房县人民医院检验科 湖北房县 442100
[摘要] 目的 探讨过氧化氢浓度、唾液酸酶、白细胞酯酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶检测对阴道微生态的改变所致妇科疾病的诊断意义。方法 对妇科门诊3988例阴道分泌物进行了五联检检测及Amsel法的检测。结果 五联检法检测3988例阴道分泌物的结果阳性率为：细菌性阴道病（BV）为30.1%、念珠菌为40.1%、滴虫为21.7%，Amsel法检测BV阳性率为28.8%。清洁度（Ⅰ～Ⅱ）组与清洁度（Ⅲ ～Ⅳ）组比较H2O2、PH、唾液酸酶、脯氨酸氨基肽酶等检测结果均有显著性差异（P<0.01）。结论 五联检结合清洁度等项目检测可以互补或取代旧指标，应用于临床。
[关键词] 阴道分泌物；过氧化氢浓度；唾液酸酶；白细胞酯酶；脯氨酸氨基肽酶；乙酰氨基葡萄糖苷酶
阴道分泌物检查（俗称白带检查）是妇科病人的必检项目，以前检查内容通常是：清洁度、滴虫、霉菌或加测PH、胺试验、找线索细胞等。随着妇科检验医学发展，检测阴道分泌物新指标（过氧化氢浓度、唾液酸酶、白细胞酯酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶等）已开始互补或取代旧指标应用于临床。我院妇科门诊采用新指标组合对门诊3988例阴道分泌物进行检查，并与Amsel金标准法进行比较，现将结果分析如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 我院妇科门诊2009年1月-2010年4月进行阴道分泌物检测标本共计3988例，年龄18--65岁。用无菌女性拭子收集患者阴道后穹隆分泌物，立即送检。
1.2 试剂与仪器 检测所用五联检试剂盒(郑州安图)，光学显微镜（日本OLYMPUS），0.9%氯化钠溶液和10%氢氧化钾溶液(自配)。
1.3 方法 妇科医师取患者阴道后穹隆分泌物于一次性塑料管中送检，标本均用0.9%氯化钠涂片直接镜检观察清洁度，严格按照《全国临床检验操作规程》[1]进行划分，另取1-2滴进行PH值、胺试验（测PH值后的分泌物滴加10%氢氧化钾溶液，立即可嗅到恶臭味或鱼腥味为胺试验阳性）。五联检测操作严格按试剂说明书进行。以上试验均由实验室固定专业人员进行。
1.4 Amsel法诊断标准
（1）阴道分泌物PH>4.5；（2）白带增多、稀薄或均质如面糊样粘稠；（3）白带腥臭；（4）线索细胞检出[2].其中3项阳性即可诊断为BV。
1.5统计方法 阳性率比较用x2检验。
2结果
2.1 Amsel法检出BV1148例，阳性率为28.8%，五联检检测BV1200例，阳性率为30.1%，其中BV合并念珠菌、滴虫感染分别为303例（25.3%）、124例（10.3%）。
2.2 3988例阴道分泌物清洁度与H2O2、、PH、白细胞酯酶等检测结果比较。
2.3 3988例阴道分泌物检出念珠菌感染率为40.1%，滴虫感染率为21.7%，
乳酸杆菌为女性阴道的优势菌群，它能产生自洁物质H2O2，对有害菌如阴道加德纳菌、动弯杆菌等致病菌有抑制杀灭作用。正常情况下，正常菌群与其它微生物处于一个平衡状态。当各种因素使阴道内的微生态遭破坏，如抗生素的广泛使用、阴道灌洗不当、全身性疾病、性混乱、性生活过渡、性激素变化、接触不洁物质、不注意经期卫生、避孕药具等，引起阴道内菌群失调，从而导致各种阴道感染性疾病的发生。
本研究表明，外阴阴道念珠菌病、BV、滴虫性阴道炎在本地区有较高的感染率，在检测的3988例门诊患者中，滴虫感染者占21.7%，念珠菌感染者占40.1%，BV阳性者占30.1%，可能与山区妇科病人卫生意识差，症状相当明显才来医院就诊导致阳性率高也有一定的关系。从表1可见，清洁度（Ⅰ～Ⅱ）组与清洁度（Ⅲ ～Ⅳ）组比较PH、H2O2 、白细胞酯酶、唾液酸酶等检测结果均有显著性差异，表明这些指标在反映阴道内环境微生态、炎性反映方面很有意义。H2O2直接由乳酸杆菌分泌，其浓度与乳酸杆菌数量成正比，能够直接反映阴道内环境微生态，且干扰因素少。唾液酸酶（主要由普雷沃菌、拟杆菌、加德纳菌分泌）、脯氨酸氨基肽酶（由动弯杆菌、厌氧菌、白色念珠菌分泌）直接由病原体分泌，其活性与病原体数量成正比，直接反映阴道内病原体的数量，特异性好，高效价的阳性可直接诊断为BV。白细胞酯酶阳性，提示阴道分泌物内有大量白细胞，阴道壁粘膜受损，存在较严重炎性反应。乙酰氨基肽酶和脯氨酸氨基肽酶阳性，提示阴道前中段有念珠菌感染，乙酰氨基葡萄糖苷酶为白色念珠菌、热带念珠菌特异性酶，同时也是滴虫特异性酶。两者区分在于首先观察分泌物的外观，念珠菌性阴道病分泌物外观呈白色或豆腐渣样，而滴虫分泌物外观为黄色或黄绿色稀薄脓液，常有小泡沫状，量多。其次是用精密PH试纸加以区分，滴虫分泌物PH大于5～6，而念珠菌分泌物PH小于4.5.，酶法检测念珠菌及滴虫特异性好，而传统显微镜检查，因人为因素影响，易出现假阳性及假阴性[3]。
BV是妇女常见的一种临床症状群，表现为占绝对优势的乳酸杆菌被高浓度的阴道加德纳菌、普雷沃菌、拟杆菌、、动弯杆菌等与BV相关的一系列具有潜在致病作用的微生物所替代。文献资料表明BV是造成输卵管炎、盆腔炎、泌尿系统感染、术后感染的危险因素，与早产、流产、不孕症、宫外孕有关[4]。Amsel法至今仍是BV诊断的金标准，但在实际工作中因多种因素干扰而影响其准确性，首先是阴道分泌物PH值的检测影响因素较多（宫颈粘液干扰，性交、胎膜早破、治疗中不同药物的影响）。其次在胺试验中，气味鉴别主观性强，特异性差（滴虫性阴道炎、宫颈糜烂、精液等都会引起胺试验阳性）其阳性不能单独诊断BV。线索细胞受显微镜质量、操作者的经验等诸多因素影响，主观性强。本文以唾液酸酶、脯氨酸氨基肽酶联合检测BV的阳性率为30.1%，与刘继萍[5]报道的BV为32.17%相近，而以Amsel法检测阳性率为28.8%，两组比较，检测结果差异无显著性意义。
阴道微生态异常会进一步诱发其它致病微生物或条件致病菌成为事实病原体，是其它病原体（如滴虫、念珠菌）易复发、难以治愈的重要原因。BV往往与其它病原体合并感染，也是其它疾病经久不愈，反复发作的基础原因。本文中BV合并滴虫感染124例（10.3%），念珠菌感染303例（25.3%）、原因为滴虫上有氢生成体，会消耗阴道内的氧，从而刺激厌氧菌的繁殖[6]。阴道内环境的改变，引起感染的细菌所分泌的酶会侵蚀上皮，使阴道上皮失去防御功能，抵抗力降低，从而使念珠菌乘虚而入。另外，白色念珠菌降解细胞外基质中的蛋白质和产生H2O2酶抵抗产生H2O2的乳酸杆菌。
综上所述，阴道分泌物Amsel法检测BV，影响因素多，主观因素强，特异性较差，而显微镜检测念珠菌、滴虫影响因素多，而阴道分泌物检查采用五联检新指标，因其特异性好，影响因素少，已开始互补或取代旧指标应用于临床，结合分泌物外观、清洁度，更直接反映阴道内环境微生态状况，辅助妇科疾病的诊断。
参考文献
1.叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006：324.
2.李连青，朱庆义.阴道加德纳菌对细菌性阴道病的病原学评价[J].中华医院感染学杂志，2005，15（2）：226-230
3.罗俐莺.白带常规镜检漏诊原因分析[J]。中华中西医学杂志，2008，6（10）：48
4.Nelson DB,Macones G. Bacterial vaginosis in pregnancy:current findings and future directions[J].Epidemiol Rew,2002,24(2):102-108.
5.刘继萍.细菌性阴道病快速检测与阴道分泌物常规3681例结果分析[J].临床误诊误治，2009，22（2）：55-57.
6. 马玉楠.细菌性阴道病及其诊断[J].中华检验医学杂志，2000，23（5）：303-304.
论文作者:饶荣 冯申亮
论文发表刊物:《临床医学教育》2017年11月
论文发表时间:2017/12/15
标签：阴道论文; 滴虫论文; 阳性论文; 氨基论文; 肽酶论文; 唾液酸论文; 脯氨酸论文; 《临床医学教育》2017年11月论文;