不同浓度普鲁卡因对大脑皮层锥体神经元延迟整流型K~+通道的影响

不同浓度普鲁卡因对大脑皮层锥体神经元延迟整流型K~+通道的影响

李长科, 徐世元, 周健, 陈立学[1]2002年在《普鲁卡因对鼠大脑皮层锥体神经元延迟整流型钾离子通道电流的影响》文中研究表明目的 观察不同浓度普鲁卡因对新生鼠大脑皮层锥体神经元延迟整流型K+ 通道电流的影响 ,以探讨其中枢作用机理。方法 采取神经元急性分离法分离SD大鼠皮层锥体细胞 ,运用膜片钳内面向外式记录技术 ,记录不同浓度普鲁卡因对延迟整流型K+ 通道电流参数。根据普鲁卡因浓度不同分为 8个组 ,其浓度分别为 0、0 2、0 4、0 8、1 6、2 4、3 2和 4 0mmol/L ,每组以 7个不同钳制电压观测 1 1个样本。结果 当普鲁卡因浓度增至 0 4mmol/L时 ,其Ⅰ Ⅴ关系线斜率最小 ,通道的电导减至最低 [(36± 1 4) pS] ;此后随药物浓度的增加 ,Ⅰ Ⅴ关系线斜率增大 ,电导增加 ,并在2 4mmol/L增至最高 [(60± 2 0 )pS]。结论 普鲁卡因对鼠大脑皮层锥体神经元延迟整流型K+ 离子通道电流、电导的影响随其浓度不同表现为抑制与兴奋双相作用

李长科[2]2000年在《不同浓度普鲁卡因对大脑皮层锥体神经元延迟整流型K~+通道的影响》文中研究指明目的 本文运用膜片钳技术,采用内面向外式记录方法,研究不同普鲁卡因浓度对皮层锥体神经元胞体上延迟整流型K~+通道的影响,进而探讨普鲁卡因对中枢作用的分子机理。 方法 1神经元的急性分离2~5天龄的SD大鼠,雌雄不限,断头、取脑,掀取项叶皮层并切成薄的脑片,置入去钙、镁人工脑脊液(ACSF)中吹打后,放入含2.5%胰蛋白酶的人工脑脊液中消化。吸取消化后的细胞悬液3~5滴,涂于经多聚赖氨酸处理的盖玻片上,细胞贴壁后入高钾浴槽液中。 2实验分组 普鲁卡因经微量加样器加入,按其浓度分为8个组:0(对照组)、0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0 mmol/L。每组以7个不同的钳制电压,观察11个样本。 3单通道记录 采用膜片钳技术的内面向外式单通道电流,用电极拉制器两步拉制电阻为10~12MΩ的电极,加热水平分别为65、57,尖断直径约0.5~1μm,充灌高钾电极液。电流经膜片钳放大器放大,探头反馈电阻10GΩ,低频滤波频率为1kHz(3dB,4-bessel),用PCM录像机记录。 4资料分析 信号经Digidata 1200接口的数据采集系统和6.04版Pclamp采集程序,采样频率5kHz,开关时间的忽略水平为200μs。将原始资料输入pⅢ-300计算机,用FETCHAN分析程序自动测量通道的电流幅度、通道开放和关闭时间,再进入pSTAT作初步统计处理。用SPSS8.0统计软件对各浓度组做线性 中日人民解放军第一军医大学硕士学位论文回归分析得出电导,分别以不同细胞、钳制电压或l和药物浓度为分组变量,分析定量变量,包括电流幅度、电导以及通道开关动力学的变化;各普鲁卡因浓度组间的电流幅度、电导以及通道开关动力学参数的差异行方差分析。 结果 1延迟鳖流型义沤沮的确认与特性 在一定的范围内,通道的电流幅度随去极化程度增加而增大,即随着钳制电压的变化而变化,所得的电流幅度-膜电位关系曲线O-V曲线)呈直线。各钳制电压与平均电流幅度的关系,反映电流幅度对电压的依赖关系。在某一钳制电压下,电流幅度.开放时间的散点图显示开放事件,均集中在一定的电流幅度水平,通过计算可以得出其优势电导为52土2.4ps,也表现出明显的电压依赖性。 采用内面向外式时,在本组实验液体下,通道的翻转电位(Rerersa Potential,EJ接近于 omV;以 140mmol的 cscl代替浴槽液中的KCI,通道电流基本消失;但用20 mm。l的个氨基毗唆(-AP)替代原浴液,通道电流活动则无变化。此外,TTX以及低钙整液中的 EGTA乙二醇双氨基乙基四乙酸)阻滞了钠、钙通t,氯离子通道难以记录到,因而确认其为延迟流型K+1道。 二普鲁卡因对延追羹流型K31jt的影响 zl对迟邀电流幅匣与电导的影响 对照组与7个普鲁卡因浓度组各自的I-V曲线基本呈直线,此即为本实验记录单迟道;0.4mml组卜V关系线斜串最小,通道的电导达最低o6士1.4ps卜此后随浓度的增加电导逐渐增加, ~4~ 中国人民解放军第一军医大学硕土学位论文 并在Z4mmol时,电导值达最高O0士2刀昨入 2.ZRtrjljN开放动力学的彤响 对照组开放概率为引.6%士 3.9%,当浓度增加至 0.4mmol时, 开放概率骤降至26.2%士2.0%;尔后,随药物浓度的增加开放概 率逐渐提高,最高达78%土5.9%。在电压与开放概率的关系方面, 钳制电压O巾增加,开放概率逐渐减小,此时电极下的膜片跨膜 电位 vin=-Vp,既当 Vp愈接近 VRE,vin就愈接近静息膜电位, 因而其开放概率就逐渐接近于零。 2.3对开放时间常数的彤响 对照组通道的短时程开放时间常数一。;)为75土6.329ms,当 浴槽液中加入 0.Zmmol的普鲁卡因,甚至更低浓度,\;立即降 至 5土2.402ms,且此后\;随药物浓度无明显的变化 长时程开放时间常数h。。)在加入药物后略有降低,当药物浓 度增至 0.4mmol时,。*降至 24土 3.202ms,降幅约 15 土 1.4325, 药物浓度达 0.smmol时,\。又达未加药时水平;继而在 1.6 nunol 时 T。达最高点,即 73士5.307ths;以后随药物浓度的增加\2又 程下降态势;对开放时间的影响基本与长时程开放时间常数 T。。 相对应。 又4对关闭时间与关闭时间常数的影响 通道的关闭时间常数h。)对照组为78.566土16.9761:ifS,加入 药物后关闭时间延长,普鲁卡因浓度为0.4mmol时,关闭时间达 303.727 土78.3465,以后随浓度增加关闭时间逐渐变短,浓度 为 1.6

李长科, 徐世元, 周健, 陈立学[3]2002年在《普鲁卡因对鼠大脑皮层锥体神经元延迟整流型钾离子通道开关动力学的影响》文中研究表明Na+通道是局麻药、全麻药作用的靶通道,但并非唯一通道[1]。本文运用膜片钳技术,采用内面向外式记录方法,观察了普鲁卡因对大鼠大脑皮层锥体神经元胞体上延迟整流型K+通道开/关动力学的影响。 材料与方法 一、实验方法 (一)神经元的急性分离2~5d龄的SD大鼠,雌雄不

佚名[4]2002年在《中华麻醉学杂志2002年第22卷主题词索引》文中研究表明说叫:(1)本索引按汉语拼音字母顺序排列。(2)在汉字相同的情况下,按数字、英文字母、希文字母顺序先后排列。(3)缩略词及未译出的原文按英文字母顺序排在各(字母)部之首。(4)文题、作者后括号内数字为期号,最后为起页。 A 白细胞介素l() 食管癌手术患

参考文献:

[1]. 普鲁卡因对鼠大脑皮层锥体神经元延迟整流型钾离子通道电流的影响[J]. 李长科, 徐世元, 周健, 陈立学. 临床麻醉学杂志. 2002

[2]. 不同浓度普鲁卡因对大脑皮层锥体神经元延迟整流型K~+通道的影响[D]. 李长科. 第一军医大学. 2000

[3]. 普鲁卡因对鼠大脑皮层锥体神经元延迟整流型钾离子通道开关动力学的影响[J]. 李长科, 徐世元, 周健, 陈立学. 中华麻醉学杂志. 2002

[4]. 中华麻醉学杂志2002年第22卷主题词索引[J]. 佚名. 中华麻醉学杂志. 2002

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