微生物快速检验技术的应用与研究进展论文_廖龙波1,黄林2(通讯作者)

微生物快速检验技术的应用与研究进展论文_廖龙波1,黄林2(通讯作者)

(1广西荔浦县人民医院检验科 广西 荔浦 546600)

(2广西都安县人民医院检验科 广西 都安 530700)

【摘要】微生物检验技术在医疗服务机构以及食品安全控制中都有着重要的应用,现阶段,我国微生物检验技术取得了重大突破,通过微生物快速检验技术,能够在最短时间内实现对不同患者病原菌的检测、易感人群监测、食品卫生控制等,从而降低各类感染性疾病的发生,此外,还能够根据检测结果为临床疾病治疗提供参考,本文分析的是微生物快速检验技术的应用与研究进展。

【关键词】微生物快速检验技术;应用分析;研究进展

【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2017)33-0009-02

现代科学技术的发展以及人们对微生物的研究,以及人们深入了解微生物[1-2],使得微生物检验技术取得了快速发展,并在多个领域中得到了重要应用,比如:饮用水检测、食品检测、医疗、环境评价等方面,得到快速诊断应用[3]。尽管传统微生物检验可取的较好的检验效果,不过在检验过程中耗费时间较长,在检验过程中需要投入的人力物力较大。针对这一不足,现阶段微生物快速检验技术的发展能够弥补这一不足,本文结合相关文献报道,就微生物快速检验技术的应用与研究进展分析如下。

1.细菌毒素技术及其应用

细菌致病性的强弱会受到细菌毒力的影响,细菌毒力中毒素属于基础性的物质,有外毒素和内毒素两类,内毒素指的是细菌细胞壁形成的毒素,当细菌死亡、破裂或者是出现菌体自溶后可将毒素释放出来,在细菌生产过程中形成的各类毒素则外外毒素,通过对细菌毒素的提取能够快速的对细菌进行检验,这种方法相对于细菌培养,所需时间短,而且检验结果准确性较高。

在细菌毒素技术方面,国外有学者进行了研究,并且研制成功了VT-1毒素以及VT-2毒素毒素大肠艾希氏菌(VTEC)PRLA乳胶凝集试剂。当需要进行微生物快速检验时,在多黏菌素作用下科室的细菌菌体发生裂解,从而释放细菌毒素。对于释放的毒素,将其与乳胶试剂在U形板中进行孵育,时间为24h,此后检验人员可通过肉眼对菌体的凝集反应进行判断。

有学者研究后发现,金黄色葡萄球菌可产生较多的肠道内毒素,通过单抗协同凝集技术能够完成快速检验[4],有助于对金黄色葡萄球菌的诊断。

2.显色培养基技术及其应用

显色培养基主要是通过微生物在自身新陈代谢过程中产生的酶以及相应的的显色底物发生反应后显示颜色的原理实现对微生物的快速检验[5-7],显色培养基能够对通过培养基显示的颜色完成微生物的筛选分离等。

最早的显色培养基是法国人研究并使用的,早期主要用于大肠杆菌的临床检验,不过随着应用范围的延伸,应用价值逐渐扩大。有学者研究后,通过显色培养基实施微生物快速检验,可使得目标微生物显色明显,有助于检测人员根据显色结果进行快速的分析和判断,在实际的水体微生物、临床微生物以及食品微生物中,显色培养基技术均有重要应用[8]。有学者对显色培养基进行了改进,并最终使其成为快速检测纸片法,通过大量的临床研究表明,显色培养基方法在金黄色葡萄球菌、霉菌、酵母菌、微生物菌落总数、大肠菌群等微生物检验中均有重要的应用价值,尤其是在生活用水以及食品中大肠菌群以及菌落总数检验中应用价值较高。大肠菌群是一类与肠道疾病相关的细菌,根据国家饮用水方面的规范[9],饮用水中要求大肠菌群<3个/L,而饮用水水源<1000个/L,如果食品或者是饮水中的菌落总数超过了规范要求,则食品的营养成分会被破坏,食用大肠菌超标的食物或者饮用水,可引起使用者出现痢疾等肠道疾病,此外,还会有呕吐、腹泻等相关症状,严重的可直接危及到食用者的健康安全,通过微生物快速检测技术可获得饮水或者是食品中大肠菌的相关信息,对于保证食品安全具有重要意义[10]。

3.基因探针技术及其应用

基因探针技术又称为分子杂交技术,通过对DNA分子的变性、复性、碱基互补配对等相关操作,通过同位素、生物素等对特定的DNA片断进行标记,通过DNA杂交,使得DNA分子在特定条件下和待测单链核酸分子形成双链核酸分子,通过这种检测方法,能够快速的、准确的对目标微生物进行识别、检验[11-12]。

期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆有学者将基因探针技术应用于微生物检验,结果表明,在检验过程中具有准确性高、方便快捷等优势,具有微生物快速检测的方法。在基因探针基础上,有学者在研究后形成了基因芯片技术,通过微量点样手段预设DNA排列方式,在样本分析以及基因探针杂交方式,可获得微生物检验中的靶基因、含量等相关信息,最终得到微生物检验快速、准确的目的[13]。

4.PCR技术及其应用

聚合酶链式(PCR)是在特定的条件下,对于特定的DNA片段通过体外酶促反应实现对该片段的快速扩增处理。在DNA特定片段扩增过程中,通过对特异性扩增产物的监测,实现对微生物的快速检验。根据现有报道,在微生物检验过程中应用PCR技术,在检测过程中的时间较短、检测灵敏度较高、检测结果准确、特异性高。在已有的突发性公共卫生事件微生物检验中PCR技术能够发挥较好的作用。

在PCR技术的基础上,产生了较多的改良技术,比如:定时定量PCR技术、多重PCR技术、PCR变形梯度凝胶电泳技术、PCR高分辨溶解曲线分析技术等。这些检测技术在微生物快速检测中均有重要的应用。

在实际的食品微生物检验中,可采用常规的PCR检测、多重PCR、巢式PCR、RT-PCR、免疫-PCR、荧光定量PCR等。这些都是在PCR技术基础上发展起来的。有学者对肉制品中的沙门氏菌、大肠杆菌、单核增生李斯特菌使用多重PCR进行检测,取得了较好的应用效果[14]。特别是生长缓慢或难于培养的微生物,如分枝杆菌、支原体、衣原体、幽门螺杆菌等,PCR技术快速鉴定这类微生物,是其他方法很难做到的[15]。

5.结语

人体内存在着一定量的细菌,这些细菌能够对人体进行调节,一旦人体免疫力下降,细菌菌群的生活环境将会受到影响。在细菌菌群失调的情况下,可引起患者产生各类疾病,除此之外,在食品、饮用水中也会含有一定的细菌,这些都需要进行检测,通过检测便于做好食品安全卫生,控制各类感染性疾病的发生。早期在各类微生物检验过程中采用的检验方法能够保证对各类微生物检验的需求,不过在具体检验中所需时间较长,一定程度上影响到了检测工作的顺利进行。本文中根据国内相关文献,对微生物检验过程中常用的微生物快速检验技术进行总结,便于后期在微生物检验中灵活使用。随着技术发展,微生物检测现状将彻底改变,新方法新技术新设备涌现,微生物快速检验技术也不断发展,真正做到快速检测新时代。

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论文作者:廖龙波1,黄林2(通讯作者)

论文发表刊物:《医药前沿》2017年11月第33期

论文发表时间:2017/12/21

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