李晓华（内蒙古鄂尔多斯市中心医院康巴什部０１７０１０）
【摘要】目的：对妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血淋巴细胞凋亡情况进行比较。方法：选择我院２０１２年９月－２０１４年９月间２５例肝内胆汁淤积症孕妇和２５例正常孕妇，采用免疫细胞化学染色技术对两组孕妇的外周血以及脐血间淋巴细胞进行检测。结果：正常组新鲜外周血淋巴细胞凋亡率为（１８２±０５２）％，新鲜脐血凋亡率为（１９３±０４７）％，两组比较无明显差异，Ｐ＞００５；培养４８ｈ后外周血淋巴细胞凋亡率为（２７１９±６０３）％，新鲜脐血凋亡率为（３４３６±７９１）％，两组比较则具有显著差异，Ｐ＜００５；肝内胆汁淤积症组新鲜外周血淋巴细胞凋亡率与脐血比较同样无差异，Ｐ＞００５；培养后４８ｈ则具有显著差异，Ｐ＜００５。结论：妊娠晚期母体外周血与脐血间淋巴细胞凋亡情况存在明显差异，且基因表达也存在明显差异。
【关键词】妊娠晚期；淋巴细胞凋亡；胎儿脐血；母体外周血【中图分类号】Ｒ２ 【文献标号】Ａ 【文章编号】２０９５－７１６５（２０１５）０７－０２９９－０２
女性妊娠期间的免疫功能不仅存在于自身，同时还存在与胎儿中。胎儿免疫功能主要从妊娠第三个月末开始逐渐出现，在妊娠第１０－第１４周逐渐成熟。在现阶段临床中，人们对于母体在妊娠晚期时外周血与胎儿脐血的研究非常少。我院在２０１２年９月－２０１４年９月间对妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血淋巴细胞凋亡情况进行比较。
１ 资料与方法１１ 一般资料选择我院２０１２年９月－２０１４年９月间２５例肝内胆汁淤积症孕妇和２５例正常孕妇。正常妊娠组的女性无妊娠合并症、并发症存在，两组孕周平均为（３５±３）周，两组孕妇均为单胎妊娠。两组孕妇均无感染史，无免疫抑制剂使用史。
１２ 一般方法所有操作均在无菌条件下进行。两组孕妇均在剖宫产前抽取外周血６ｍｌ，术中胎盘剥离后抽取脐静脉血６ｍｌ，肝素抗凝［１］。采用淋巴细胞液分离血液中的淋巴细胞，将淋巴细胞全部收集。将细胞浓度调整至１１０６／ｍｌ。采用台盼蓝将细胞染色，测定细胞活力，要求细胞活力均在９５％以上。抽取部分细胞悬浊液制作细胞涂片，干燥后采用聚甲醛固定，时间为３０ｍｉｎ。而后按照ＳＡＢＣ试剂盒说明书进行染色［２］。再次抽取细胞悬浊液，混入１０％小牛血清，将其放在培养基中，将培养基放置在３７摄氏度、二氧化碳浓度为５％的孵箱中进行孵育，时间为４８ｈ。而后将培养的淋巴细胞进行收集，测定细胞凋亡率。
１３ 数据统计文中数据采用ｓｐｓｓ１８０软件进行处理，计数资料采用％表示，资料采用卡方检验；计量资料采用ｘ±Ｓ表示，资料采用ｔ值检验，Ｐ＜００５认为差异具有统计学意义。
２ 结果对两组孕妇外周血、脐血淋巴细胞凋亡情况进行比较：正常组新鲜外周血淋巴细胞凋亡率为（１８２±０５２）％，新鲜脐血凋亡率为（１９３±０４７）％，两组比较无明显差异，Ｐ＞００５；培养４８ｈ后外周血淋巴细胞凋亡率为（２７１９±６０３）％，新鲜脐血凋亡率为（３４３６±７９１）％，两组比较则具有显著差异，Ｐ＜００５；肝内胆汁淤积症组新鲜外周血淋巴细胞凋亡率与脐血比较同样无差异，Ｐ＞００５，培养后４８ｈ则具有显著差异，Ｐ＜００５（详见表１）。
表１ 两组孕妇外周血、脐血淋巴细胞凋亡率
３ 讨论与成人相比较，脐血中的淋巴细胞尚未成熟，多数细胞还处于被抑制状态。脐血中的Ｔ淋巴细胞尚未发育完全，导致Ｔ淋巴细胞水平偏低［３］。若Ｔ淋巴细胞水平降低就会导致Ｔ淋巴细胞群比例失调，同时导致ＣＤ４／ＣＤ８的比值降低。此外，脐血中的单个核细胞发生凋亡的概率要明显高于成人外周血中单核细胞凋亡概率［４］。在研究中发现，脐血中的Ｔ细胞能够对异体抗原产生耐受性，与成人Ｔ细胞比较，脐血中的Ｔ细胞在收到刺激后更容易分泌ＩＬ－１０。
在我院的研究调查中发现，无论是正常组的孕妇还是非正常组的孕妇，其胎儿脐血中的淋巴细胞在经过培养后凋亡率均明显高于母体外周血中的淋巴细胞。而此结果与其他研究报到中的结果基本抑制，进而可以认为脐血中的淋巴细胞并不成熟，更容易出现凋亡现象［５］。
对我院结果进行分析后我们认为，胎儿脐血中的免疫细胞与成人不同。在妊娠晚期，母体外周血中的淋巴细胞与脐血淋巴细胞凋亡调控基因的表达存在明显差异。胎儿作为一个半同体在母体中，脐血与母体外周血凋亡调控基因Ｆａｓ、ＦａｓＬ、Ｂｃｌ－２的表达差异不同，进而造成了淋巴细胞凋亡率不同。我们认为，此种差异是维持母体与胎儿免疫耐受的稳定性与移植物抗宿主排斥反应重要因素，一旦此种差异被破坏则会导致母体、胎儿发病。
总的来说，妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血中的淋巴细胞凋亡情况存在明显差异，对其进行研究能够为临床治疗提供新思路。
参考文献［１］ 马建鸿，张元珍，祝成亮，周春，王燕，陈红，李家福．产妇外周血和胎儿脐血白细胞介素２８启动子甲基化差异研究［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１３，０２：１３２－１３３．［２］ 侯云华，何敏，季宁东，张晓洁，季晓辉．妊娠不同时期胎盘单核－巨噬细胞来源树突样细胞刺激脐血Ｔ淋巴细胞的特性比较［Ｊ］．南京医科大学学报（自然科学版），２０１２，０９：１１９９－１２０６．［３］魏俊妮．胎盘细胞凋亡在ＨＢｓＡｇ阳性孕妇ＰＢＭＣ母—胎转运机制中的作用［Ｄ］．山西医科大学，２０１２．［４］ ＴｓｅＷ，ＬａｕｑｈｌｉｎＭＪ１Ｕｍｂｉｌｉｃａｌｃｏｒｄｂｌｏｏｄｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ａｎｅｗａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｏｐｔｉｏｎ［Ｊ］．１ＨｅｍａｔｏｌｏｇｙＡｍＳｏｃＨｅｍａｔｏｌＥｄｕｃＰｒｏｇｒａｍ，２００５：３７７～３８３．［５］ 余海燕，王晓东，刘淑芸．妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血淋巴细胞凋亡的对比研究［Ｊ］．中国妇幼保健，２００９，２４（７）：９８９－９９０．
论文作者:李晓华
论文发表刊物:《医师在线》2015年4月第7期供稿
论文发表时间:2015-6-25
标签：淋巴细胞论文; 凋亡论文; 母体论文; 胎儿论文; 外周血论文; 细胞论文; 差异论文; 《医师在线》2015年4月第7期供稿论文;