胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用论文_王鸿玲

胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用论文_王鸿玲

王鸿玲 (贵州省黎平县人民医院检验科 557300)

【摘要】目的 评价胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用。方法 使用妊娠中育龄妇女、非妊娠中妇女晨尿样本以及不同浓度的人绒毛膜促性腺激素(HCG)标准品评价胶体金法检测HCG的特异性和敏感性。结果 胶体金法的测试准确率99.75%,对HCG的最低敏感度达到25IU/L。结论 胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中简单、快速、准确,是目前较理想的诊断方法。

【关键词】胶体金法尿妊娠试验 育龄妇女妊娠

【中图分类号】R714.15 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2013)32-0081-02

成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后,形成胚胎,在发育成长为胎儿过程中,胎盘合体滋养层细胞产生大量的HCG,可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。当妊娠1至2.5周时,血清和尿中的HCG水平即可迅速升高,第8孕周达到高峰,至孕期第4个月始降至中等水平,并一直维持到妊娠末期[1]。HCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义,对妊娠相关疾病、滋养细胞肿瘤等疾病的诊断、鉴别和病程观察等有一定价值。常用的检测方法有血凝抑制试验、放射免疫试验(RIA)、酶联免疫法(ELISA)、单克隆抗体胶体金实验。本文通过对胶体金法尿妊娠试验对HCG的特异性、敏感性测试,评价胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取我院门诊151份停经育龄期妇女晨尿样本,50份非妊娠中妇女晨尿样本以及用HCG标准品配成0、25、50、100、200、500IU/L的溶液。151位停经育龄期妇女经复诊或随访证实。

1.2 方法

1.2.1 准确度实验

使用胶体金试纸测试151份停经育龄期妇女晨尿样本和50份非妊娠中妇女晨尿样本,重复两次,计算此方法判断育龄妇女妊娠的准确率。

1.2.2 敏感度实验

使用胶体金试纸检测0、25、50、100、200、500IU/L不同浓度的HCG溶液,得出胶体金法对HCG的最低敏感度。

1.2.3 试纸条的显色情况对比

将上述样品按浓度从低到高顺序排列,观察试纸条检测后显色情况以及其梯度的变化。以上的具体操作均在常温下严格按照说明书操作,将试纸条下端插入样品中,其深度不宜超过MAX线,5 秒后取出平放,10 min时观察结果。

2 结果

2.1 准确度实验

胶体金试纸对151份停经育龄期妇女晨尿样本和50份非妊娠中妇女晨尿样本的第一次检测准确率100%,第二次准确率99.5%,见表1。

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表1 胶体金试纸、酶联免疫法准确度比较

次序妊娠期育龄妇女晨尿样本非妊娠中妇女晨尿样

阳性阴性阳性阴性

胶体金试纸第一次检测1510050

胶体金试纸第二次检测1501050

2.2 敏感度实验

检测0、25、50、100、200、500IU/L不同浓度的HCG溶液,胶体金试纸的最低敏感度达到25IU/L,见表2。

表2 胶体金试纸、酶联免疫法敏感度比较

方法HCG IU/L

50020010050250

胶体金试纸深红深红红色红浅红无色

注:滴加溶液五分钟内观察颜色。

2.3 试纸条的显色情况

选取部分浓度值试纸条检测结果的具体显色情况。胶体金试纸条的显色浓厚、均匀,条带的边缘清晰而且层次感突出。在不同的浓度范围,试纸条的检测线与和质控线呈现出一定的规律变化。

3 讨论

胶体金是由氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金[2]。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具[3]。

本次使用的是胶体金免疫层析法,将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,当移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果[4]。该法现已发展成为诊断试纸条,使用十分方便。

随着化学发光技术的不断成熟与发展,现在临床实验室基本上配备了化学发光免疫分析仪,但由于化学发光的试剂及耗材均比较昂贵,且在 HCG检测方面其线性范围相对比较窄 (2.0~1 000mlU/mL)。而胶体金试纸具有简单、快速、准确和无污染等优点。

本实验所采用的试纸条具有良好的最低检测限、重复性 、灵敏度以及特异性。试纸条 的显色浓厚、均匀,条带的边缘清晰而且层次感突出。在不同的浓度范围,纸条的检测线与和质控线呈现出一定的规律变化。故胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中简单、快速,是目前较理想的诊断方法。

参考文献

[1]黄建平.胶体金试纸法测定人绒毛膜促性腺激素的后带现象[J].检验医学与临床,2008,5(21):1331-1332.

[2]杜建雄.胶体金早早孕测试条用于早孕诊断的临床观察[J].中国计划生育学杂志,1995.08.25,3(4):240.

[3]刘丽英.酶联免疫法检测尿HCG的临床观察[J].中华现代临床医学杂志,2005,3(18):1912-1913.

[4]袁开影.胶体金免疫层析试验检测尿液人绒毛膜促性腺激素中的钩状效应及对策[J].检验医学,2006,21(2):190.

论文作者:王鸿玲

论文发表刊物:《中外健康文摘》2013年第32期供稿

论文发表时间:2014-1-8

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