朱晓英[1]2000年在《低磷及依普拉芬对笼养蛋鸡骨代谢、内分泌及生产的影响》文中指出120只19周龄依莎蛋鸡随机分成三组，分别饲喂含总磷（TP）0.58、0.44、0.30（含有效磷（AP）0.4、0.25、0.10）的日粮21周。实验期间每隔两周同步测血钙、血磷、碱性磷酸酶、骨钙素、降钙素、雌激素，测定骨密度（BMD）、蛋壳厚度、强度及体重；每一个月杀鸡取胫跖骨，进行组织学检查；记录产蛋数。 结果表明：饲喂TP：0.58、0.44的蛋鸡生产性能无显著差异，而饲喂TP：0.30的蛋鸡产蛋、体重、蛋壳品质都有显著下降；不同磷饲喂组血钙、血磷无显著差异；TP：0.30的鸡血液骨钙素、碱性磷酸酶与对照组相比有显著提高；本实验中试验组血液雌激素无显著变化。骨组织学检查显示；实验开始时，蛋鸡皮质骨、髓质骨正常，可见少量破骨细胞；实验中期，磷缺乏组皮质骨出现大量吸收腔，吸收腔，骨小梁表面可见大量破骨细胞，且TP：0.30组情况比TP：0.44组严重。随着实验的延续，皮质骨吸收腔面积增大，吸收腔及破骨细胞数量增多。同时发现，实验后期对照组骨切片可见大量破骨细胞及少量小的骨吸收腔。 结论：日粮TP：0.44可能就在临界磷范围内，不影响蛋鸡生产性能，但对骨骼已造成隐性损害。
许海军[2]2003年在《几种生理调节剂对去卵巢大鼠骨质疏松症防治机理的研究》文中研究表明骨质疏松症是一种影响人类身体健康的重要疾病。某些畜禽骨质疏松症发病率也很高，如笼养蛋鸡。研究表明，虽然大豆黄酮、金雀异黄酮、依普拉芬等生理调节剂均有一定的防治骨质疏松症的作用，但它们的确切防治效果及作用机理不明显，文献报道不一。半胱胺是一种生长抑素的耗竭剂。它可提高生长激素的水平，促进生长，但它有无防治骨质疏松症作用，仍不详。本研究的目的是通过骨质疏松动物模型，研究几种大豆异黄酮和半胱胺对防治骨质疏松症效果及其作用机理，为防治人及笼养蛋鸡骨质疏松症提供依据。实验分两个部分。 1．IP98和Ge对防治去卵巢大鼠骨质疏松症比较研究 目的：探讨IP98和金雀异黄酮(Ge)对去势大鼠骨代谢的影响，以比较它们的疗效。 方法：选用70只3月龄大鼠随机分为假手术组(Sham)，去势对照组(OVX)，IP98治疗组(OVX+IP98)，金雀异黄酮治疗组(OVX+Ge)四组。Sham组、OVX组饲喂基础日粮；OVX+IP98组在基础日粮中添加100 mg·kg~(-1)的IP98，OVX+Ge组在基础日粮中添加50mg·kg~(-1)的金雀异黄酮。实验持续3个月。每个10天测定体重，实验结束时，分别测定骨密度、血清AKP、StrACP、BGP、E_2等。 结果：与假手术组比较，去势对照组、IP98治疗组、金雀异黄酮治疗组体重均显著增加(P＜0.01)，但去势各组间差异不显著(P＞0.05)；IP98治疗组血清AKP、BGP、StrACP水平比去势对照组显著降低(P＜0.05)，也低于假手术组，但Ge治疗组血清AKP、StrACP比IP98有增高的趋势(P＞0.05)，而BGP则显著高于OVX+IP98组(P＜0.05)；假手术组雌激素水平显著高于去势对照组、IP98治疗组、Ge组(P＜0.01)。IP98治疗组雌激素水平与去势对照组比较差异不显著(P＞0.05)，Ge治疗组则差异显著(P＜0.05)，也高于IP98治疗组。各组骨密度(BMD)差异不显著(P>0 .05)。 结论:本试验每公斤大鼠饲料中分别添加IP98 IO0mg和金雀异黄酮somg均有改善骨代谢标志物的作用，证实两者对防止去卵巢诱发的骨丢失均有效，但IP98作用更明显。2.大豆黄酮和半耽胺对去卵巢大鼠骨质琉松症的防治作用 方法:120只3月龄雌性SD大鼠，进行双侧卵巢切除术和假手术，将其随机分为假手术组(sham)、去卵巢对照组(OVX)、治疗组(OVX+CS300 mg/kg)及预防组(OvX+大豆黄酮40Om留kg+半胧胺300m留kg)。术后3个月屠宰半数大鼠，余数在另3个月后屠宰。每两周称重一次，取大鼠椎骨及股骨用于骨矿密度(BMD)测定，收集血样分析血钙、血磷、碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(BGP)、雌激素( EZ)、生长激素(GH)和降钙素(CT)。 结果:大鼠体重随其周龄的增长而增加，半肤胺治疗组增重最快，半肤胺+大豆黄酮组体重低于去势对照组，假手术组增重最慢:半胧胺治疗组AKP、BGP水平除显著高于假手术组和去势对照组(P<0.05，尸<0.01)，也显著高于大豆黄酮组。但大豆黄酮组AKP、BGP水平均低于或显著低于去势对照组(尸<0.05);试验中、后期，半肤胺组和半胧胺+大豆黄酮组血钙水平均显著低于假手术组和去势对照组(尸<0.05)，各组间血磷水平无显著变化:降钙素水平在试验中期仅半胧胺组高于其他各组，试验后期各组间无显著性差异;在试验中、后期，假手术组雌激素水平极显著高于去势对照组和治疗组(P<0.01);试验后期半肤胺治疗组GH水平显著高于假手术组和去势对照组(尸<0 .01)，但半肤胺+大豆黄酮组GH水平却显著低于半胧胺(尸<0.05);试验中期各去卵巢组右侧股骨骨密度明显下降(P<0.0l)，但试验后期由于受体重的影响，各组之间变化不大(尸为.05)。 结论:大鼠去双侧卵巢后3个月可建立骨质疏松症动物模型。骨代谢标志物显示，长期使用大豆黄酮对阻止骨丢失有效，半肤胺效果不甚明显。
王磊[3]2009年在《依普拉芬对体外鸡胚小肠上皮细胞新型钙离子通道表达的影响》文中认为试验I、鸡胚小肠上皮细胞培养与鉴定目的：培养鸡胚小肠上皮细胞。方法：从18日龄鸡胚中取一段十二指肠段,用组织块培养法和以50μg·mL-1嗜热菌蛋白酶与0.2μg·mL-1胶原酶I型联合消化获取的肠隐窝,在37.5℃、5% CO2的条件下,用含5%胎牛血清的完全培养基培养小肠上皮细胞。用差速消化法和差速贴壁法,进一步纯化、传代。采用形态学观察、Giemsa染色和免疫化学染色法进行小肠上皮细胞鉴定。结果：组织块培养法和酶联合消化培养法都可以得到鸡胚小肠上皮细胞,纯化后纯度理想。结论：鸡胚小肠上皮细胞培养成功,培养的细胞纯度理想,为下一步研究提供了实验材料。试验Ⅱ、依普拉芬对鸡胚小肠上皮细胞生长的影响目的：在建立鸡胚小肠上皮细胞体外培养方法的基础上,研究依普拉芬对鸡胚小肠上皮细胞增殖、分化和代谢功能的影响。方法：取生长状态良好的第二代小肠上皮细胞接种于96孔板,添加含1%FBS的DMEM对照组和含不同浓度的依普拉芬实验组,72 h后分别用MTT法、PNPP法测定小肠上皮细胞增殖率和小肠上皮细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性。结果：(1)与对照组相比,10-6 mol·L-1,10-7 mol·L-1和10-8 mol·L-的依普拉芬均显著促进小肠上皮细胞增殖(P<0.01); 10-5mol·L-1依普拉芬显著抑制小肠上皮细胞的增殖(P<0.01)；(2)与对照组相比,10-6 mol·L-1、10-7 mol·L-1和10-8 mol·L-1依普拉芬极显著促进小肠上皮细胞ALP活性(P<0.01),10-9mol·L-1显著促进小肠上皮细胞ALP活性(P<0.05); 10-5mol·L-1(?)勺依普拉芬显著抑制小肠上皮细胞内ALP活性(P<0.01)。结论：依普拉芬能显著促进小肠上皮细胞的增殖；使小肠上皮细胞内的ALP显著增加；但依普拉芬浓度越大,其上皮细胞则呈现明显的抑制作用。试验Ⅲ、依普拉芬对鸡胚小肠上皮细胞钙离子通道基因表达的影响目的：在建立鸡胚小肠上皮细胞体外培养方法的基础上,研究TRPV6在小肠上皮细胞上表达的定位以及依普拉芬对TRPV6、CaBP-D28k和PMCA1b mRNA表达的影响。方法：免疫细胞化学方法研究TRPV6表达定位；用含10-6mol·L-1、10-7mol·L-1、10-8mol·L-1、10-9mol·L-1和10-10mol·L-1不同浓度的依普拉芬以及含1% FBS的DMEM对照组处理第二代鸡胚小肠上皮细胞72 h后,用RT-PCR方法检测其TRPV6、CaBP-D28k和PMCA1b mRNA表达量变化。结果：(1) TRPV6表达定位于鸡胚小肠上皮细胞胞膜上；(2)与对照组相比,10-6 mol·L-1,10-7 mo·L-1、10-8 mol·L-1依普拉芬显著上调PMCA1b和CaBP-D28k mRNA的表达(P<0.01),10-9 mol·L-1依普拉芬作用下TRPV6的表达出现明显上升(P<0.05),10-6 mol·L-1、10-7mol·L-1、10-8 mol·L-1依普拉芬能够显著上调TRPV6 mRNA表达(P<0.01)。结论：鸡胚小肠上皮细胞胞膜上存在TRPV6表达；依普拉芬能显著上调小肠上皮细胞TRPV6、CaBP-D28k和PMCA1b mRNA表达量。
参考文献：
[1]. 低磷及依普拉芬对笼养蛋鸡骨代谢、内分泌及生产的影响[D]. 朱晓英. 南京农业大学. 2000
[2]. 几种生理调节剂对去卵巢大鼠骨质疏松症防治机理的研究[D]. 许海军. 南京农业大学. 2003
[3]. 依普拉芬对体外鸡胚小肠上皮细胞新型钙离子通道表达的影响[D]. 王磊. 南京农业大学. 2009
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