特制五谷虫脂肪酸抗肿瘤作用的实验研究论文_徐晓峰1 吴敏魁1 马其明2 包胜频2 李晓燕3 吴升1

1.南京军区杭州疗养院 江苏 南京210000;2.浙江佰科堂生物科技股份有限公司浙江 310000;3.浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心 浙江 310007

[摘要]目的:探究特制五谷虫脂肪酸抗肿瘤作用。方法:制取五谷虫脂肪酸,将荷瘤小鼠随机分为高剂量组、中剂量组和对照组3个组进行动物实验,其中高剂量组给予五谷虫脂肪酸剂量为4mg/ml,中剂量组为2mg/ml,对照组为等体积的水,比较试验后3组对荷瘤小鼠的抑瘤率 。结果:高剂量组、中剂量组对小鼠肺癌Lewis有较明显的抑瘤作用,其抑瘤率分别为50.45%和34.82%,与对照组比较,均有统计学意义(P<0.01)。结论:特制五谷虫脂肪酸对荷瘤小鼠的肺癌有较明显的抑瘤作用。

关键词:五谷虫;脂肪酸;抗肿瘤

【中图分类号】R197+3【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)08-0141-01

[Abstract] Objective: To explore the anti-tumor effect of fatty acid of special Chrysomya megacephala larvae . Methods: preparation of Chrysomya megacephala larvae fatty acid, tumor bearing mice were randomly divided into high dose group, middle dose group and the control group three groups of experimental animals, of which high dose group given the fatty acid dose of 4mg / ml, medium dose group was 2mg / ml, the control group was etc. the volume of water, the comparative test posterior three groups of tumor bearing mice tumor inhibition rate. Results: high dose group, middle dose group of mice lung cancer Lewis have more obvious anti-tumor effect, the tumor inhibition rate was 50.45% and 34.82%, compared with the control group, have statistical significance (P<0.01)). Conclusion:The fatty acid has obvious inhibitory effect on lung cancer in tumor bearing mice.

Experimental study on anti-tumor effect of fatty acid of special Chrysomya megacephala larvae

Keywords: Chrysomya megacephala larvae ;fatty acid; anti-tumor

恶性肿瘤是人类最严重致死性疾病之一,对有效的抗癌药物选择,将疾病彻底攻克,是医学界研究的重点。合成类化学药近年在治疗上取得明显成效,但受其强毒副作用的影响,使用上存在一定局限性,故对无毒、高效的抗癌药物开发,是未来研究的方向。我国传统中药在肿瘤治疗方面机制独特,毒副作用小,效果显著,已获医师和患者青睐[1]。五谷虫是我国传统中药材,为大头金蝇蝇蛆的俗称,具健脾化食、清热解毒、除小儿疳积等功效,有较高药用价值[2]。因其体内蛋白质含量居较高水平,现常作高蛋白饲料应用。经探索发现,在特定条件下完成培养的特制五谷虫具良好的体外抗肿瘤效果,本次研究是就其五谷虫脂肪酸的动物抗肿瘤作用进行实验研究,现总结如下。

1 实验材料

1.1 特制五谷虫成品:由浙江佰科堂生物科技股份有限公司提供,其培育技术已申请技术专利(专利号为201610039242.0)。

1.2 肿瘤瘤株:由中国科学院上海实验动物中心提供肺癌Lewis瘤株。

1.3 动物:C57小鼠,体重19-21g,雄性。中科院上海实验动物中心提供,生产许可证号为SCXK(沪)2007-0005。实验动物使用许可证号为SYXK(浙)2009-0122。动物饲养室温度为20℃~25℃,湿度为40%~70%。

2 实验方法与结果

2.1 制取五谷虫脂肪酸:将五谷虫成品原料粉碎到120目,用无水乙醇为溶剂,物料比8:1,用索氏提取法循环提取,水浴温度控制在80摄氏度,回流提取时间为2小时,收集油脂,制得五谷虫脂肪酸,作为本实验的受试药。

2.2 动物实验

将雄性小鼠随机分为高、中剂量组及对照组,每组受试动物10只,各组动物接种肿瘤细胞(1.0×107细胞/ml)0.2ml/只,于右侧腋下皮下注射。接种后次日给药,3组依次给予五谷虫脂肪酸为4mg/ml、2mg/ml和等量生理盐水,连续给药15天。受试组灌胃容积为0.5ml/20g,对照组给等体积的生理盐水,接种后第16天处死小鼠,称体重并剥离皮下肿瘤,称瘤重,作组间t检验,分别计算受试物的抑瘤率。

2.3 对小鼠肺癌Lewis瘤重的影响

结果见下表1:高、中剂量组对小鼠肺癌Lewis均有较明显的抑瘤作用,其抑瘤率分别为50.45%和34.82%,与对照组比较,均有统计学意义(P<0.01)。

3 讨论

五谷虫,别称蛆、谷虫等,为丽蝇科(Calliphoridae)昆虫大头金蝇(Chrysomyia megacephala Fab.)或其他近缘昆虫的干燥幼虫体,主产于广东、安徽、浙江、湖北等地,中医古籍记载:其味甘咸,性寒,无毒,入脾胃二经,功可疗热病,解毒痢,消疳积,进饮食,腐结粪。古代医家对五谷虫应用颇为广泛,认为此药可治疗小儿诸疳积疳疮,热病谵妄,毒痢作吐之证。现代医学证明,中药五谷虫含有胰蛋白酶、肠肽酶、脂肪酶、淀粉酶等,能使消化功能增强,食欲增进,具有清热、消滞功效等功效,可主治疳积、腹胀、疳疮、小儿厌食、胃脘痛等[2、3]。近年国内文献报导五谷虫具有抗菌[4-6]、愈合感染创面[7]及抗肿瘤[8]等作用。五谷虫具有多种活性物质,含蛋白质质量分数为62.70%、脂肪质量分数为11.20%、几丁聚糖质量分数为16%,氨基酸18种。近年来,国内外大量研究表明,昆虫免疫系统经外源物质诱导产生抗菌肽,而抗菌肽具有广谱性抗菌、抗病毒、抗原虫以及抗肿瘤等多重作用[9、10]。华允芬等[8] 通过溶剂萃取和油脂酶解获得2种脂肪酸FA1和FA2,其证明了FA1和FA2对人白血病细胞/人肺癌细胞均有显著的抑 制活性,其IC50值在35~65mg·L-1 ;对HIV-1整合酶同样具有强烈的抑制活性, IC50值分别为86.7mg·L-1和98.5mg·L-1。提示特定培养的五谷虫,其脂肪酸成分具有显著的体外抗肿瘤、抗 HIV-1整合酶活性。

本实验由特殊技术培育制备的五谷虫成品,用索氏提取法制得五谷虫脂肪酸作为受试药,将荷瘤小鼠随机分为高、中剂量组及对照组,发现高、中剂量组对小鼠肺癌Lewis均有较明显的抑瘤作用,其抑瘤率分别为50.45%和34.82.45%,与对照组比较,均有统计学意义(P<0.01)。说明由特殊技术培育制备的五谷虫脂肪酸具有对小鼠肺癌的抑瘤作用,其中所含有15%-16%多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA),尤其ω-6PUFA,可能是五谷虫脂肪酸动物抗肿瘤活性的物质基础。

参考文献

[1] 常楚瑞,吴建伟,国果,等.家蝇幼虫乙醇提取物的抗炎镇痛作用[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(13):113-115.

[2]孙晓亚,刘虹霞,张国刚.蟾饲五谷虫及五谷虫的研究进展.沈阳药科大学学报,2011,28(7);581-584

[3]王颖,蔡春江,梁燕等.妙用五谷虫治疗胃脘痛.中国中西医结合消化杂志,2015,(7);501-501

[4]张振,洪亮.五谷虫抗金黄色葡萄球菌物质的纯化及抗菌机制[J].中国组织工程研究,2013,17(15):2755-2760.

[5]王寿宇,张振.中药五谷虫抗菌物质的分离纯化及抗菌机制的实验研究.中华中医药学刊,2013,31(9);1843-1845

[6]张国刚,徐慰倬,张莹等.蟾饲五谷虫抗菌肽分离及抑菌试验[J].沈阳药科大学学报,2015,32(6):484-486.

[7]王寿宇,张振,刁云鹏等.活体五谷虫对压疮创面的生物清创技术研究[J].中华中医药学刊,2010,28(4):741-743.

[8]华允芬,吴江林,钱俊青.特种五谷虫脂肪酸的体外抗肿瘤、抗HIV-1整合酶活性及组成分析.昆虫学报,2008,51(2);137-142

[9]胡云龙,赵学忠,屈贤铭.抗菌肽的分子生物学研究进展[J].生物工程进展,1997,17(3):14

[10]陈留存,王金星.昆虫抗菌肽研究现状 [J].生物工程进展,1999,19(5):55

论文作者:徐晓峰1 吴敏魁1 马其明2 包胜频2 李晓燕3 吴升1

论文发表刊物:《中国医院药学杂志》2016年8月

论文发表时间:2016/10/22

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特制五谷虫脂肪酸抗肿瘤作用的实验研究论文_徐晓峰1 吴敏魁1 马其明2 包胜频2 李晓燕3 吴升1
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