自噬蛋白LC3在喉鳞癌中表达及其意义论文_刘志锋,唐超,刘利军

刘志锋 唐超 刘利军

南华大学附属第一医院耳鼻咽喉科 湖南衡阳 421001

摘要:目的 探讨自噬蛋白LC3在喉鳞癌组织中的表达与意义。方法 采用免疫组织化学方法检测LC3在声带息肉及喉鳞状细胞癌组织中的表达水平。结果 LC3在喉鳞癌组织中的表达高于声带息肉组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LC3在喉鳞癌组织中表达下调,可能参与喉癌的发生发展过程。

关键词:喉;鳞状细胞癌;自噬;LC3

喉癌经手术及综合治疗后遗留声嘶甚至失声,严重影响患者生活质量且疗效仍欠佳,其主要病理类型为喉鳞状细胞癌[1]。其明确的发生发展机制尚未完全阐明,自噬在真核细胞的降解和再循环中起着重要作用,近年来研究显示自噬改变可影响恶性肿瘤的发生发展[2]。LC3是种重要的自噬相关基因,其表达水平可反映自噬活性[3]。本文采用免疫组化法检测喉鳞癌组织中LC3的表达。现报道如下:

1 材料与方法

1.1 标本材料

收集喉鳞状细胞癌标本45例为研究对象,另外35例声带息肉标本作为对照。所有标本都由病理证实。所留喉癌标本的患者术前均未行放化疗和其他特殊治疗。45例喉鳞癌患者中,男性42例,女性3例,年龄在39~81岁(平均58岁)。

1.2 方法

采用免疫组化SP法。按试剂盒操作说明书执行,兔抗人LC3b(武汉三鹰生物技术有限公司)浓度为1:50,DAB显色(福州迈新生物技术开发有限公司),苏木精复染,脱水透明并封固。LC3b以细胞质或细胞膜染为棕黄色者为阳性细胞,取10个高倍视野,每个计数200个细胞,计数阳性细胞百分比,不表达0分,<10%计1分,10%~50%计2分,≥50%计3分。观察阳性染色的强度,无染色0分,淡黄色计1分,呈黄色2分,呈棕黄色3分。最后综合评定,两项得分相乘,1~3分为阴性,≥4分为阳性。

1.3 统计学方法

应用SPSS19.0进行统计学分析。计数资料采用χ2检验或Fisher's精确概率法,以P<0.05表示差异有统计学意义。

图1 LC3在声带息肉组织(A)和喉鳞癌组织(B)的阳性表达(SP法,×40)

2 结果

2.1 LC3在喉鳞癌中的表达

声带息肉和喉鳞癌组织中LC3阳性率为88.57%(31/35)、66.67%(30/45),喉鳞癌阳性表达率低于声带息肉组织,差异有统计学意义(χ2=5.26,P<0.05)。

3 讨论

喉癌是耳鼻咽喉科常见的恶性肿瘤之一,仅次于鼻咽癌,其中约95%为鳞状细胞癌[4]。虽然通过手术、放化疗等多种综合治疗,在一定程度上改善了5年生存率,但其发病率呈逐年上升趋势,吸烟、饮酒被认为是喉癌重要的影响因素,但迄今其具体发病及作用机制尚未完全阐明[1-5]。

自噬可以清除胞质内受损或剩余的蛋白质和细胞器,以实现细胞本身的代谢需要,另外,自噬也帮助肿瘤细胞对抗恶劣的生长环境[2]。近年关于自噬与肿瘤发生发展间的关系,是近年研究热点之一。LC3是真核细胞中Atg8基因的同源物,主位于前自噬以及自噬泡膜,是判断自噬现象的金标准之一[3]。研究发现在甲状腺癌、卵巢浆液性癌等恶性肿瘤中LC3的都表达明显下降[6-7],与本研究结果基本一致。

本研究中发现,喉鳞癌组中LC3的表达低于声带息肉组,差异有统计学意义(P<0.05)。提示自噬蛋白LC3可能与喉鳞癌的发生发展相关。

参考文献:

[1]Dubal PM,Marchiano E,Kam D et al. Laryngeal spindle cell carcinoma:A population-based analysis of incidence and survival[J]. Laryngoscope. 2015,125(12):2709-2714.

[2]Jiang X,Overholtzer M,Thompson CB. Autophagy in cellular metabolism and cancer[J]. J Clin Invest. 2015,125(1):47-54.

[3]Gong J,Munoz AR,Chan D et al. STAT3 down regulates LC3 to inhibit autophagy and pancreatic cancer cell growth[J]. Oncotarget. 2014,5(9):2529-2541.

[4]Lyhne NM,Johansen J,Kristensen CA et al. Incidence of and survival after glottic squamous cell carcinoma in Denmark from 1971 to 2011-A report from the Danish Head and Neck Cancer Group[J]. Eur J Cancer. 2016,59:46-56.

[5]Ma J,Wang J,Fan W et al. Upregulated TIMP-1 correlates with poor prognosis of laryngeal squamous cell carcinoma[J]. Int J Clin Exp Pathol. 2014,7(1):246-254.

[6]陈小林,华清泉. 自噬相关蛋白Beclin1、LC3在甲状腺癌合并颈部淋巴结转移中的表达及临床意义[J]. 川北医学院学报. 2016,31(01):84-87.

[7]晋龙,眭玉霞,孙阳 et al. 自噬相关基因Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌中的表达及临床意义[J]. 临床与实验病理学杂志. 2017,33(11):1219-1224.

论文作者:刘志锋,唐超,刘利军

论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年7月19期

论文发表时间:2018/8/24

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