015年8期供稿论文;