摘要：本文就鸡新城疫的实验室诊断技术进行了具体的介绍，从流行特点、临床症状、病理变化以及实验室诊断四个方面就鸡新城疫与禽流感、鸡霍乱的鉴别诊断方法进行了分析，希望能够为鸡新城疫的诊断工作提供参考以及借鉴，进而促进我国养鸡产业得以进一步发展。
关键词：鸡新城疫；实验室诊断；鉴别
鸡新城疫又被称为亚洲鸡瘟，其病原为新城疫病毒，该病传染性很强，具有很高的发病率以及死亡率。鸡只患病后，常常出现无法正常呼吸、严重下痢以及神经症状，对其进行剖检，可以看到病鸡消化道内存在呈弥漫性的溃疡或者点状出血。当前，主要结合临床症状以及病理变化对该病进行初步诊断，要想对该病进行确诊，还需依靠实验室诊断工作。
1 实验室诊断
1.1病毒分离
病鸡表现出相关临床症状以后，其绝大多数器官以及分泌物中已经存在大量的病毒。病鸡脑、肺、脾以及呼吸道分泌物均可作为病毒分离的材料。如果死鸡已经发生了腐败，应当从骨髓分离病毒。在实际诊断过程中，最好采用接种孵化9-10天的鸡胚来分离病毒。在无菌条件下提取病料，采用生理盐水将病料稀释10倍或者20倍制为悬浮液，采用离心机离心后取上清液，加入300-500IU/ml的青霉素或者100-300μg/ml的链霉素，接着在0-4℃的环境中放置4h或者在37℃的环境中放置1h。提取0.1ml上述清液并将其接种于鸡胚尿囊腔中。如果病毒为强毒株，仅仅2-3天即可将鸡胚杀死；如果病毒为弱毒株，通常需要4-6天来杀死鸡胚。每天需要对鸡胚进行检查，在此过程中一旦发现死亡，需要立即收集尿囊液以开展细菌检查、血凝试验以及血凝抑制试验。为了加快诊断的速度，也可以在鸡胚死亡之前，采用注射器将尿液吸出以开展检查工作，接着将鸡胚放入温箱进行孵化，通常接种36h后即可检测出血凝素。
1.2 血凝抑制试验
如果抗鸡新城疫血清能够对可疑病毒对红细胞所产生的凝集作用进行有效抑制，即可将该病毒判定为鸡新城疫病毒[1]。另外，可以通过鸡新城疫病毒判断病愈鸡血清内是否存在能够对红细胞凝集进行抑制的抗体，从而诊断出病鸡是否感染了新城疫。如果可疑病鸡其血清能够对新城疫病毒对血红细胞的凝集作用进行有效抑制，即可确定该鸡曾经患有新城疫。通常情况下，对于急性病鸡，在其死亡之前血液中往往不存在抗体，如果病程能够达到5-6天，病鸡血液中级存在血凝抑制抗体；如果病程超过了10天，其抗体效价甚至可以达到1：1280。
1.3 血清中和试验
血清中和试验就是采用已知血清来对可疑病毒进行鉴定，或者采用病毒来检测血清内是否存在特性抗体，进而确定鸡只是否感染果新城疫。将定量的待检病毒或者已知病毒加入到及新城疫的免疫血清内或者待检血清内，将其混合后向发育鸡胚或者存在易感性的鸡进行注射，在此过程中采用不加血清的病毒作为对照。如果注射了血清以及病毒混合材料的鸡胚或者鸡不存在死亡现象，但是对照鸡只已经死亡，即可将待检病毒确诊为新城疫病毒。另外，也可以向稀释倍数不同的血清内分别加入定量的病毒从而确定血清的中和抗体量。
1.4 琼脂扩散试验
在三角瓶内分别加入2g聚乙二醇、1g琼脂粉、8g氯化钠以及100ml蒸馏水，在加热融化后将其导入到平皿内，冷却后进行打孔，接着采用酒精灯对孔底进行加入以封底，同时置于4℃的冰箱内保存备用。采集死鸡脑、肝、蜱、肺、气管黏液、盲肠扁桃体以及出血肿大的淋巴结，如果死鸡为幼鸡，可以采集其胸腺以及法氏囊，将其加入小塑料管内并加入适量的水，剪碎后研为糊状。对于每一组孔，将新城疫阳性血清加入到中央孔内，将待检脏器乳剂以及阳性抗原对照加入到周边孔内，在盒内底层铺入湿纱布后置入平皿，加盖后置于37℃的环境中，24h后对结果进行观察直至72h。如果被检脏器以及阳性血清检存在沉淀线，即可诊断为阳性；如果被检脏器内存在新城疫抗原，表明病鸡死于新城疫。
2 鉴别诊断
2.1 与禽流感的鉴别
2.1.1 流行特点
鸡新城疫很少在鸭中发生，但是禽流感可感染鸭。
2.1.2 临床症状
患有禽流感的病鸡通常头和肉垂肿胀，同时颜色为蓝紫色，而新城疫病鸡通常头部肿胀，其鸡冠颜色为暗红色，在发病后期会出现扭头、勾头以及瘫痪等各种神经症状。
患有禽流感的病鸡其胫部鳞片下可以看到出血点，但是新城疫病鸡很少或者不存在出血点。
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2.1.3 病理变化
禽流感病鸡心冠脂肪以及腹部脂肪存在出血现象，在其心内外膜可见出血以及坏死病灶，新城疫病鸡这些部位很少发生病变。
禽流感病鸡胰腺存在出血现象，新城疫病鸡胰腺无。
禽流感病鸡卵泡萎缩同时存在出血现象，不断液化，最终形成筋膜。卵泡上可见黄色纤维素性渗出物，输卵管可见脓性或者凝蛋清样的分泌物，新城疫病鸡输卵管内部存在分泌物。
禽流感病鸡肠道黏膜存在脱落现象，新城疫病鸡无。
禽流感病鸡十二指肠以及回肠淋巴滤泡暴露，但是新城疫病鸡十二指肠、回肠以及卵黄蒂下端部位淋巴滤泡存在肿大现象以及出血症状，如果病情较为严重，还会出现呈纽扣状的坏死灶[2]。
禽流感病鸡颈部皮下、食道黏膜以及食道乳头均存在出血现象，新城疫病鸡无。
禽流感病鸡腺胃乳头存在肿大出血现象，同时其腺胃黏膜存在出血现象，新城疫病鸡腺胃乳头、腺胃以及肌胃交界处、腺胃以及食道交界处均存在出血以及溃疡。
新城疫病鸡气管上部以及气管黏膜存在出血现象，同时可见粘液，禽流感病鸡器官不存在明显变化，
禽流感病鸡头部皮下可见胶样或者干酪样的渗出物，新城疫病鸡无。
禽流感病鸡喉头部位不存在明显变化，新城疫病鸡喉头水肿并出血。
2.1.4 实验室诊断
禽流感病毒可以对马、山羊以及绵羊红细胞进行凝集，新城疫病毒不行。
2.2 与鸡霍乱的鉴别
2.2.1 流行特点
鸡霍乱主要感染蛋鸡以及育成鸡，雏鸡很少发生，而鸡新城疫雏鸡的发病率以及死亡率明显高于大龄鸡。鸡霍乱还可导致鸭以及鹅的死亡，鸡新城疫很少发生于鸭以及鹅[3]。
2.2.2 临床症状
鸡霍乱病鸡不存在神经症状，新城疫病鸡雏鸡以及病程较长的成年鸡会出现痉挛、翅膀麻痹等神经症状。
鸡霍乱慢性病鸡肉垂、翅膀以及足关节部位发生肿胀，新城疫病鸡无。
鸡霍乱病鸡存在剧烈的腹泻现象，其粪便颜色为深绿色或者灰黄色，常常出现下痢带血现象；新城疫病鸡粪便为黄绿色或者黄白色，呈水状，一些病鸡存在下痢带血现象，有时粪便中混有血液。
2.2.3 病理变化
鸡霍乱病鸡腹部脂肪、腹胃、肌胃粘膜无明显症状。新城疫病鸡腹部脂肪存在点状出血现象，腹胃以及肌胃粘膜可见出血以及麻痹现象。
鸡霍乱病鸡存在出血性肠炎。新城疫病鸡肠粘膜表现为纤维素性坏死性肠炎，表增可见出血坏死[4]。
鸡霍乱病鸡肝脏表面可见明显的灰白色小坏死灶。新城疫病鸡无。
2.2.4 实验室诊断
鸡霍乱病鸡肝组织触片染色镜检可以看到两级着色的巴氏杆菌，新城疫病鸡肝组织触片镜检无细菌。
3 结语
鸡新城疫作为养鸡过程中发病率较高的疾病，一旦发生会造成较为严重的损失。鸡新城疫的症状与禽流感、鸡霍乱较为相似，因而需要对这几种疾病进行有效区分并诊断性的开展治疗工作，在降低经济损失的同时，使养殖户自身的安全得到保证。
参考文献
[1] 刘峰. 鸡新城疫的实验室诊断技术[J]. 畜牧与饲料科学, 2009, 30(11-12): 111-113.
[2] 马艳华, 李仁, 付延军, 等. 禽流感与鸡新城疫的区别诊断[J]. 吉林畜牧兽医, 2018, (1): 47-48.
[3] 杨善爱. 鸡新城疫与鸡霍乱的鉴别诊断[J]. 养禽与禽病防治[J]. 2017, (11): 37-38.
[4] 邵贵彬. 鸡新城疫与鸡霍乱的鉴别诊断[J]. 畜禽业, 2017, (7): 56.
论文作者:黄伊颖
论文发表刊物:《基层建设》2019年第31期
论文发表时间:2020/4/20
标签：疫病论文; 霍乱论文; 血清论文; 禽流感论文; 病毒论文; 新城论文; 现象论文; 《基层建设》2019年第31期论文;