(武汉名韩医疗美容门诊部 湖北 武汉 430050)
【中图分类号】R62 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2018)02-0170-02
自体脂肪注射移植是将患者自体的脂肪组织在抽吸和处理后注射移植到接受部位,以达到接受部位丰满塑形的效果。其主要缺点是成活率低,手术3个月后移植脂肪大部分被吸收;另外还可能出现移植脂肪液化、钙化、坏死,坏死的脂肪颗粒还会引起囊性纤维化和假性囊肿。为了解决以上问题,近期研究表明,脐带血干细胞(human Umbilical Cord Blood Stem Cell, hUCBSC)具有多向细胞分化,可分化为脂肪细胞、神经细胞等[1],其细胞更原始,分化能力更强,污染率低,免疫细胞抗原性弱,外源基因易于表达等优点而将其作为一种新的干细胞来源,用于组织修复具有广阔前景,但是其和自体脂肪混合进行面部填充没有相关的报道。
本院从2015年1月-2017年2月,收治面部凹陷需要填充脂肪患者40例,采用人脐带血干细胞混合自体脂肪颗粒修复患者颜面部凹陷畸形,以期为脐带血干细胞应用于自体脂肪颗粒填充提供更多的理论依据,并对其进行随访。以评价该技术的长期临床疗效。
1.临床资料
40例,均为女性,年龄25~42岁,平均年龄32岁;采用人脐带血干细胞混合脂肪颗粒方法,美容性面部年轻化丰全面术22例、全面部皮下软组织萎缩症丰面治疗5例、面部萎缩症矫治13例;所有受术者在术前、术后均拍摄照片和随访;客观测量验证颗粒脂肪注射移植术后的寿命。
2.手术方法
2.1 hUCBSC混悬液制备
足月分娩健康产妇(乙型肝炎病毒标志、艾滋病、梅毒抗体等检测阴性)脐带血由湖北省干细胞库提供,产妇及家属均签署知情同意书,实验方案经医院医学伦理委员会批准。取新鲜脐带血(6h内用毕),用磷酸缓冲液(PBS)等倍稀释后置于50ml离心管中,按1:1比例加至人淋巴细胞分离液,4℃、2000r/min离心20min后脐带血分5层,中间白膜层即为单个核细胞:用移液器小心吸取富含单个核细胞的悬液放人另一离心管内,4℃、1000r/min离心15min,PBS洗涤3次;用低糖DMEM培养液悬浮,计数细胞浓度为5×105/m1,hUCBSC混悬液制备成功。
2.2 脂肪组织制备
颗粒脂肪组织准备常规吸脂后脂肪组织离心(1200g*10min)。离心后液体由上至下分为油脂层、脂肪层、沉淀层(含大量血细胞成分)。吸出油脂层,弃去。将脂肪层重新收集至50ml离心管,加人等量生理盐水,混匀。离心(1200g,5min)。收集脂肪层中颗粒脂肪组织,备用。
2.3 干细胞一脂肪复合组织形成和移植
将脐带血干细胞液和颗粒脂肪组织混合,混匀10min,使干细胞充分附着颗粒脂肪,形成干细胞一脂肪复合组织。移植部位以1%利多卡因浸润麻醉,用微量可控注射器进行干细胞一脂肪复合组织局部注射,注射深度为皮下层,进行多点均匀注射。注射后局部适度加压包扎。
2.4 临床疗效评价
通过术前和术后照相,对比变化。评价标准:明显改善(原有症状消失或明显减轻)、有效(原有症状部分消失,需重复治疗)和无效(原有症状无变化)。皮肤检测:采用VISIA专业皮肤图像分析系统(美国)检测术前术后皮肤皱纹、斑点、毛孔、纹理的变化。在正面遮照条件下分析密度和大小,由系统自带软件转化为定量数据。通过定量数据评价术前和术后变化。患者主观评价:采用问卷调查方式进行,评价标准分为满意(自觉改善明显,效果持久)、有效(自觉有部分改善)、不满意(自觉无明显改善,或改善维持时间过短)。
3.结果
干细胞一脂肪复合组织移植后,通过12个月临床随访,观察症状均有不同程度的改善,其中,明显改善者20例,有效者17例。皮肤在皱纹、斑点、毛孔、纹理4个方面定量分析数据均降低,显示移植后皮肤特性发生改变。37例患者对治疗效果满意或自觉有效,3例面部老化患者自觉效果不明显,总满意率92.5%(图1)。无患者出现感染、排斥和其他不良反应发生。
4.讨论
人脐带血干细胞是脐带以及胎盘近胎儿侧血管内的血液,包括间充质干细胞以及造血干细胞,其是一种具有多向分化潜能以及高度自我更新能力的干细胞。脐带血干细胞取材方便,来源广泛,增殖分化能力强,免疫原性弱,移植物抗宿主病发生率低,越来越多地被应用于临床治疗各种类型的疾病[4-6]。人脐带血干细胞发挥作用的机制可能包括向功能细胞分化和分泌生长因子两方面。
人脐带血干细胞可以分泌多种生长因子,如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子,进而使胶原合成和血管生成增加,使皮肤质地发生变化[7],且人脐带血干细胞在真皮层的微环境中,可分化为成纤维细胞,而皮肤成纤维细胞在皮肤衰老过程中亦发挥关键作用。成纤维细胞是细胞外基质蛋白、糖蛋白、粘附分子和各种细胞因子的来源[8],并直接影响角质形成细胞、脂肪细胞和肥大细胞。本研究探讨人脐带血干细胞在临床中的应用,将体外培养的人脐带血干细胞回注到患者皱纹部位的真皮浅层,如颈纹、鱼尾纹、鼻唇沟、眉间纹等,结果显示,皱纹均得到明显改善。可见,人脐带血干细胞可进行除皱治疗,其在面部年轻化中的应用将受到更多的关注。
【参考文献】
[1] Kang XQ,Zang WJ,Bao U,et a1.Differentiating characterization of human umbilical cord blood·derived mesenchymal stem cells in vitro [J].Cell Biol Inter,2006,30:569-575.
[2] Kuznetsov SA,Mankani MH,Gronthos S,et a1.Circulating skeletal stem cells.J CelI Bio1.2001:153(5):1133-1140.
[3] Rosada C,Justesen J,Melsvik D,et a1.The human umbilical cord blood:a potential source for osteoblast progenitor cells.Calcif Tissue Int.2003:72(2):135-142.
[4] LIN J,LINDSEY M L, ZHU B,et al.Effects of surface-modified scaffolds on the growth and differentiation of mouse adipose-derived stromal cells[J].J Tissue Eng Regen Med, 2007,1(3):211-217.
[5] VARMA M J,BREULS R G, SCH0UTEN T E, et al. Phenotyplcal and functional characterization of freshly isolated adipose tissue-derived stem cells[J].Stem Cells Dev, 2007,16(1):91-104.
[6] WOSNITZA M,HEMMRICH K, GROGHR A, et a1. Plasticity of human adipose stem cells to perform adipogenic end endothelial differentiation [J] .Differentiation,2007,75 (1);12-23.
[7] Han Y,?Tao R,?Han Y,?Sun T,?Chai J,?Xu G,?Liu J.Microencapsulated VEGF gene-modified umbilical cord mesenchymal stromal cells promote the vascularization of tissue-engineered?dermis: an experimental study[J]. Cytotherapy.?2014 Feb;16(2):160-9.
[8] GIMBLE, J M,GUILAK F, BUNNELL B A. Clinical end preclinical translation of cell-based therapies using adipose tissue-derived cells[J].Stem Cell Res Ther, 2010,1(2):19.
论文作者:朱凯林
论文发表刊物:《医药前沿》2018年1月第2期
论文发表时间:2018/2/28
标签:干细胞论文; 脂肪论文; 细胞论文; 脐带血论文; 颗粒论文; 组织论文; 面部论文; 《医药前沿》2018年1月第2期论文;