构建共定位重组载体论文_欧阳聪

欧阳聪

中南民族大学生命科学学院 430074

【摘 要】组成生物体的蛋白质大多数是在细胞质中的核糖体上合成的,各种蛋白质合成之后要分别运送到细胞中的不同部位,以保证细胞生命活动的正常进行。有的蛋白质要通过内质网膜进入内质网腔内,成为分泌蛋白;有的蛋白质则需穿过各种细胞器的膜,进入细胞器内,构成细胞器蛋白[1]。在许多分泌蛋白的研究过程中,都需要利用共定位实验来证明分泌蛋白的分泌途径。最普遍的共定位研究方法就是免疫荧光共定位。

四、讨论

由实验结果可以看出,已经成功构建了载体pCMV-3tag-Plac9和其阴性对照组载体pCMV-3tag-TRX和阳性对照组载体pCMV-3tag-CSH。它们都带有绿色荧光,再通过免疫荧光可以使它们转染的细胞带有红色荧光[2]。这样,我们可以通过激光共聚焦显微镜看出荧光间的相互作用从而判断目的蛋白的分泌途径。

参考文献:

[1]Nickel W.The mystery of nonclassical protein secretion.A current view on cargo proteins and potential export routes [J].European Journal of Biochemistry,2003,270(10):2109-2119.

[2]Palade G.Intracellular aspects of the process of protein synthesis [J].Science,1975,189(4206):347.

太原市采暖期空气PM2.5中多环芳烃来源分析

苏兵

太原市疾病预防控制中心 山西太原 030012

【摘 要】目的:了解太原市空气PM2.5中多环芳烃的来源组成。方法。结果。结论。

【关键词】采暖期;PM2.5;多环芳烃;因子分析

多环芳烃(PAHs)是一类持久性的有机污染物,广泛存在于环境中,可通过大气、水以及食物途径在人体富集,有较强的致畸、致癌和致突变性。室外多环芳烃一般主要来源于化石燃料燃烧、工业生产活动以及垃圾与秸秆木头等的焚烧。多环芳烃排放入大气中后,大部分附着于颗粒物表面,从而成为颗粒物健康危害性的一个重要方面。国际癌症研究所(IARC)已把PM2.5归为“一类致癌物”,而多环芳烃是其致癌性的关键因素之一。由于不同地区污染源、气候以及地理状况等的差异,大气中多环芳烃的污染状况亦有不同。通过一定方法进行来源分析,对于掌握该地目前各类污染源排放情况很有必要。本研究采用因子分析法(Factor analysis)对太原市2016年采暖期空气PM2.5中多环芳烃的来源进行了初步解析。

1资料与方法

1.1样品采集和前处理

在全市设置2个采样点,一个位于城市中部迎泽区,太原市疾控中心大院(点A);另一个位于城市北部尖草坪区,离太钢集团等污染企业较近(点B)。采样高度均为15m,两个采样点紧邻周边为居民区、办公楼,以及繁忙交通道路。采样时间为每月10日至16日(1、2、3、11、12月),每日采样20h。

1.2分析方法

1.2.1 采样

采样地点太原市疾病预防控制中心三楼顶;采样仪器为大气颗粒物采样器,采用中流量TH-150型(武汉天虹仪器仪表有限公司)采样器,采样平均流量为100L/min。PM2.5采样时间为2016全年每月的10-16日连续采集7天,12个月连续监测,每天采样24h,同时准确记录实际采样时间、大气压力、平均气温等资料,共获得PM2.5样品93份。

1.2.2 仪器与试剂

微量分析天平,LE225D型(德国赛多利斯公司)。

高效液相色谱仪,LC-20AT(日本岛津公司),配备二极管阵列紫外检测器、荧光检测器。色谱柱:C18反相色谱柱(4.60mm×250mm,5µm)

标准品单标和内标购自德国Dr.Ehrenstorfer Gmb,16中多环芳烃混标购自北京曼哈格科技有限公司(MANHAGE)。

玻纤滤膜(PALL Corporation),直径90mm。

实验用乙腈、甲醇均为色谱纯纯,购自美国Honeywell。实验用水为高纯水,直接购买屈臣氏蒸馏水。

1.2.3 PM2.5样品中多环芳烃成分分析

1.2.3.1 样品前处理

收集采样后的样品用二次精馏的二氯甲烷,在索氏抽提器中抽提18h。提取液经无水硫酸钠干燥,以K—D浓缩器浓缩后,过硅胶层析柱进行净化,再经高纯氮气吹脱浓缩,置换溶剂为乙腈,最后定容至1 mL。

1.2.3.2 标准曲线绘制及分析方法

配置不同浓度的标准系列,分别取10ul进样,使用峰面积定量,绘制标准曲线,每个工作日对PAHs两个不同浓度点进行测定,用以检验标准曲线。

1.3质量控制

1.3.1 PM2.5质量浓度分析

采样前、后分别将滤膜至于干燥器内恒重24h,用重量法根据采样前后滤膜的增重和标准状况采样体积,计算PM2.5和24h平均质量浓度。

1.3.2 PM2.5中多环芳烃成分分析

采样前玻纤滤膜经450℃灼烧4 h,采样后于 -20℃ 以下保存。以十氟联苯为回收率内标,测得加标回收率为79.75%~114.62%。

2结果

2.1基本描述

太原市区两个监测点采暖期多环芳烃监测结果表明,毗邻污染企业的B点的13种多环芳烃浓度均高于市中心的A点,但经对数变换后t检验显示,二者差别无统计学意义。其中,构成比较大的组分有:荧蒽、芘、苯并[g,h,i]苝、苯并[a]蒽、菲、苯并[a]蒽等,占比均高于或接近10%。

2.2来源分析

根据已有研究可知,苯并[g,h,i]苝是汽油燃烧排放的关键标志物[1],同时,苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘以及茚并[1,2,3-cd]芘与机动车排放也高度相关,故我们认为因子1代表的可能主要是以汽油燃烧为主的交通污染源。菲是燃煤排放的重要标志物,蒽也是燃煤和冶钢排放的标志之一,因此我们认为因子2可能主要代表燃煤污染,包括供暖用煤、工业用煤及燃煤电厂等。

3 讨论

因子分析法是将复杂数据降维的多元处理方法,可以通过计算变量间的内部关系,简化原变量的协方差结构,寻找其中的共同因素,将多个变量归纳为少数几个因子,从而使结果易于理解。本研究分析了太原市采暖月份空气PM2.5中13种多环芳烃成分,结合有关的污染源排放特征的资料,确定太原市空气PM2.5中多环芳烃有两个主要来源,分别为交通污染和燃煤污染,贡献分别约占2/3和1/3。徐建军在2012年冬季对太原市空气PM2.5化学组成的分析结果与本文基本一致,但其未讨论污染源贡献率。

从多环芳烃组成来看,以汽油燃烧为主导的交通污染源中,4~6环的高分子量多环芳烃为主要组分。而以发电、冶金、水泥工业为基础的燃煤污染,因可能采用无烟煤,并且炉内燃烧完全以及污染控制措施较好,排放的多环芳烃多以2~4环的低分子量组分为主,不易附着在PM2.5上。国内一些相关文献也获得了相似的结果。

由上可见,目前,太原市附着于空气PM2.5中的多环芳烃大多来自交通污染,尽管本地交通污染本身并不是PM2.5的主要贡献源,但却是PM2.5中多环芳烃的主要贡献源,应当引起足够的重视。2016年太原市将本市内出租车全部更新为纯电动汽车,是控制交通污染的一项重要举措。另外,太原市PM2.5中多环芳烃燃煤源占比较小也可能与产业升级企业停产减产有关。总之,太原市空气污染源结构简单,从交通和燃煤两个方面着手,是治理污染的关键点。

参考文献:

[1] 李英红,谭吉华,段菁春,等.中国主要排放源颗粒相多环芳烃的成分谱特征[J].环境科学与技术,2015,38(6):58-69.

*项目来源:中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所2014年卫生行业专项“雾霾天气人群健康风险评估和预警关键技术研究”(201402022)

论文作者:欧阳聪

论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2018年2月第4期

论文发表时间:2018/7/10

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