赵海燕[1]2004年在《β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成及筛选》文中研究表明本文简述了哮喘的发病机制，并从分子水平较系统的介绍了β_2-肾上腺素受体的结构及β_2-肾上腺素受体激动剂的作用机制，扼要介绍了β_2-肾上腺素受体激动剂的发展概况和构效关系。在总结β_2-肾上腺素受体激动剂构效关系的基础上，结合马布特罗和SPFF的长效、高选择性等特点，特别是其结构的特殊性，设计并合成了20个苯乙醇胺类化合物。其中12个(ZHY-01至ZHY-12)化合物为2-苯基-2-氨基-乙醇盐酸盐类化合物，是通过取代的溴代苯乙酮先还原后胺解制得的；8个(zHY-13至ZHY-20)化合物为1-苯基-2-氨基-乙醇盐酸盐类化合物，是通过取代的溴代苯乙酮先胺解再还原得到的。ZHY-18、ZHY-19和ZHY-20分别与ZHY-01、ZHY-03和ZHY-06互为同分异构体，文中分别从反应机理及谱图上的差别对目标化合物的结构进行了解析。所有化合物经IR、~1H-NMR和MS等分析测试，确定其结构正确。初步药理筛选结果表明：除ZHY-05外，其他19个化合物均对组胺诱导的离体豚鼠支气管平滑肌痉挛具有不同程度的松弛作用。 另外对苯乙醇胺类化合物的固相合成方法进行了初步探索。选用CMPP树脂为固相载体，进行了上载、溴代、还原及裂解等步骤的固相合成方法研究。 运用比较分子力场分析法对所合成的苯乙醇胺类化合物进行了叁维构效关系研究，为进一步进行结构修饰，寻找更理想的β_2-肾上腺素受体激动剂奠定基础。
张莉[2]2002年在《β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成及筛选》文中进行了进一步梳理本文简述了哮喘的发病机制，并从分子水平较系统的介绍了β—肾上腺素受体的结构和β_2—肾上腺素受体激动剂的作用机制，扼要介绍了β_2—肾上腺素受体激动剂的发展概况和构效关系。在总结β_2—肾上腺素受体激动剂构效关系的基础上，结合马布特罗的长效，高选择性等特点，特别是其结构的特殊性，运用电子等排原理，设计合成了17个苯乙醇胺类化合物，其中15个(ZL-001至ZL-015)为1—苯基—2—氨基—乙醇盐酸盐类化合物，是通过溴代酮先胺解再还原得到的，另外2个(ZL-016和ZL-017)为2—氨基—2—苯基—乙醇盐酸盐类化合物，是通过溴代酮先还原再胺解得到的。ZL-001和ZL-003分别与ZL-016和ZL-017互为同分异构体，文中分别从反应机理及谱图上的差别对目标化合物的结构进行了探讨。所有化合物经红外、氢核磁共振和质谱等分析测试，确定其结构正确。初步药理实验表明：有9个化合物(ZL-001、004、006、007、008、009、010、011、016)对组胺诱导的离体豚鼠支气管平滑肌痉挛具有不同程度的松弛作用。 另外对苯乙醇胺类化合物的固相合成方法进行了初步探索，选用CMPP resin为反应用树脂，在树脂上进行了连接，溴代，还原及裂解过程的固相合成方法研究。
陈建芳[3]2005年在《β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成及活性研究》文中研究表明本文简述了哮喘的发病机制，并从分子水平较系统地介绍了β_2-肾上腺素受体的结构和β_2-肾上腺素受体激动剂的作用机制，并简单综述了β_2-肾上腺素受体激动剂的发展概况和构效关系。在总结β_2-肾上腺素受体激动剂构效关系的基础上，结合马布特罗和本课题研究组研究开发的盐酸川丁特罗的长效、高选择性等特点，特别是其结构的特殊性，设计并合成了17个苯乙醇胺类化合物。其中11个(CX-07至CX-17)化合物为1-苯基-2-氨基乙醇盐酸盐类化合物，另外6个(CX-01至CX-06)化合物为2-苯基-2-氨基乙醇盐酸盐类化合物。CX-01、CX-03、CX-04、CX-05和CX-06分别与CX-08、CX-11、CX-9、CX-7和CX-10互为同分异构体，文中分别从反应机理及谱图的差别对目标化合物的结构进行了解析。所有化合物都经氢核磁共振、质谱和红外等分析测试，确定其结构正确。其中有12个化合物(CX-01、CX-02、CX-03、CX-04、CX-05、CX-06、CX-07、CX-09、CX-11、CX-13、CX-16和CX-17)为未见CA报道的新化合物。初步药理实验表明：所合成的17个化合物(CX-01至CX-17)对组胺诱导的离体豚鼠支气管平滑肌痉挛均具有不同程度的松弛作用。在此基础上，应用比较分子力场分析法(CoMFA)对本实验室所合成的70个(CB-001至CB-070)苯乙醇胺类化合物选择性的进行了叁维构效关系研究(QSAR)，为进一步结构修饰，寻找更理想的β_2-肾上腺素受体激动剂奠定基础。
潘莉, 赵海燕, 冀蕾, 张莉, 沈建民[4]2004年在《β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成》文中提出支气管哮喘是最常见的慢性气道炎症性疾病.β2-肾上腺素受体激动剂可迅速有效地降低支气管平滑肌张力,达到解除或减轻哮喘症状的目的.在英美和我国对哮喘的临床治疗中均首选长效β2-肾上腺素受体激动剂合用激素的疗法. 本课题研究组在总结传统的β2-肾上腺素受体激动剂构效关系的基础上,以现有的长效、高选择性β2-肾上腺素受体激动剂马布特罗为先导化合物,选取有代表性的支链胺、环状胺、直链胺,设计并利用method 1合成了一系列1-苯基-2-氨基乙醇盐酸盐类化合物(结构1).在总结大量工作经验的基础上,根据me-too设计合成了新型苯乙醇胺类化合
葛丹丹[5]2009年在《新型苯乙醇胺类化合物的设计、合成及活性研究》文中进行了进一步梳理本文简述了哮喘的发病机制、治疗药物以及β2-肾上腺素受体激动剂的作用机制等,并较详细地介绍了β2-肾上腺素受体激动剂的发展历程。基于对本课题组内苯乙醇胺类化合物的研究,结合川丁特罗的长效、高选择性等特点,利用分子力场相似性分析方法,设计并合成了未见文献报道的18个2-氨基-2-苯基乙醇类化合物,其中3-溴-4-氨基-5-苯磺酰基苯乙醇胺类化合物4个；3-氯-4-氨基-5-苯磺酰基苯乙醇胺类化合物2个；3-溴-4-氨基-5-甲磺酰基苯乙醇胺类化合物6个；3-氯-4-氨基-5-甲磺酰基苯乙醇胺类化合物5个；以及3-苯磺酰基-4-氨基苯乙醇胺类化合物1个,所合成的目标化合物及重要中间体经过核磁共振氢谱、质谱分析测试,确定其结构正确。初步药理实验表明：所合成的18个化合物(GDD-01-GDD-18)对组胺诱导的离体豚鼠支气管平滑肌具有不同程度的舒张作用,其中GDD-15、GDD-17能引起支气管平滑肌较大程度的舒张,而其他化合物无明显舒张作用。利用β2-AR晶体结构,通过分子对接方法,探讨化合物在活性位点的作用方式。
冀蕾[6]2003年在《β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的研究》文中指出本文简述了哮喘的发病机制，并从分子水平较系统的介绍了β_2-肾上腺素受体的结构和1-苯基-2-氨基乙醇类β_2-肾上腺素受体激动剂的作用机制，并简单介绍了该类β_2-肾上腺素受体激动剂的发展概况和构效关系。在总结1-苯基-2-氨基乙醇类β_2-肾上腺素受体激动剂构效关系的基础上，以本实验室所开发的长效、高选择性2-苯基-2-氨基乙醇类β_2-肾上腺素受体激动剂—SPFF为先导化合物，运用电子等排原理，设计并合成了17个(JL-001至JL-017)2-苯基-2-氨基乙醇类化合物，以及6个(JL-018至JL-023)1-苯基-2-氨基乙醇类化合物。为了对取代的苯环氧乙烷在碱性条件下的选择性开环机理进行简单探讨，设计并合成了4-硝基苯基母核结构的化合物：JL-024。共计24个化合物。JL-012至JL-017分别与JL-018至JL-023互为同分异构体，文中分别从反应机理及谱图上的差别对目标化合物的结构进行了表征。所有化合物经红外、氢核磁共振和质谱等分析测试，确定其结构正确。初步药理实验表明：所合成的24个化合物(JL-001至JL-024)对组胺诱导的离体豚鼠支气管平滑肌痉挛均具有不同程度的松弛作用。在此基础上，应用CoMFA研究了该类化合物的QSAR，为进一步结构修饰，寻找更理想的2-苯基-2-氨基乙醇类β_2-肾上腺素受体激动剂奠定基础。
邢瑞娟, 潘莉, 温西, 葛丹丹, 张予阳[7]2009年在《苯乙醇胺类化合物的合成及其抗哮喘活性研究》文中提出目的设计合成2-胺基-1-苯基乙醇类化合物并研究其抗哮喘活性。方法以取代苯乙酮为原料,经α-溴代、胺解、还原、成盐等反应合成目标化合物,采用离体豚鼠气管条法和β2-肾上腺素受体激动剂钙流筛选模型测定目标化合物的药理活性。结果设计并合成了15个苯乙醇胺类化合物,其中12个化合物是未见文献报道的新化合物,其结构均经过1H-NMR及MS谱确证。结论所合成的化合物初步证明为2β-肾上腺素受体激动剂,具有不同程度的支气管舒张作用,其中化合物1a~1d显示出较好的活性,值得进一步深入研究。
武杰[8]2017年在《中枢丁酰胆碱酯酶抑制剂—班布特罗类似物的制备及生物活性评价》文中研究指明阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种与胆碱能神经传递系统损伤有关的神经退行性疾病。研究表明乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,ACh E)和丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BCh E)可以水解乙酰胆碱(Acetylcholine,ACh),并与AD的病理过程密切相关。临床上使用胆碱酯酶抑制剂通过抑制AD患者脑中胆碱酯酶的活性进而提高乙酰胆碱的水平来减轻症状。在健康人脑中,ACh主要由ACh E水解,而BCh E只起到辅助的作用。但是随着AD病情的加重,脑内ACh E的水平会下降,在重度AD患者脑中BCh E起到主要水解ACh的作用。目前只有特异性的ACh E抑制剂和同时抑制ACh E及BCh E的双靶点抑制剂在临床上用于治疗AD,没有特异性的BCh E抑制剂。使用特异性的BCh E抑制剂治疗重度AD患者不仅可以提高脑内ACh的水平,还可以降低因过度抑制ACh E而带来的不良反应,同时可能会影响AD的病理过程。班布特罗(Bambuterol,BMB)在临床上用于治疗哮喘,同时对BCh E的选择性高且抑制活性好,由于其对心脏有不良反应且不易透过血脑屏障,直接将其用于治疗AD仍显不足。本文的主要目的是以BMB为先导化合物,开发高效低毒可以透过血脑屏障的特异性BCh E抑制剂,意义在于可以发现用于治疗AD的新药物。主要工作内容如下:1)以上市药物BMB为先导化合物,以保持BCh E抑制活性、降低心脏不良反应和提高脂溶性为目的,合理设计制备了36个化合物,其中35个化合物是未见报道的。Chemoffice软件预测结果显示多数化合物的脂溶性比BMB高。2)使用Ellman方法在体外测试类似物对胆碱酯酶的抑制活性。所有类似物对马BCh E的IC50要小于对电鳗ACh E的IC50,成药性较高的6a-2和6b-1及BMB对人ACh E的IC50大于10000 n M,对人BCh E的IC50小于10 n M,说明所有类似物都有抑制BCh E的活性,且6a-2和6b-1同BMB都是高活性的特异性BCh E抑制剂。测定BMB,6a-2和6b-1对马BCh E和人BCh E的二级酰化速率常数kI和脱酰化速率常数k3,发现叁者在同种酶中的kI值相近,表明叁者对BCh E的抑制速率相近;6b-1的k3值在同种酶中要小于BMB和6a-2,而BMB与6a-2相近,表明BCh E被叁者抑制后可以恢复活性,BCh E被6b-1抑制后的恢复速率比BMB与6a-2慢。说明6a-2和6b-1同BMB都是高效的BCh E抑制剂,对BCh E的抑制作用属于伪不可逆抑制。3)使用麻醉小鼠评价BMB,6a-2和6b-1对心率的影响。20 mg/kg给药剂量下,BMB显着提高小鼠的心率,6b-1对小鼠心率的作用弱于BMB,6a-2对小鼠心率的作用最弱且与Blank组相近。说明6a-2和6b-1对心脏的不良反应低于BMB。4)使用小鼠评价6a-2和6b-1对脑内胆碱酯酶活性的抑制情况,给药剂量为10 mg/kg,给药方法分别为灌胃给药一次,灌胃给药多次和腹腔给药一次。6a-2在灌胃给药一次,灌胃给药多次和腹腔给药一次后对脑内的BCh E活性有抑制作用,抑制率分别为6.50%,34.29%和34.87%,其中灌胃给药多次和腹腔给药一次后的酶活性变化与blank组相比具有显着性差异(P<0.01);而6a-2对ACh E的活性影响与blank组相比没有显着性差异(P>0.05)。6b-1在实验中对ACh E和BCh E的活性影响与blank组相比都没有显着性差异(P>0.05)。说明6a-2可以透过小鼠血脑屏障特异性的抑制脑内BChE的活性。本文设计合成了36个对BCh E活性有抑制作用的BMB类似物,其中有35个化合物是未见报道的;同时我们发现了具有较强的抑制中枢BCh E活性作用的新化合物6a-2,它与现有抑制剂相比具有较低的心脏毒性,该药对于作为开发治疗AD的新药具有重要的价值。
陈旭曜[9]2008年在《新型β_2-肾上腺素受体激动剂的设计、合成及活性研究》文中研究指明β_2肾上腺素受体激动剂是哮喘急性发作的首选治疗药物之一,它可以迅速有效地降低支气管平滑肌张力,达到解除和减轻哮喘症状的目的。本文简述了哮喘的发病机制,并从分子水平系统地介绍了β_2-肾上腺素受体的结构及β_2-肾上腺素受体激动剂的作用机制,扼要介绍了β_2-肾上腺素受体激动剂的发展概况和构效关系。本论文采用计算机辅助药物设计中的同源模建技术对β_2-肾上腺素受体的叁维结构进行了模建,采用MODELLER取得的模型,PROCHECK评测显示结果良好,较模板有更多部分位于良好区域。β_2受体属于G蛋白偶联受体,为七次跨膜蛋白,其天然丰度低,结构多样且不稳定,同源性较低,分子模拟的工作量较大,因此本论文从本实验室已经合成的化合物及其药理活性出发,进行基于配体的药物设计。本论文从本实验室已经合成的化合物及其药理活性出发,进行定量构效关系研究。CoMFA研究回归系数为0.910,表明该模型有较好的预测能力,模型给出的等势图表明在苯环3位为小体积吸电性取代基时将会使该类化合物的活性增强,如-F,-Cl,-Br等卤素;苯环5位取代基为大体积的吸电性取代基时将会使该类化合物的活性增强,如-CF_3,-CN,-NO_2。因此,结合本课题组研究开发的长效、高选择性的β_2-受体激动剂川丁特罗的结构特点,在苯环的3位引入氯、溴等卤素和5位引入硝基,设计并合成了叁类共计27个苯乙醇胺类化合物(C01至C26共26个化合物未见CA报道),其中1个(C27)为1-苯基-2-氨基乙醇类化合物,26个(C01至C26)为2-苯基-2-氨基乙醇类化合物。所合成的目标化合物及中间体经过~1H-NMR和MS分析测试,确定其结构正确。其中C08和C27互为同分异构体。文中以C08和C27为例,从谱图的差别对两类化合物的结构进行了解析,并从反应机理的角度对两类化合物的合成进行了探讨。采用激动剂钙流筛选模型,对17个目标化合物初步药理实验结果表明,均能引起细胞内钙离子浓度水平变化,证明对β_2受体有不同程度的激动作用,其中C05,C11作用最强,能引起较大钙离子浓度水平变化,受体选择性试验正在进行中。
王艺熹[10]2008年在《沙丁胺醇兔单克隆抗体的制备及ELISA快速检测试剂盒的研制》文中研究表明沙丁胺醇(Salbutamol,Sal)是人工合成的水杨醇类β-肾上腺素激动剂,化学名为1-(4-羟基-3羟甲基苯基)-2-(叔丁胺基)乙醇硫酸盐,是一种选择性β2-受体激动剂。临床上Sal主要用于支气管哮喘的治疗。近年来,因发现Sal具有促进肌肉沉积的作用,可用作牛、羊、禽、猫等畜禽的促生长剂。Sal促生长作用与克伦特罗(Clenbuterol,Clb)类似,而且体内代谢时间又较Clb短暂、毒副作用也相对较弱,因此,目前Sal已成为继Clb之后营养重分配剂的首选药物。但Sal在食品动物中的残留会导致严重的食品安全性问题,我国农业部明文规定禁止将Sal在动物食品中使用,然而受经济利益的驱使,Sal非法使用事件时有发生。因此,建立一种灵敏度高、特异性强、操作简便、适用于大批量样品筛选的Sal检测方法是一项非常紧迫的任务。本研究对Sal人工抗原的合成、动物免疫、Sal兔单抗制备及ELISA检测方法建立等进行了研究,主要结果如下:1、本试验首先将Sal小分子改造成琥珀酸衍生物(Sal-HS),然后采用混合酸酐法成功合成了两种人工抗原:免疫抗原Sal-BSA和包被抗原Sal-OVA。通过SDS-PAGE电泳证实Sal与BSA、OVA成功偶联,经考马斯亮蓝法测得Sal-BSA的蛋白质浓度为0.7mg/ml。2、将合成成功的Sal-BSA人工抗原免疫4只健康的NZW兔子,2个半月后获得相应的高效价多抗血清。根据ELISA试验结果,最后筛选出A1091编号的兔子血清作为后续试验备用。3、取得兔子脾脏后,采用台盼蓝染色计数法测得脾细胞存活率为96.3%,将脾细胞与处于对数生长期的兔骨髓瘤细胞240E进行细胞融合,其融合率为60%～65%。细胞融合后叁周,用间接ELISA法检测40块96孔细胞培养板中的上清,共获得56个阳性克隆孔,将克隆转移至24孔细胞培养板中进行培养。4、一周后,用间接ELISA测56个克隆的细胞培养上清,共获得阳性孔43个,其中双阳性孔31个。综合比较间接ELISA、IgG定量的结果及细胞生长状态,选择Huam-003-6、Huam-003-11、Huam-003-16、Huam-003-22、Huam-003-29五个多克隆进入亚克隆,同时选择Huam-003-18、Huam-003-23、Huam-003-24、Huam-003-35、Huam-003-42多克隆进行冻存处理。5、将亚克隆的阳性孔转移至24孔板培养,共获得经过克隆化的细胞株8株,采用间接ELISA、间接竞争ELISA法筛选,最终筛选出Huam-6-1、Huam-6-4、Huam-6-8、Huam-11.3、Huam-11-8、Huam-16-3、Huam-16-8共7株高特异性的杂交瘤细胞进行冻存,并选取Huam-11-8进行生产。6、从Huam-11-8杂交瘤细胞分离mRNA,分别克隆其重链和轻链基因,基因经酶切后与质粒连接,涂板挑取克隆,大肠杆菌过夜培养提取质粒,重链轻链质粒配对转染至293T细胞进行表达,无菌收集细胞,离心后取培养上清。本试验分两次转染,第一次小量转染后获得了6株Sal单抗质粒。通过间接ELISA试验和间接竞争ELISA试验确定进入第二次大规模转染的Sal单抗质粒为Huam003-11-8-H2/L2。7、通过重组抗体技术生产Sal单抗,采用ProteinA纯化方法纯化并收集Sal单抗,共得到9mlSal单抗。8、对重组兔Sal单抗ELISA检测条件进行了优化,确定以下条件为ELISA最佳条件:Sal-OVA经500倍稀释,37℃包被2h;选择0.5%明胶作为封闭液,37℃封闭2.5h;一抗的工作效价为20000倍,最佳反应条件为37℃,60min;二抗经5000倍稀释后的最佳反应条件为37℃,80min;对底物配方进行优化,得到TMB和H_2O_2的最佳组合为0.275mg/ml的TMB+0.015%的H_2O_2,显色条件为37℃,10min。9、采用间接竞争ELISA法测定Sal单抗的亲和性,结果显示Sal单抗的IC50浓度为9.01ng/ml,IC10浓度为0.81ng/ml,说明本试验制备得到的Sal单抗具有良好的亲和性。10、采用间接竞争ELISA法测定Sal单抗的特异性。从β-兴奋剂、抗生素、喹诺酮类药物、磺胺类药物、激素、农药等不同种类药物中选取了15种小分子进行交叉反应性测定。结果显示,本试验制得的Sal单抗除了与Clb具有22.47%的交叉反应性以外,与其余物质均没有交叉反应性,说明本试验制备的Sal单抗特异性较理想。11、对ELISA法测定样品的准确度进行试验,结果表明不同浓度的尿样及猪肉样品检测的回收率总体在75%～120%之间;本实验中不同添加浓度的样品变异系数大都在10%以下,说明采用本ELISA检测试剂盒测定尿样和猪肉样品具有较好的准确性。12、本试验采用间接竞争ELISA法分别在PBS缓冲液背景、5倍稀释尿样背景及5倍稀释猪肉样品背景中测得3条标准曲线,分别为:y=38.249x+13.484(R~2=0.990,IC10=0.81 ng/mL,IC50=9.01ng/ml,线性区间为0.5～100ng/ml);y=36.599x+3.970(R~2=0.982,IC10=1.46ng/mL,IC50=18.10ng/ml,线性区间为1～100ng/ml);y=45.371x+2.127(R~2=0.992,IC10=1.49ng/mL,IC50=11.35ng/ml,线性区间为1～50ng/ml);其中x为Sal浓度(ng/ml)对数,y为抑制率。
参考文献：
[1]. β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成及筛选[D]. 赵海燕. 沈阳药科大学. 2004
[2]. β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成及筛选[D]. 张莉. 沈阳药科大学. 2002
[3]. β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成及活性研究[D]. 陈建芳. 沈阳药科大学. 2005
[4]. β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的合成[C]. 潘莉, 赵海燕, 冀蕾, 张莉, 沈建民. 第叁届全国有机化学学术会议论文集（上册）. 2004
[5]. 新型苯乙醇胺类化合物的设计、合成及活性研究[D]. 葛丹丹. 沈阳药科大学. 2009
[6]. β_2-肾上腺素受体激动剂苯乙醇胺类化合物的研究[D]. 冀蕾. 沈阳药科大学. 2003
[7]. 苯乙醇胺类化合物的合成及其抗哮喘活性研究[J]. 邢瑞娟, 潘莉, 温西, 葛丹丹, 张予阳. 中国药物化学杂志. 2009
[8]. 中枢丁酰胆碱酯酶抑制剂—班布特罗类似物的制备及生物活性评价[D]. 武杰. 华南理工大学. 2017
[9]. 新型β_2-肾上腺素受体激动剂的设计、合成及活性研究[D]. 陈旭曜. 沈阳药科大学. 2008
[10]. 沙丁胺醇兔单克隆抗体的制备及ELISA快速检测试剂盒的研制[D]. 王艺熹. 浙江大学. 2008