桑白皮对实验性糖尿病小鼠的药效学研究论文_张自亮,周雅瑜,戴浩东,龚学学,赵烁然,彭熙柳,

湖南省长沙市望城区长沙医学院 湖南长沙 410219

【摘 要】目的:观察桑白皮水—醇提取液对糖尿病小鼠血糖的影响。方法:采用四氧嘧啶建立大鼠糖尿病模型,测定各组给药前后的血糖水平。结果:实验性糖尿病小鼠血糖由16.0±11.4mmol/ L下降至8.3±2.2mmol/ L(P<0 .05)。结论:桑白皮水—醇提取液对实验性糖尿病小鼠具有降血糖作用。

【关键词】桑白皮血糖糖尿病模型小鼠降血糖

1 对象与方法

研究对象:小老鼠

1.1采用随机抽样法,分为实验组(90只)和对照组(30只)。

1.2材料制作

①桑白皮水提物:桑白皮500g加水4000 ml(8倍量),浸泡l小时,水浴加热回流提取2小时,过滤。残渣加8倍量的水(4000 m1)水浴加热回流提取2小时,过滤,合并滤液。回收提取液,加热蒸干至干膏,膏重62.65 g。提取率为12.350%。

②桑白皮醇提物:桑白皮1575g加95%乙醇9400ml(6倍量),浸泡1小时,水浴加热回流提取2小时,过滤。残渣加乙醇9400m1(6倍量)水浴加热回流提取2小时,过滤,合并滤液。回收提取液,加热蒸干至干膏,膏重101.65g。提取率为6.454%。

1.3糖尿病小鼠模型制作方法

用生理盐水配制浓度10 mg/mL的四氧嘧啶溶液,按200 mg/kg剂量对小鼠腹腔注射。注射前测得健康小鼠的平均血糖浓度为5.0 mmol/L:注射后48,72 h分别测定血糖浓度,血糖变化呈现先降低后升高再稳定的过程,为预防低血糖时小鼠出现痉挛并致死,提前静脉注射或灌胃高渗葡萄糖溶液,72 h后小鼠呈现长期稳定的高血糖,即得到本实验使用的四氧嘧啶性糖尿病动物模型,实验期间所有小鼠均出现多饮、多食、多尿、体重减少等明显糖尿病症状。

1.4实验步骤

空白对照组:灌胃给药,2ml/次,2次/天

桑白皮水提物组:灌胃给药300mg/kg,2次/天

桑白皮醇提物:灌胃给药500mg /kg,2次/天

盐酸二甲双胍组:灌胃给药0.25g,2次/天

1.5数据结果

桑白皮水提取物组、桑白皮醇提取物组、对照组、盐酸二甲双胍组对糖尿病模型小鼠血糖的影响结果见附表。

2讨论:

2.1近年来,国内外学者重点研究了桑类药材的降糖成分和作用机制,同时加强了对其有效单体的分离和筛选,对于降糖天然药物的研发及桑树药用资源的利用都具有十分重要的意义。日本科研纷纷开展了关于桑叶的系列药理实验,发现桑叶能预防和缓解糖尿病,特别适用于糖尿病的预防。[1]Yoshiake Yoshikun等对桑叶提取物的研究发现,DNJ能抑制多种动物肠道内Ot一糖苷酶的活性,从而抑制血糖值升高。[2] 此外,Budhan S.Pukazhenthi等也开展利用自然发病且症状类似成人型糖尿病及合并症的大白鼠进行桑叶对x血糖抑制功能的研究,葡萄糖耐量试验显示:添加桑叶喂养的大白鼠组比对照大白鼠组抑制葡萄糖耐量后的血糖值上升差异明显。[3]

2.2李时珍著《本草纲目》示:桑白皮主治消渴尿多,具有降血压、降血糖、利尿利泻等作用。[4]桑白皮和桑枝提取物能显著降低灌流液中葡萄糖浓度,在胰岛素存在时能增加离体肝脏葡萄糖的消耗。[5]南北朝刘宋《雷公炮炙论》认为桑白皮在中药中有独特效用,“是它药不可替也”。[6]本实验从桑白皮对小鼠血糖的药效学方面,进行同二甲双胍类药物等一般糖尿病常用药的对比研究,拟进一步推广,引起人们(特别是中老年人)对糖尿病等方面的关注及重视,为中医药在临床上治疗糖尿病提供客观可靠的依据,旨在为糖尿病治疗困难的现状开辟新途径,推进糖尿病治疗研究的进展。

3结论:

糖尿病是一种由多种因素引起的慢性非传染性代谢性疾病[7]我国糖尿病患者人数众多且逐年增多,糖尿病及其各种并发症已成为威胁人类健康的第三大杀手。因此,加大降血糖天然药物的研发具有重大意义。桑叶、桑椹、桑枝和桑白皮等药用资源均有降血糖作用,至今已发现其降血糖机制包括抑制a一葡萄糖苷酶活性、促进胰岛素释放、增加外周组织对糖的利用、增加肝脏对葡萄糖的摄取和抑制蛋白糖基化等方面。传统中药中常将桑药用资源用于治疗糖尿病,在天然降糖药物的开发利用中具有极其广阔的开发应用前景。本实验对小鼠实验性糖尿病模型用桑白皮醇提取液给予灌胃,结果糖尿病小鼠的血糖从16.0±11.4mmol/ L下降至8.3±2.2mmol/ L,具有显著的降血糖作用。提示桑白皮可作为糖尿病的治疗药或辅助药而长期应用。但目前国内外有关桑药用资源降血糖作用的大部分文献多局限于描述其降糖现象,对其确切的降血糖作用机制研究尚不够深入,且多以动物和细胞试验为主,有待从分子和基因层面阐明其降血糖作用机制;此外还需进行安全性和临床研究,为将其开发利用提供科学依据。

参考文献:

[1]贺玉琢. 桑叶提取物对肥胖小鼠的降血糖作用. 国外医学·中医中药分册,1999,21(4):53

[2]Yoshikuni Y.Inhibition of intestinal a—gheosi—dase activityand postprandial hyperglycemia by moranoline and its N—alkylderivatives.Agric Biol Chem.1988,52(1):121—128.

[3]Pukazhenthi BS;Muniappa N;Kvijay I Role of sulfhydryl groups in the function of glu-copyrano frommulberry gland 1993(09)

[4]周银芝,刘丽丽,刘艳红,等.桑蚕降血糖作用研究进展[A].医学导报,2011年8月第30卷增刊

[5] Wang N,Zhu Q,Zhou Y W,et a1.The effects ofextracts of several Chinese medicines on glucoseconsumption stimulated by insu.1in of rat isolated liver[J].Lishizhen Medicine and Materia Medica Research,

2006。17(4):513.

[6]吴志平,谭建中,顾振纶.中药桑白皮化学成分及药理活性研究进展.中国野生植物资源,2004.23(5),10-12

[7]Amitani H,Asakawa A,Cheng K,et a1.Hydrogen improveglycemic control in type 1 diabetic animal model by promoting glucose uptake into skeletal muscle[J].Plos One,2013,8(1):e53913.

论文作者:张自亮,周雅瑜,戴浩东,龚学学,赵烁然,彭熙柳,

论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2016年6月第11期

论文发表时间:2016/9/27

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