刘会香 窦一凡
石家庄以岭药业股份有限公司 河北 050050
摘要：本文以黄酮类化合物与抗生素类药物这两种应用较为广泛的物质为例，对其高效液相色谱检测方法进行研究分析，以供相关人士参考。
关键词：黄酮类；抗生素；高效液相色谱；检测技术
一、黄酮类化合物与抗生素类药物概述
1、黄酮类化合物
从药用价值来讲，黄酮类化合物具有非常大的药用价值，且由于其本身种类较多，在很多植物中都能提炼出黄酮类化合物，所以这更是进一步的增强了其存在的价值。而若从化学成分的角度来讲，黄酮类化合物主要是指以黄酮为母核所衍生的所有黄色色素的统称。之所以会呈现出黄色，是因为天然的黄酮类化合物母核中存在一定的羟基、甲氧基、烃氧基等取代基作为助色团。一般来讲，天然的黄酮类化合物往往会与糖结合在一起形成苷类物质，如陈皮苷等。所以要提取黄酮类化合物入药是非常可行的，且药材来源丰富。所以对黄酮类药物的研发和生产已经引起了业内的重视，并且已经进行了深入的研究。其中高效液相色谱法是最为常用的一种方法。
2、抗生素类药物
所谓抗生素药物，主要是指能够在低浓度下对病原性微生物细胞进行有效抑制和杀灭的一类药物，如青霉素类、头孢类、阿莫西林类、罗红类等等。自20世纪40年代青霉素被研发并成功应用在医学临床上之后，抗生素类药物就开始进入了医药领域，并成为抗菌消炎的主要药物，在最初的抗生素药物生产中，主要是利用微生物次级代谢来得到相应产物，在经过近一个世纪的发展中，抗生素类药物的种类和生产方式越来越多，工艺生产水平也不断提高，目前抗生素已经可以通过合成技术来获得。而要使用合成技术来获得抗生素类药物，就必须要了解抗生素类药物的化学结构和性质。这就同样需要对其进行有效的分析。而一般在抗生素类药物的分析方法中，高效液相色谱法以其高效能、高速度、高灵敏度和较广的适应性等特点，成为了最主要的分析方法。
二、高效液相色谱法检测技术在黄酮类化合物和抗生素类药物中的应用
1、抗生素中间体S-AMOSA的高效液相色谱检测技术研究
S-AMOSA是新型高效抗生素单环β内酰胺抗生素在化学合成生产工艺中非常重要的中间体。其合成质量和成分含量对单环β内酰胺抗生素的药效有直接影响作用，所以当前业内对其进行了深入了分析。采用高效液相色谱检测技术正是一种快速准确的检测技术方法，其具体的检测方法如下所示：
准确称取S～AMOSA对照品适量，置50mL量瓶中，加适量流动相溶解，同时超声波助溶5min，待溶液冷却至室温后稀释至刻度，摇匀，制成浓度为0.12mg/mL的S～AMOSA对照品储备液，然后根据需要用流动相稀释。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆取S～AMOSA样品4.8mg，置50mL容量瓶中，先加入流动相适量，超声溶解，待溶液冷却至室温后，再用此缓冲液定容，振荡均匀，经0.45μm孔径的滤膜过滤，即得。取对照品溶液在200～800nm范围内扫描，结果在211nm处有最大吸收，因此检测波长确定为2l1nm。
在此基础上进行专属性试验、线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验与加样回收率试验，并最终进行了样品测定。即制备供试品溶液3批，进样20μL，在上述色谱条件下测定峰面积，按外标法计算S-AMOSA的含量，结果分别为lg中含S-AMOSA650mg，647mg，641mg。通过试验结果可以看出，在对S-AMOSA进行检测时采用高效液相色谱法不但简单易操作，而且所需适用的试剂非常安全简单，所获得的检测结果准确可靠，无论是准确度还是精密度都达到了理想的效果。更重要的是其重新性也很好，回收率高，所以完全可以作为抗生素类药物的检测分析方法。
2、RP—HPLC法分离测定动物肝脏中多种维生素的含量
水溶性维生素是人体在进行正常代谢和运动过程中所必需有记性化合物，该物质能够直接影响到人体的健康状态。人体每天在摄入食物的过程中，所吸收到的维生素量较少，但仅就这一部分维生素就能够对人体生理产生较大的作用。但是一旦人体所摄入食物中缺乏了某些维生素物质，就会使得人体不健康，代谢功能紊乱。在对维生素类抗生素物质进行测定的过程中，主要采用的有紫外分光光度法、荧光法、高效液相色谱法，几种不同方式相比较而言，紫外分光光度法使用范围较广，缺少专一属性，所得出的结果误差较大。荧光法的实际操作过程中较为复杂，并且分辨率极差，目前已经很少使用。而高效液相色谱检测技术在近几年来，由于其自身的大量优势，已经被广泛的应用在了药物和抗生素片剂的分析和测定工作之中本文用反相HPLC～对多种动物肝脏中水溶性维生素c，B1，B6和B：同时进行测定，通过改变流动相的组成及其pH值等色谱条件，在短时间内实现了维生素c—B1，B6和B：的分离。该法分离效果好，测试费用低，适用性强。
3、漆黄素的高效液相色谱检测技术研究
漆黄素是黄酮类化合物所衍生出的一种物质，其自身有看丰富的生理活性，该物质已经在医学临床上得到到了证明，其自身具有抵抗病毒以及对黄疽型病毒肝炎产生较好治疗作用的物质，除了医学治疗效果以外，漆黄素还有着前景极为广阔的抗氧化剂作用，他能够对人体中的PMA进行清除，并且对人体中所存在的中性包细胞进行刺激，从而产生AOR，最大限度的避免过氧化氢在人体中释放。就目前来说，对于该技术的研究内容还较少，能够对漆黄素进行检测的主要手段则是高效液相色谱发法，在实际进行检测的过程中，还要区分为荧光法、光度法。
化学发光因其具有灵敏度高、检出限低、线性范围宽、仪器简单等优点而倍受关注。化学发光检测技术与高效液相色谱相结合，能较好的克服化学发光选择性差的弱点，因而使得HPLC—CL成为一种有效的痕量和超痕量分析技术，实验发现，K3Fe6（CN）6与Luminol在碱性介质中，所产生的化学发光，能被漆黄素大大增强，且发光强度与漆黄素在一定浓度范围内呈线性关系；以甲醇作为流动相，基线稳定，脉动小，且使样品能达到基线分离。基于此，建立了测定人体血清中的漆黄素的HPLC—CL新方法，检出限为2．7×10g／L，线性范围为7．7xl0-6×9．6×10-4g／L，相关系数r=0．9998。对1.2×10-6g／L的漆黄素平行测定11次，得该方法的相对标准偏差为2．41%。
结束语
总之，无论是应用广泛的黄酮类化合物，还是有着很强抗菌能力的抗生素类药物，都可以通过采用高效液相色谱检测技术来对其含量和成分进行检测。且检测结果准确可靠，操作方便快捷，重现性良好。
参考文献：
[1]李莉.现代提取分析技术在黄酮类化合物中的应用[J].江西食品工业，2006（4）.
[2]王忠凤.高效液相色谱法测定黄酮类物质研究进展[J].食品研究与开发，2003，24（6）.
论文作者:刘会香,窦一凡
论文发表刊物:《健康世界》2015年5期供稿
论文发表时间:2015/10/23
标签：抗生素论文; 高效论文; 色谱论文; 液相论文; 类药物论文; 黄酮论文; 类化合物论文; 《健康世界》2015年5期供稿论文;